Name: Entomopatojenik Mantarların Virülans Taraması için Biber Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Yetiştirme Sisteminin Kurulması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Öğrenin, Scirtothrips dorsalis için ayrılmış yaprak biyosayım protokolü kullanarak entomopatojenik mantar virülans taraması yapmayı. Bu yöntem, yüksek hayatta kalma oranları ve senkronize gelişim sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kumar, V., Kakkar, G., McKenzie, C. L., Seal, D. R., Osborne, L. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKumar%2C+V+%22Weed+and+pest+control-conventional+and+new+challenges%22">Weed and pest control-conventional and new challenges</a>. , 53-77 (2013).</li>
<li>Hoddle, M. Scirtothrips dorsalis (chilli thrips). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHoddle%2C+M+%22CABI+Compendium%22">CABI Compendium</a>. , Wallingford, CT, USA. (2022).</li>
<li>Liburd, O. E., Panthi, B. R., Phillips, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chilli+thrips+on+blueberries+in+Florida%3A+ENY2053%2FIN1298%5BTitle%5D)+AND+%22EDIS%22%5BJournal%5D)">Chilli thrips on blueberries in Florida: ENY2053/IN1298.</a> EDIS. 2020 (6), (2020).</li>
<li>Gopal, K., Krishna Reddy, M., Reddy, M., Muniyappa, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmission+of+peanut+yellow+spot+virus+%28PYSV%29+by+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+groundnut%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phytopathol+Plant+Prot%22%5BJournal%5D)">Transmission of peanut yellow spot virus (PYSV) by thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in groundnut.</a> Arch Phytopathol Plant Prot. 43 (5), 421-429 (2010).</li>
<li>Prasada Rao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+range+of+tobacco+streak+virus+in+India+and+transmission+by+thrips%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">The host range of tobacco streak virus in India and transmission by thrips.</a> Ann Appl Biol. 142 (3), 365-368 (2003).</li>
<li>Chang, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+and+selection+of+an+entomopathogenic+fungal+library+from+soil+samples+for+controlling+Spodoptera+litura%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Sustain+Food+Syst%22%5BJournal%5D)">Construction and selection of an entomopathogenic fungal library from soil samples for controlling Spodoptera litura.</a> Front Sustain Food Syst. 5, 596316(2021).</li>
<li>Yang, C. J., Nai, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+aphidicidal+effect+of+entomopathogenic+fungi+against+mustard+aphid%2C+Lipaphis+erysimi+%28Kalt.%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of aphidicidal effect of entomopathogenic fungi against mustard aphid, Lipaphis erysimi (Kalt.).</a> J Vis Exp. (197), e65312(2023).</li>
<li>Liu, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+selection+of+entomopathogenic+fungi+from+soil+samples+and+evaluation+of+fungal+virulence+against+insect+pests%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and selection of entomopathogenic fungi from soil samples and evaluation of fungal virulence against insect pests.</a> J Vis Exp. (175), e62882(2021).</li>
<li>Aristizábal, L., Chen, Y., Cherry, R., Cave, R., Arthurs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+biorational+insecticides+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%2C+infesting+roses+under+nursery+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Entomol%22%5BJournal%5D)">Efficacy of biorational insecticides against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae), infesting roses under nursery conditions.</a> J Appl Entomol. 141 (4), 274-284 (2017).</li>
<li>Francis, J. R., Manchegowda, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogenetic+identification+of+Metarhizium+and+Beauveria+and+their+bio-efficacy+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Trop+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogenetic identification of Metarhizium and Beauveria and their bio-efficacy against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> Int J Trop Insect Sci. 43 (3), 909-918 (2023).</li>
