21 Kasım 2025
Burada, sinir lifi alt tiplerinin aktivitesini ayırt edebilen iki tür omurga elektrofizyolojik ölçümü kullanarak periferik sinirlerdeki çevresel sinirlerdeki duyusal aksonların aktivasyonu ve bloklanmasını değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz: Yerel Alan Potansiyelleri ve Geniş Dinamik Aralıklı tek nöron kayıtları.
Araştırmamızın amacı, ağrı tedavisi için çevresel elektriksel ve yakın kızılötesi sinir blokları geliştirmektir. Doğru akım ve yüksek frekanslı alternatif akım elektrik blokları ile yakın kızılötesi fotobiyomodülasyon gibi teknolojiler klinik ağrı giderme potansiyeli sunar. Başlamak için, anestezi altındaki fareyi ameliyat masasına sırtüstü konumlandırın.
Fareyi sırtüstü pozisyonda, 14 gauge Anjiyokat damar içi kateterinin kılıfı ve miller boyutunda 0 veya 0.0 bıçakla laringoskop kullanarak entübe edin. Kuyruk damarının yan tarafını ılık suyla temizleyin, ardından %70 izopropil alkol ekleyin. Sonra, lateral kaudal kuyruk venini 22 gauge intravenöz kateter kullanarak kateterize edin.
Şimdi, kateterize edilmiş kuyruk damarına yaklaşık bir mililitre steril tuzlu su enjekte edin. Polietilen boru kullanılarak, yerleştirilen kuyruk damarı kateterini, bir şırınga sürücüsüne monte edilmiş mililitrede iki miligram oranında rokuronyum solüsyolu içeren bir şırıngaya bağlayın. Farenin sol yanındaki kuyruk en kabud kaburgasını yoklayın ve sırt tarafından omurga doğru takip edin.
Bir neştil kullanarak, bu noktanın ortasında yaklaşık 60 milimetre uzunluğunda bir orta hat kesiyi açın. Skalpel kullanarak, omurlu süreçlerden dokuyu kazıyın. Sonra, kaburgaları açmak için makasla açığa çıkarın ve en kuyar kaburgasını konumlandırın.
Kaburga konumunu görsel olarak ve dokunarak cerrahi mikroskop altında, 3,5 x ila 45 x büyütme ile kesik diseksiyonla doğrulayın. T13 dikenli süreci kalıcı bir işaretleyiciyle işaretleyin. Sonra, T11 ve L4 omurlarının her iki tarafında da cepler oluşturmak için küt diseksiyon yapın.
Taban montajlı iki dikey direği stereotaksik platformun T-track'ine kaydırın ve onları T11 ve L4 omurlarıyla sıkıştırmadan hizalamalısınız. Omurga kelepçelerinin silindirik şaftlarını direk kelepçelerine yerleştirin, ancak henüz sıkıştırmayın. T11 omurundan başlayarak, omurgayı dişli forseps ile tutun.
Omurga kelepçelerinin çenelerini omurun her iki yanında, T13 omurundan yaklaşık 45 derece uzakta yerleştirin ve çeneleri sıkılaştırın. Direk kelepçesindeki omurga kelepçesinin şaftını sıkın. Sonra, her iki direk kelepçesini yukarı kaldırarak omurgayı kaldırın, böylece gövdenin tamamen omurga kelepçeleriyle desteklendiğinden emin olun.
Daha sonra T13 ve L1 okanlı süreçlerin rostral kaudal pozisyonlarını, kas yüzeyine, omurgaya lateral olarak tek dikişler yerleştirerek işaretleyin. T12 ile L3 arasındaki omur laminalarının yüzeyindeki kas ve bağ dokusunu temizlemek için dişli forseps, makas ve bir bistüri kullanın. Cerrahi mikroskop altında, Friedman-Pearson rongeurs kullanılarak omur laminalarını L2'den T13'e çıkarabilirsiniz. Laminektomiye rongeurları yatay yakın tutarak başlayın ve L2'nin kaudal kısmından küçük ısırıklar alın, burada L3 ile örtüşüyor. Laminektomiyi omurilik orta hattını açığa çıkaracak şekilde rostral olarak uzatın; omuriliğe baskı uygulanmamasını ve rongeurlardan kemik parçalarını düzenli olarak temizleyin.
Laminektomiyi omurilik orta hattının her iki tarafında iki milimetre yan olarak uzatın. Sonra, açık omurilikten dura materini çıkarmak için ince forseps ve yaylı makas kullanın. Kesik yapmadan önce dura mater'i tonlandırın.
