Bölgeye Özgü Bağırsakla Lenfatik İletişimin Seçici Bozulması İçin Molin Mezenterik Lenfadenektomi

Araştırmalarımız, neoantijenlere ve periferik dokulara karşı T hücresi yanıtlarına odaklanıyor ve bu tepkiler priming'den yoğun şekilde etkileniyor, bu yüzden öncelikle bu priming olaylarının nerede gerçekleştiğine odaklanıyoruz. Şu anda, lenf düğümleri ile dokular arasındaki kaçakçılığı engellemek için yaygın olarak kullanılan tek seçenekler, S1P reseptör agonistleri ve integrin blokadası gibi sistemik modalitelerdir. Ancak bu geniş inhibitisiya, belirli lokal lenf düğümlerinin katkısını incelememizi engelliyor.

Protokolümüz, dört ana mezenterik lenf düğümü istasyonunun her birinde yapılan son derece seçici lenfadenektominin derinlemesine tanımını sağlar ve bu lenf düğümleri, boşalttıkları bağırsak segmentinde oldukça uzmanlaşmış olduğundan, bu iyi tolere edilen hayatta kalma prosedürü, bağırsak lenf ekseninin belirli segmentlerini bozup geri kalanını sağlam bırakmamıza olanak tanır. Uygun anestezik derinliği arka ayak sıkıştırmasıyla doğrulandıktan sonra, steril cerrahi makasla anestezi edilmiş farede 0,5 ila 1 santimetre arasında orta hat deri kesisi yapın. Steril forseps kullanarak, deriyi karın duvarından uzaklaştırın ve linea alba tespit edin.

Sonra linea alba üzerinden 0,5 ila 1 santimetre arasında bir kesi daha açın, peritoneal boşluğa ulaşın. Kör uçlu bir gavaj iğnesi kullanarak, peritoneal boşluğa vücut sıcaklığında steril salin bir mililitre yerleştirin. Steril perdeleri nemlendirerek bağırsak pozisyonuna hazırlanın.

İlk lenf düğümü istasyonunu rezeksiyon etmek için, dıştaki bağırsak nemli perdelere yönlendirilir; çekum aşağıda, proksimal kolon yukarıda ve terminal ileum cerraha doğru konumlandırılır. Kolon boyunca uzunlamasına uzanan mezenterik lenf düğüm zincirini tespit edin. Açılı ince uçlu forseps kullanarak, kapalı forsepsleri bu yapılar arasına yerleştirip nazikçe açarak birinci lenf düğümü istasyonunu ileokolik damarlardan kesin ve nazikçe açın.

Yakındaki düğümlere yan akış riskini azaltmak için, monofilament naylon dikiş ve ince uçlu forseps kullanılarak lenf düğümü zinciri boyunca, bir milimetre distal ve bir milimetr yakın lenf düğüm istasyonuna tek kesintili dikişlerle isteğe bağlı bir dikiş ligasyonu gerçekleştirilir. Lenf düğümü istasyonunu kaudal olarak nazikçe geri çekin, ardından ince uçlu makasla kullanarak hedef lenf düğümü istasyonunu cephaladdan kaudal yöne doğru kesin. Ileokolik damarların, ileal damarların ve jejunal damarların distal dallarını gözlemleyerek kan akışının sağlam kaldığını doğrulayın.

İkinci lenf düğümü istasyonunu rezeksiyon etmek için, ince bağırsağı nazikçe içleri çıkarın ve dıştaki bağırsağı nemli perdelere yönlendirin; çekum aşağıda, proksimal kolon yukarıda, ince bağırsak ise cerrahın sağında konumlandırılır. Sonra, kolon boyunca boylamasına uzanan ve ileal ile jejunal damarların birleştiği noktadan başlayan ikinci lenf düğümü istasyonunu belirleyin. Açılı ince uçlu forseps kullanarak, ikinci lenf düğümü istasyonunu kolon damarlarından uzakta kesin ve kesin bir şekilde ayrıştırın.

Yakındaki düğümlere yan akış riskini azaltmak için, monofilament naylon dikiş ve ince uçlu forseps kullanılarak lenf düğümü zinciri boyunca, ikinci lenf düğümü istasyonuna bir milimetre distal ve bir milimetre proksimal tek kesilmiş dikişlerle isteğe bağlı bir dikiş ligasyonu gerçekleştirilir. Lenf düğümü istasyonunu nazikçe kaudal olarak geri çekin, ardından ince uçlu makasla kullanarak ikinci lenf düğümü istasyonunu cephaladdan kaudal yöne çıkarın. Hemostazı kontrol etmek için ameliyat alanını inceleyin.

Dördüncü lenf düğümü istasyonunu rezeksiyon etmek için, tüm ince bağırsağı arka bağlama noktasına kadar nazikçe sökün. Bağırsağı, sek alt tarafta, proksimal kolon yukarıda ve ince bağırsak cerrahın sağına doğru olacak nemli perdelere yönlendirin. Dördüncü lenf düğümü istasyonunu tespit edin; bu istasyon distal kolonun hemen medialinde ve üçüncü istasyonun lateral kısmında bulunur.

Açılı ince uçlu forseps veya ekstra ince uçlu makas kullanarak, dördüncü lenf düğümü istasyonunu kolon damarlarından ve çevresindeki yağ dokusundan uzak kesin bir şekilde kesin. Yakındaki düğümlere yan akış riskini teorik olarak azaltmak için, her tanımlanabilir lenf düğümünde genellikle bir milimetre uzaklıkta, monofilament naylon dikiş ve ince uçlu forseps kullanılarak tek kesintili dikişlerle isteğe bağlı bir dikiş ligasyonu gerçekleştirilir. Sonra dördüncü lenf düğümünü nazikçe geri çekin, istasyon cephalad.

İnce veya ekstra-ince noktalı makaslar kullanarak, lenf düğüm istasyonlarını kaudaldan sefaldaya doğru çıkarın. Prosedürü dördüncü lenf düğümü istasyonundaki ikinci düğüm için tekrarlayın. Düğümü dikkatlice disseksiye edin, gerekirse dikiş ligasyonu yapın ve rezeksiyon yapın.

Hemostazı doğrulamak için ameliyat alanını inceleyin. Karın içeriği periton boşluğuna geri getirildikten sonra, evaporatif sıvı kaybını telafi etmek için karın boşluğuna vücut sıcaklığında steril salin verilmelidir. Karın bölgesini iki katmana ayırın: önce karın duvarı, sonra cildi 6-0 monofilament polipropilen dikiş ile koşu şeklinde.

Mezenterik lenfadenektomi prosedürü ile alınan dokular, PBS'nin anında batması ile kanıtlandığı gibi düşük yağ içeriğine sahip örnekler tutarlı olarak ortaya çıktı. Akış sitometrisi analizi, başarılı lenf düğümü ekstraksiyonunu doğruladı; mezenterik lenfadenektomi kaynaklı örneklerdeki hücrelerin %95'inden fazlası CD45 pozitif olarak tespit edilirken, visseral yağ dokusu kontrollerinde bu oran sadece %7'si tespit edildi.