<li>Arthurs, S. P., Aristizábal, L. F., Avery, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+against+chilli+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi against chilli thrips, Scirtothrips dorsalis.</a> J Insect Sci. 13 (1), 31(2013).</li>
<li>Subramaniam, M. S. R., Babu, A., Deka, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lecanicillium+lecanii+%28Zimmermann%29+Zare+%26+Gams+as+an+efficient+biocontrol+agent+of+tea+thrips%2C+Scirtothrips+bispinosus+Bagnall+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Egypt+J+Biol+Pest+Control%22%5BJournal%5D)">Lecanicillium lecanii (Zimmermann) Zare & Gams as an efficient biocontrol agent of tea thrips, Scirtothrips bispinosus Bagnall (Thysanoptera: Thripidae).</a> Egypt J Biol Pest Control. 31, 1-14 (2021).</li>
<li>Panyasiri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+efficacy+of+Purpureocillium+lilacinum+against+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29+on+chili+plant%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Control efficacy of Purpureocillium lilacinum against chilli thrips (Scirtothrips dorsalis) on chili plant.</a> Insects. 13 (8), 684(2022).</li>
<li>Perera, M., Senanayake, N., Dissanayake, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Amblyseius+swirskii+%28predatory+mite%29+and+Orius+laevigatus+as+biological+control+agents+of+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ceylon+J+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Amblyseius swirskii (predatory mite) and Orius laevigatus as biological control agents of chilli thrips (Scirtothrips dorsalis).</a> Ceylon J Sci. 50 (4), 541(2021).</li>
<li>Han, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pupation+environment+on+pupal+development+and+eclosion+of+chilli+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Effect of pupation environment on pupal development and eclosion of chilli thrips (Thysanoptera: Thripidae).</a> Environ Entomol. 54 (1), 223-230 (2025).</li>
<li>Tatara, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+and+host+plant+on+the+development%2C+fertility+and+longevity+of+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature and host plant on the development, fertility and longevity of Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae).</a> Appl Entomol Zool. 29 (1), 31-37 (1994).</li>
<li>Kumar, V., Seal, D. R., Osborne, L. S., McKenzie, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+scanning+electron+microscopy+with+DNA+barcoding%3A+a+novel+approach+for+thrips+identification%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Entomol+Zool%22%5BJournal%5D)">Coupling scanning electron microscopy with DNA barcoding: a novel approach for thrips identification.</a> Appl Entomol Zool. 49, 403-409 (2014).</li>
<li>Silva, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+abundance+of+cotton+thrips+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+across+crop+and+non-crop+vegetation+in+an+Australian+cotton-producing+region%5BTitle%5D)+AND+%22Agric+Ecosyst+Environ%22%5BJournal%5D)">Seasonal abundance of cotton thrips (Thysanoptera: Thripidae) across crop and non-crop vegetation in an Australian cotton-producing region.</a> Agric Ecosyst Environ. 256, 226-238 (2018).</li>
<li>Venette, R., Davis, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVenette%2C+R+%22Chilli+thrips%2Fyellow+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+mini+pest+risk+assessment%22">Chilli thrips/yellow thrips, Scirtothrips dorsalis Hood (Thysanoptera: Thripidae) mini pest risk assessment</a>. , Univ Minnesota Tech Bull. (2004).</li>