İlk kesimden sonra, az miktarda beyin omurilik sıvısının dışarı akmasına izin verin ve tüy içermeyen bükülü bir parça kullanarak nazikçe ıslatın. Sonra, dura mater'in kalan kısmını çıkarın. Elektrofizyoloji seansı başlayana kadar açıkta kalan laminektomi bölgesini, tuzlu suyla nemlendirilmiş bir doku parçasıyla örtün.
Siyatik siniri uyarmak için, siniri açığa çıkarın ve etrafına bire üç milimetre ölçüsünde açık kontaklarla özel yapılmış bipolar platin JC tarzı bir elektrot yerleştirin. Sonra sinir blok cihazını açıkta kalan sinirin yanına yerleştirin. Saksı uyarımı için, biri beşinci rakamın içine, diğeri dördüncü parmağın dışında, arka patinin saksı yüzeyine yakın iki adet 13 milimetrelik paslanmaz çelik iğne elektrotu yerleştirin.
Geniş dinamik aralıklı nöron kayıtları için, ya arka patinin planter yüzeyini uyarın ya da siyatik siniri doğrudan sinir manşet elektrodu ile uyarın. Yerel bir alan potansiyel kayıtları için, diffuz sinyalleri önlemek için doğrudan siyatik sinirine uyarım uygulanır. Elektrofizyolojik sinyalleri kaydetmek için, omurganın her iki tarafındaki kasın içine omurga paralel konumlanmış şekilde 21 adet 1,5 inç hipodermik iğne yerleştirin.
Elektrofizyolojik sinyalleri sürekli dijitalleştirin ve gerçek zamanlı olarak gösterin. Yerel alan potansiyel kayıtları için, elektrot dizisi rostral kaudal yönde yerleştirilerek rostral en elektrot seviyesine yerleştirilir ve dikiş T13 dikenli süreci orta hatta mümkün olduğunca yakın gösterir, orta hat kan damarına zarar vermeden. Kaydedilen sinyalleri izlerken uyarılma parametrelerini ayarlayın.
Periferik sinir bloğu için, eğer varsa, uyarıcı manşetin yanına yakın siyatik sinire 0.1 ila 5 miliamper katartik doğruakım uygulanırsa, Blok, hem A hem de C liflerinde doğruakım uygulama döneminde yerel alan potansiyel sinyal alanının azalmasıyla gösterilen yaklaşık aynı hızda indüklenmiş olur, karbondan ayrılmış bir arayüz sinir elektrotu kullanılır. Bloktan geri kazanım, fiber tipleri arasında farklılık gösteriyordu. C lifleri için iyileşme hızlı, A lifleri için yavaş oldu.
Daha uzun gecikmeli C lifleri blok etmek daha uzun sürdü, ancak kısa gecikmeli C liflerine göre daha erken toparlandı. Bu teknikle, blokun indüksiyon hızını ve sinirlerin sonrasında normal iletkenliğe geri dönüşünü değerlendirebiliriz. Davranışsal değerlendirmelerle karşılaştırıldığında, elektrofizyolojik tekniklerimiz sinir bloğunun çeşitli sinir lifi sınıfları üzerindeki etkilerinin daha hassas bir şekilde nicelenmesine olanak tanır.
Gelecekteki araştırmalarımız, hareket kontrolünde yer alan aksonların blokunu en aza indirirken seçici ağrı bloğuna odaklanacaktır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, arka ekstremitelerdeki duyusal nöral aktivasyonu incelemek ve yükselen ağrı sinyallerini kesen terapötik müdahalelerin etkinliğini değerlendirmek amacıyla sıçan omurgasının lomber bölgesinden yapılan in vivo elektrofizyolojik kayıt tekniklerini detaylandırmaktadır. Protokol; cerrahi hazırlığı, veri toplamayı, yerel alan potansiyellerinin (LFP) ve geniş dinamik aralıklı (WDR) tek nöron kayıtlarının analizini içererek, sinir lifi alt sınıflarının ayırt edilmesine ve sinir blokaj modalitelerinin değerlendirilmesine olanak tanır.
Anestezize sıçanlarda periferik ağrı bloğunun elektrofizyolojik değerlendirmesi, sinir bloğu müdahalelerinin duyusal lif düzeyinde değerlendirilmesi için kantitatif ve mekanistik temelli bir yaklaşım sunar. Bu metodoloji, life özgü blok ve iyileşme dinamiklerinin doğrudan ölçülmesine olanak tanıyarak, erken evre analjezik keşfindeki öngörü güvenilirliğini artırır. Bu tekniklerin keşif sürecine entegre edilmesi, yeni ağrı terapötiklerinin ve cihaz tabanlı müdahalelerin risk ayarlı ilerlemesini destekler.
Bu elektrofizyolojik platform; ağrı bloğu müdahaleleri için erken keşif, öncü bileşik tanımlama ve preklinik doğrulama süreçleri arasında köprü kurmaktadır.