<li>Mandi, N., Senapati, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+chemical%2C+botanical+and+microbial+insecticides+for+control+of+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+infesting+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Plant+Prot+Sci%22%5BJournal%5D)">Integration of chemical, botanical and microbial insecticides for control of thrips, Scirtothrips dorsalis Hood infesting chilli.</a> J Plant Prot Sci. 1 (1), 92-95 (2009).</li>
<li>Samota, R., Jat, B., Choudhary, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+newer+insecticides+and+biopesticides+against+thrips%2C+Scirtothrips+dorsalis+Hood+in+chilli%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacogn+Phytochem%22%5BJournal%5D)">Efficacy of newer insecticides and biopesticides against thrips, Scirtothrips dorsalis Hood in chilli.</a> J Pharmacogn Phytochem. 6 (4), 1458-1462 (2017).</li>
<li>Panthi, B. R., Renkema, J. M., Lahiri, S., Liburd, O. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+short-range+movement+of+Scirtothrips+dorsalis+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+and+rate+of+spread+of+feeding+injury+among+strawberry+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">The short-range movement of Scirtothrips dorsalis (Thysanoptera: Thripidae) and rate of spread of feeding injury among strawberry plants.</a> Environ Entomol. 50 (1), 12-18 (2021).</li>
<li>Priyanka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+morphometrics+of+Thrips+parvispinus+%28Karny%29+%28Thysanoptera%3A+Thripidae%29+on+chilli%2C+Capsicum+annuum+L%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Hortic+Ecosyst%22%5BJournal%5D)">Biology and morphometrics of Thrips parvispinus (Karny) (Thysanoptera: Thripidae) on chilli, Capsicum annuum L.</a> Pest Manag Hortic Ecosyst. 30 (1), 85-92 (2024).</li>
<li>Hemalatha, S., Ramaraju, K., Jeyarani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+entomopathogenic+fungi+and+delivery+methods+for+management+of+thrips+in+chillies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Veg+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of entomopathogenic fungi and delivery methods for management of thrips in chillies.</a> Int J Veg Sci. 23 (3), 246-259 (2017).</li>
<li>Xu, X. M., Guerin, L., Robinson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+temperature+and+relative+humidity+on+conidial+germination+and+viability%2C+colonization+and+sporulation+of+Monilinia+fructigena%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Effects of temperature and relative humidity on conidial germination and viability, colonization and sporulation of Monilinia fructigena.</a> Plant Pathol. 50 (5), 561-568 (2001).</li>
<li>Lee, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+of+bean+bug+%28Riptortus+pedestris%29+upon+infection+with+entomopathogenic+fungus%2C+Beauveria+bassiana+JEF-007%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response of bean bug (Riptortus pedestris) upon infection with entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana JEF-007.</a> Pest Manag Sci. 75 (2), 333-345 (2019).</li>
<li>Yang, Y. -T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Up-regulation+of+carbon+metabolism-related+glyoxylate+cycle+and+toxin+production+in+Beauveria+bassiana+JEF-007+during+infection+of+bean+bug%2C+Riptortus+pedestris+%28Hemiptera%3A+Alydidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Biol%22%5BJournal%5D)">Up-regulation of carbon metabolism-related glyoxylate cycle and toxin production in Beauveria bassiana JEF-007 during infection of bean bug, Riptortus pedestris (Hemiptera: Alydidae).</a> Fungal Biol. 120 (10), 1236-1248 (2016).</li>
<li>Qayyum, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Entomopathogenic+fungi%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Entomopathogenic+Fungi%3A+Prospects+and+Challenges%22%5BJournal%5D)">Entomopathogenic fungi: prospects and challenges.</a> Entomopathogenic Fungi: Prospects and Challenges. , 57-79 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#00 böcek iğnesi</td><td>Entosphinx&nbsp;</td><td>DMM0220</td><td>İngiltere'de üretilmiştir</td></tr><tr><td>1,5 mL santrifüj tüpü</td><td>Corning kuruldu</td><td>MCT-175-C</td><td>ABD'de üretilmiştir</td></tr><tr><td>10 &mu; L Aşılama Döngüsü</td><td>NEST Bilimsel</td><td>718201</td><td>ABD'de üretilmiştir</td></tr><tr><td>100 bp DNA Merdiveni III</td><td>Geneaid</td><td>DL007 Serisi</td><td>Tayvan'da üretilmiştir.</td></tr><tr><td>2x SuperRed PCR Ana Karışımı</td><td>Biyolojik aletler</td><td>TE-SR01</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>6 cm Petri kabı</td><td>Alfa Artı Bilimsel</td><td>16021</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Agar</td><td>Bioman Bilimsel</td><td>AGR001.1</td><td>Mikrobiyoloji notu</td></tr><tr><td>Agaroz</td><td>Bioman Bilimsel</td><td>PB1200 Serisi</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>BioGreen Güvenli DNA Jel Tamponu</td><td>Bioman Bilimsel</td><td>SDB001T</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Kolay DNA Yüksek Hızlı Ekstraksiyon Doku Kiti</td><td>Fisher Biotec</td><td>ET-100 Serisi</td><td>https://www.fisherbiotec.com.au/wp-content/uploads/2021/11/FB-EDNA-DNA-Kits-flyer-11Nov21.pdf (Avustralya'da üretilmiştir)</td></tr><tr><td>İleri astar: LCO 1490</td><td>Genomik&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>Sıra: 5'-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3'</td></tr><tr><td>GenepHlow Jel/PCR Kiti</td><td>Geneaid</td><td>DFH300 Serisi</td><td>http://www.protech-bio.com/UserFiles/file/Gene-Spin%20Genomic%20DNA%20Kit.pdf</td></tr><tr><td>Cam Yetiştirme Konteyneri&nbsp;</td><td>Sunshine Laboratuvar Ekipmanları şirketi</td><td></td><td>Boyut: 35 mm yükseklik, 45 mm iç çap. Herhangi bir benzer boyuttaki plastik veya cam bardakla değiştirilebilir.</td></tr><tr><td>Hemositometre</td><td>Paul Marienfeld'in fotoğrafı.</td><td>640030</td><td>Almanya'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>kuvöz</td><td>Merhaba</td><td>F740 Serisi</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>deri kesici</td><td>Gerçek El Yapımı Atölyesi</td><td></td><td><a href="https://shopee.tw/jj891004?categoryId=100636&amp; entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406">https://shopee.tw/jj891004? categoryId=100636& entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406</a></td></tr><tr><td>MiniAmp Termal Döngüleyici</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>A37834</td><td>ABD'de üretilmiştir</td></tr><tr><td>optik mikroskop&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>&nbsp; Ci-L</td><td>Japonya'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Boyama fırçası</td><td>Tian Cheng fırça şirketi</td><td>4716608400352</td><td>0 veya 1 boyutunda yuvarlak fırçaya eşdeğer ince uçlu suluboya fırçası ile değiştirilebilir.</td></tr><tr><td>kağıt havlu</td><td>Mayıs çiçeği</td><td>BLS007-8</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Bemis</td><td>PM-996</td><td>ABD'de üretilmiştir</td></tr><tr><td>Pelet havaneli</td><td>Bioman Bilimsel</td><td>GT100R Serisi</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Ters astar: HCO 2198</td><td>Genomik&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>Sıra: 5'-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3'</td></tr><tr><td>Sabouraud Dekstroz Suyu</td><td>HiMedya</td><td>MH033-500G</td><td>Hindistan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>stereomikroskop</td><td>Soptop</td><td>SZN71 Serisi</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>TAE tamponu 50X</td><td>Bioman Bilimsel</td><td>TAE501000</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>Ara 80</td><td>PanReac Uygulama Kimyası</td><td>142050.1661</td><td>Tayvan'da üretilmiştir</td></tr><tr><td>fermuarlı çanta</td><td>Wenchen Plastik Şirketi</td><td>1809000061</td><td>Boyut: 12 cm genişliğinde ve 17 santimetre uzunluğundadır. (Tayvan'da üretilmiştir)</td></tr></tbody></table>

entomopatojenik mantarların virülans taraması için biber thrips (scirtothrips dorsalis hood) yetiştirme sisteminin kurulması

Establishment of a Chilli Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Rearing System for Virulence Screening of Entomopathogenic Fungi

Bu çalışmada sunulan deneysel akış şeması, tarla toplamasından EPF izolatlarının virülansının taranmasına kadar biber tripslerinin stabil yetiştirme sisteminin kurulabileceğini göstermiştir (Şekil 1). Morfolojik gözlem, biber tripslerini diğer çiçek tripsilerinden ayırt edebilse de, PCR amplikon boyutu ve COI dizilimi dahil olmak üzere kısmi COI dizisinin moleküler bir belirteç olarak kullanılması, sahada toplanan tripslerin biber tripsi olarak tanımlanmasını...

Entomopatojenik Mantarların Virülans Taraması için Biber Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Yetiştirme Sisteminin Kurulması

The chilli thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) is an economically significant pest of ornamental and food crops in Taiwan. Entomopathogenic fungi (EPF) ...

Biber tripsleri, birden fazla üründe iyi çalışılmış bir zararlıdır. Araştırmamız, biber tripsi yetiştirme sisteminin iyileştirilmesine odaklanmıştır ve gelecekteki deneyler için entomopatojenik mantar taraması uygulamalarını genişletmektedir. Son çalışmalar, kafeslerdeki bütün bitkiler üzerinde toplu biber tripsi yetiştirmeye odaklanmıştır. Bazıları müstakil yapraklar gibi alternatifleri araştırıyor ancak açık ve ayrıntılı yöntemler hala iyi tanımlanmadı.Bu çalışma, stabil biber thrips kolonileri sağlayabilen, ayrılmış yapraklara dayalı yeni bir thrips toplu yetiştirme yöntemi oluşturdu. Ek olarak, entomopatojenik mantar virülans taraması için kararlı ve tekrarlanabilir bir biyo-tahlil sistemi geliştirilmiştir. Bu protokol, sahne yönetimini iyileştirmeye ve kaynak kullanımını azaltmaya odaklanarak, yaprak disk kullanarak tripslerde ustalaşmak için net ve standartlaştırılmış bir yöntemin eksikliğini giderir.Bu protokol, gelişim aşaması kontrolünü basitleştirir, alan ve işgücü ihtiyaçlarını azaltır ve büyük ölçekli ve güvenilir biyo-analizler için uygun tutarlı thrips tedariki sağlar. Laboratuvarımız, biyoanalizler için tutarlı ve sağlıklı popülasyonlar sağlamak için toplu yetiştirme yöntemlerini optimize etmeye ve bu protokolü çeşitli thrips türlerine uygulamaya, çevre ve işleme koşullarını iyileştirmeye odaklanacaktır. Ayrıca, toplu yetiştirme sistemi sera denemesini kullanacak şekilde genişletilebilir.Başlamak için, acı biber triplerinin istila ettiği yaprakları ve çiçekleri kesin. Bunları plastik bir fermuarlı torbaya aktarın ve yırtıkları canlı tutmak için torbanın içinde biraz hava olduğundan emin olun. Daha sonra yüksekliği 35 milimetre ve iç çapı 45 milimetre olan bir cam yetiştirme kabı edinin.Kabın dibine her biri 40 milimetre çapında üç kat yuvarlak kağıt havlu yerleştirin. Nemi korumak için kağıt havluların üzerine 8 ila 10 damla filtrelenmiş su ekleyin. Şimdi genç bir mango yaprağını iyice yıkayın.Böcek yumurtalarını veya diğer böcek kontaminasyonunu kontrol etmek için optik mikroskop altında inceleyin. Bir deri kesici kullanarak mango yaprağını 40 milimetre çapında dairesel bir disk halinde kesin ve cam yetiştirme kabının içindeki ıslak kağıt havlunun üzerine yerleştirin. Biber tripslerini optik mikroskop altında 10X büyütmede gözlemleyin.İnce bir boyama fırçası kullanarak, beş erkek ve beş dişiden oluşan 10 yetişkin tripsi hazırlanan cam yetiştirme kabına aktarın. Ardından her bir cam yetiştirme kabını iki kat Parafilm ile kapatın. Uygun havalandırmayı sağlamak için 0-0 numaralı böcek iğnesi kullanarak Parafilm'de yaklaşık 40 küçük delik açın.Kapalı cam yetiştirme kabını 48 saat boyunca bir inkübatöre yerleştirin. Yumurta pozisyonunu gösteren yumurtaların varlığını doğrulamak için yaprak dokularını stereo mikroskop altında gözlemleyin. Daha sonra yumurtalı yaprağın üzerine taze bir mango yaprağı diski yerleştirin ve nemi korumak için kağıt havlunun üzerine 8 ila 10 damla filtrelenmiş su ekleyin.Tripslerin bakımı için, ilk dönem larvalarını içeren yaprağı doğrudan yeni bir cam yetiştirme kabına aktarın. Biber tripslerini günlük olarak gözlemleyin. Biber tripslerinin toplu olarak yetiştirilmesi için, önce korunan popülasyondan dişi yetişkin tripsleri toplayın.Yumurta elde etmek için 10 dişi yetişkin tripsi hazırlanmış bir yetiştirme kabına aktarın. Daha sonra yaklaşık 120 ilk dönem larvasını ince bir boya fırçası kullanarak yavaşça yeni bir cam yetiştirme kabına aktarın. Moleküler tanımlama için, bir yetişkin biber tripsini 1,5 mililitrelik bir santrifüj tüpüne toplayın.Biber tripslerini bir pelet havaneli kullanarak homojenize edin. Ardından, üreticinin protokolüne göre ticari bir kit kullanarak genomik DNA'yı izole edin ve PCR Master Mix kullanarak çoğaltın. Amplifikasyonun sonucunu doğrulamak için PCR amplikonunu %1'lik bir agaroz jel içinde elektroforez ile kontrol edin.Hedef bandı jelden yaklaşık 658 baz çifti boyutunda çıkarın. Tür kimliğini doğrulamak için varsayılan parametreleri kullanarak NCBI veritabanında bir patlama araması gerçekleştirin. Entomopatojenik mantarların hazırlanması için, 1/4 kuvvetinde Sabouraud'un dekstroz agarı üzerinde yetiştirilen 10 ila 14 günlük bir mantar kültürünün yüzeyine iki ila üç mililitre %0.03 Tween 80 ekleyin.Steril bir halka kullanarak konidyumu nazikçe kazıyın. Mantar süspansiyonunu temiz bir 15 mililitrelik santrifüj tüpüne aktarın. Ardından süspansiyonu maksimum hızda vorteksleyerek homojenleştirin.Hyfil kalıntılarını gidermek ve saf bir konidia süspansiyonu elde etmek için süspansiyonu filtre kağıdından süzün. Işık mikroskobu altında konidia sayısını kontrol etmek için bir hemositometre kullanın. Mililitre başına 8 konidia gücünde 10'luk bir konsantrasyon elde etmek için süspansiyonu seyreltin.Daha sonra konidiyal süspansiyonu, sonraki biyo-tahlil uygulaması için ultraviyole ışıkla sterilize edilmiş bir mikro püskürtücüye aktarın. Bir yaban mersini çiftliğinden genç yaban mersini yapraklarını toplayın ve yıkayın. Havayla kuruttuktan sonra, kalan eklembacaklıları veya yumurtaları kontrol etmek için yüzeylerini stereo mikroskop altında inceleyin ve varsa çıkarın.Şimdi, bir deri kesici kullanarak 2,8 santimetre çapında bir yaprak diski kesin. Ardından yaprak diskini %1'lik bir sodyum hipoklorit çözeltisinde dezenfekte edin. Ve üçü, çamaşır suyu kalıntılarını gidermek için sterilize suyla iki kez durulayın.Ardından, laminer bir akış başlığı içindeki küçük cam kaplara üç mililitre %2,5 su agarı dökün. Daha sonra yaprak diskini adaksiyal tarafı yukarı bakacak şekilde yavaşça agarın üzerine aktarın ve yüzeyin üzerinde sadece küçük bir kısmı açıkta kalacak şekilde hafifçe gömün. Agar tamamen katılaştığında, cam kapları biyo-tahlil için hazır olarak düşünün.Uygulamadan önce, konidiyal süspansiyonu iyice vorteksleyin. Bir mikro püskürtücü kullanarak, cam kabın içinde yaklaşık 10 santimetre mesafeden her bir yaprak diskin yüzeyine 0,1 mililitre süspansiyonu eşit şekilde uygulayın. Şimdi 10 saniyelik dönem larvalarını her bir cam kaba aktarmak için ince bir boya fırçası kullanın.Her kabı iki kat Parafilm ile kapatın. 0-0 numaralı böcek iğnesi kullanarak Parafilm'de havalandırma için yaklaşık 30 küçük delik oluşturun. Ardından kapları yedi gün boyunca bir inkübatöre koyun.Yedi gün boyunca günde 10X büyütmede stereo mikroskop altında biber tripslerinin mortalitesini gözlemleyin ve kaydedin. Endo patojenik mantar enfeksiyonunu doğrulamak için mikoz gözlemi için ölü larvaları cam kabın içinde tutun. Seçilen entomopatojenik mantarların biyo-tahlili için, üç konsantrasyonda konidiyal süspansiyon hazırlayın.Süspansiyonları farklı yetiştirme kaplarına aşılayın. Tedaviler arasındaki önemli farklılıkları belirlemek için tek yönlü ANOVA gerçekleştirmeden önce bir arksinüs dönüşümü kullanarak her bir mantar suşunun ölüm verilerini dönüştürün. Ardından, veraset regresyon analizini kullanarak medyan öldürücü süreyi ve medyan öldürücü konsantrasyon değerlerini hesaplayın.Erken larva evresi, geç larva evresi ve yetişkin evresi dahil olmak üzere çeşitli yaşam evrelerinde biber tripslerinin morfolojik özellikleri belirgin bir şekilde gözlemlendi. Kısmi COI genini hedef alan polimeraz zincir reaksiyonu amplifikasyonu, sahada toplanan tripslerin biber tripsleri olarak kimliğini doğrulayan bir bant üretti. Müstakil yaprak yetiştirme sistemi, yedi günlük gözlem süresi boyunca kontrol grubunda gözlemlenen %90'lık bir hayatta kalma oranı ile biber thrips kolonisi oluşumunu başarıyla destekledi.Test edilen entomopatojenik mantar izolatları arasında, Cordyceps cateniannulata NCHU-213, aşılamadan yedi gün sonra biber thrips larvalarında en yüksek ölüme neden olurken, bunu Cordyceps cateniannulata NCHU-298 takip ederken, Beauveria bassiana daha düşük virülans gösterdi. Cordyceps cateniannulata NCHU-213 ve Cordyceps cateniannulata NCHU-298'in mililitresi başına 10 üzeri 8 konidia gücündeki LT50 değeri, Beauveria bassiana ile benzer değerler gösterdi ve daha kısa günler sergiledi. Mikoz, vücutlarını kaplayan mantar büyümesinde görüldüğü gibi, Cordyceps izolatları ile enfekte olmuş thrips kadavralarında gözle görülür şekilde gözlendi.Aşılamadan dört ve beş gün sonra Cordyceps cateniannulata NCHU-213 ile tedavi edilen tripslerde mortalitede doza bağlı bir artış belirginken, en yüksek mortalite %71.4 ile yedi gün sonra mililitrede 10 ila 7 konidia gücünde gözlendi, ardından mililitrede 10 ila 8 konidia gücünde %58.9 ve mililitrede 6 konidia gücünde 10'da% 44.4 izledi.

establishment-chilli-thrips-scirtothrips-dorsalis-hood-rearing-system

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu protokol mantar entomopatojenin tanıtmak için iki aşılama yöntemleri...

Endophytes olarak Mantar Entomopatojenlerin Kurulması: Endofitik Biyolojik Kontrol Doğru

Burada, tarımdaki böcek zararlılarının kontrolü için "en uygun" entomopatojenik mantar Metarhizium anisopliae'nin izolasyonu, belirlenmesi, taranması ve seçimi de dahil olmak üzere etkin bir mikozinsektisid'in bilgi temelli gelişiminde farklı aşamaları bildiriyoruz .

Geliştirilmesi<em&gt; Metarhizium anisopliae</em&gt; Bir Mycoinsecticide Olarak: İzolasyondan Saha Performansına

Burada, CRISPR / Cas9 tabanlı genom düzenlemesi yoluyla genomlarını değiştirmek veya germline dönüşümü yoluyla işaretli transpoze edilebilir elementlerin eklenmesi amacıyla hücre öncesi mısır planthopper embriyolarının toplanması ve mikroenjekte edilmesi için protokoller bulunmaktadır.

Mısır Planthopper Mikroenjeksiyonu, Peregrinus maidis, CRISPR / Cas9 Genom Düzenleme için Embriyolar

Burada, toprak örneklerinden entomopatojenik mantarların (EPF) izole edilmesi ve seçilmesi için kullanılan yemek kurdu (Tenebrio molitor)-yem sistemine dayanan bir protokol sunuyoruz. Sahada zararlı mikrobiyal kontrolü için fizyolojik özelliklere göre yüksek strese dayanıklı EPF seçmek için etkili bir konidia sayısı (ECN) formülü kullanılır.

Toprak Örneklerinden İntomopatojenik Mantarların İzolasyonu ve Seçimi ve Böcek Zararlılarına Karşı Mantar Virülansının Değerlendirilmesi

Entomopatojenik mantar kolonileri, Tenebrio yemi, Galleria yemi ve seçici yapay ortam, yani kloramfenikol, tiyabendazol ve sikloheksimid (CTC ortamı) ile desteklenmiş maya özü ile zenginleştirilmiş patates dekstroz agarı kullanılarak tropikal toprak örneklerinden izole edilir.

Entomopatojenik mantarları toprak örneklerinden izole etme yöntemlerinin karşılaştırılması

Mevcut protokol, Ditylenchus dipsaci'nin kültürlenmesi, toplanması ve taranması için güvenilir ve basit bir yöntem tanımlamaktadır.

Bitki Parazitik Nematodu Ditylenchus dipsaci Kültürleme ve Eleme

Bu protokol, bir fitokimyasalın lepidopteran böcek larvaları üzerindeki potansiyel toksik etkisini değerlendirmek için zorunlu besleme testini açıklar. Bu, öldürücü ve öldürücü dozu, caydırıcı aktiviteyi ve fizyolojik etkiyi optimize etmek kolay, oldukça ölçeklenebilir bir böcek biyo-tahlilidir. Bu, çevre dostu böcek ilaçlarını taramak için kullanılabilir.

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi

Bu protokol, partenogenetik bir böcek olan hardal yaprak bitine (Lipaphis erysimi (Kalt.)) karşı entomopatojenik mantarların (EPF) etkinliğini değerlendirmek için optimize edilmiş bir müstakil yaprak biyo-tahlil sistemi sunar. Yöntem, Petri kabı deneyleri sırasında veri toplama sürecini özetleyerek, araştırmacıların EPF'nin hardal yaprak bitlerine ve diğer partenogenetik böceklere karşı virülansını tutarlı bir şekilde ölçmelerini sağlar.

Entomopatojenik Fungusların Partenogenetik Böcek, Hardal Yaprak Biti, Lipaphis erysimi (Kalt.)

Burada, bir orman odun kurdundan entomopatojenik mantarlar elde etmek için bir protokol ve bir Coleopteran model böcek kullanarak entomopatojenik aktivitelerini değerlendirmek için ikame edici bir yol sunuyoruz. Bu yöntem, doğal ormanlardaki odun delici böcek zararlılarından entomopatojenik mantar kaynaklarını keşfetmek için etkili ve kullanışlıdır.

Bir Orman Ağaç Kurdundan Entomopatojenik Mantarların İzolasyonu, Davranışsal Tanımlama ve Patojenite Değerlendirmesi

Bu video, laboratuarda arka Anofel gambiae kullanılan genel teknikler gösterilmektedir. Kan besleme yetişkin için pupa larva organizmanın yaşam döngüsünün tüm aşamalarında laboratuar sivrisinek bakımı için yöntemleri gösterilmektedir.

Sivrisinek Yetiştirme Protokolü (A. gambiae)

Öğrenin, Scirtothrips dorsalis için ayrılmış yaprak biyosayım protokolü kullanarak entomopatojenik mantar virülans taraması yapmayı. Bu yöntem, yüksek hayatta kalma oranları ve senkronize gelişim sağlar.

Entomopatojenik Mantarların Virülans Taraması için Biber Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Yetiştirme Sisteminin Kurulması

Daha fazla video keşfet