Name: Sinapsis ve Rekombinasyonun Değerlendirilmesi için Fare Oositlerinden Mayotik Kromozom Yayılımlarının Hazırlanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Keşfedin fare oositlerinden mayotik kromozom yayılımları hazırlama yöntemini sinapsis ve rekombinasyon değerlendirmesi için. Bu teknik gelişimsel biyoloji araştırmalarında genetik süreçleri incelemeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 &mu; m Şırınga Filtresi</td><td>Millipore Sigma</td><td>SLHAR33SB</td><td>ağızla çalışan pipet yapmak için</td></tr><tr><td>0.5 M EDTA, pH 8.0</td><td>Corning</td><td>46-034-CI&nbsp;</td><td>HEB için</td></tr><tr><td>25 kalibre, 16 mm iğneli 1 mL Steril Şırınge</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-125&nbsp;</td><td>Yırtılan yumurtalıklar için</td></tr><tr><td>100 x 15 mm Petri kabı</td><td>VWR</td><td>25384-302&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>14,6 cm tek kullanımlık borosilikat cam Pasteur pipetleri</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-678-20B&nbsp;</td><td>ağızla çalışan pipet yapmak için</td></tr><tr><td>35 x 10 mm Petri kabı</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>40 mm x 0.45 mm #3 Entomoloji için paslanmaz çelik pinler</td><td>Amazon</td><td>B0CSSPW5S7</td><td>Diseksiyon için fetal fareleri sabitlemek için</td></tr><tr><td>Asetik Asit, Buzul</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>Carnoy'un fiksatifi için</td></tr><tr><td>Kalibre edilmiş mikrokapiler pipetler için aspiratör tüp montajları</td><td>Millipore Sigma</td><td>A5177-5EA</td><td>ağızla çalışan pipet yapmak için</td></tr><tr><td>B.P.I. Watch Glass</td><td>NDS Technologies&nbsp;</td><td>1580-00</td><td>Alternatif olarak 30 mm diametr x 12 mm derinliğinde bir embriyo çanakı kullanın (Elektron Mikroskopi Bilimleri SKU: 70543-30)</td></tr><tr><td>Borik Asit</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP168-1</td><td>HEB, PFA pH ayarlaması için</td></tr><tr><td>Sığır Serum Albümini</td><td>Millipore Sigma</td><td>A7906-100G</td><td>ADB için</td></tr><tr><td>CO2 Tankı</td><td></td><td></td><td>kuluçka makinesi için</td></tr><tr><td>Corning Mikroskobu Slaytları</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS294875X25</td><td>Sol x B 75 mm x 25 mm, bir tarafı buzlu</td></tr><tr><td>Corning mikroskop slaytları, bir tarafı buzlu, bir ucu</td><td>VWR</td><td>294875X25</td><td></td></tr><tr><td>Cam dikdörtgen kapa. 60 x 24 mm, #1.5</td><td>VWR</td><td>48393-251</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Tabağı</td><td>Elektron Mikroskopi Bilimleri</td><td>70540</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Mikroskobu</td><td></td><td></td><td>Herhangi bir standart model</td></tr><tr><td>Diseksiyon Makası, Keskin Uç, 4.5"</td><td>VWR</td><td>82027-578</td><td></td></tr><tr><td>Ekstra ince, keskin uçlu pensler</td><td>VWR</td><td>76548-836</td><td></td></tr><tr><td>Giemsa Lekesi</td><td>Millipore Sigma</td><td>GS500-500</td><td>Chiasmata yayılımlarını boyamak için</td></tr><tr><td>ImmEdge Hidrofobik Bariyer PAP Pen</td><td>Vektör Laboratuvarları</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>Kuluçka makinesi</td><td></td><td></td><td>CO2 ve su kaplamalı teknolojiye sahip herhangi bir standart model</td></tr><tr><td>IVF İş Istasyonu</td><td>K-Systems</td><td></td><td>Isıtılan tezgah üstü olan herhangi bir model</td></tr><tr><td>Kodak Photo-Flo 200 Çözümü</td><td>BH Fotoğrafı & Video</td><td>1464510</td><td>Sürgü yıkamalar için</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A412-4</td><td>Carnoy'un fiksatifi için</td></tr><tr><td>MP Biyomedikal Coplin Boyama Kavanozu</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN17006201</td><td></td></tr><tr><td>Normal Keçi Serumu</td><td>Gibco</td><td>16210-072</td><td>ADB için</td></tr><tr><td>Paraformaldehit, EM Derecesi, Saflaştırılmış Prill</td><td>Elektron Mikroskopi Bilimleri</td><td>19200</td><td></td></tr><tr><td>Permount</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td>for&nbsp; Chiasmata yayımları için montaj kaydırmaları</td></tr><tr><td>ProLong Cam Antifade Mountant ve NucBlue Boyalı</td><td>Termo Bilimsel</td><td>P36985</td><td>İmmünbotinli slaytların montajı için</td></tr><tr><td>Silikon tüp, iç çap: 0.125", dış çap: 0.25"</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td>ağızla çalışan pipet yapmak için</td></tr><tr><td>Sodyum Sitrat Dihidrat</td><td>Fisher Scientific</td><td>S279-500</td><td>HEB için hipotonik çözelti</td></tr><tr><td>StainTray Sürgü Boyama Sistemi</td><td>Elektron Mikroskopi Bilimleri</td><td>71396-B</td><td>Nemlendirilmiş bir oda olarak kullanılmak için. İmmünofluoresans boyama için siyah kapağı kullanmak zorundadır. Alternatif olarak, opak bir sürgü kutusunun veya tupper çüýşesinin altını nemli kağıt havlularla kaplayabilir;</td></tr><tr><td>Stripper İpuçları - 100</td><td>Cooper Cerrahi</td><td>MXL3-100</td><td>ağızla çalışan pipet için</td></tr><tr><td>Stripper İpuçları - 150</td><td>Cooper Cerrahi</td><td>MXL3-150</td><td>ağızla çalışan pipet için</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Millipore Sigma</td><td>S-8501</td><td>HEB için, Sukroz hipotonik çözelti</td></tr><tr><td>Tris Üssü</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP152-5</td><td>HEB için</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP151-100&nbsp;</td><td>PFA, ADB ve Triton-PBS için</td></tr><tr><td>United Scientific Coplin Boyama Kavanozu</td><td>Fisher Scientific</td><td>S17495A</td><td>Fotosensitif ikincil antikor eklendikten sonra yıkama ve bloklama slaytları için opak beyaz plastik</td></tr><tr><td>Birleşik Bilimsel Cam Kavuruşu Slaytları</td><td>Fisher Scientific</td><td>S139533</td><td>1,3 mm kalınlığında, 2 kuyulu sayım</td></tr><tr><td>Vannas Mikrodiseksiyon Makasları 5mm düz</td><td>VWR</td><td>76457-358</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Axio Imager.Z2, Colibri 7</td><td>Carl Zeiss</td><td>000000-2624-307</td><td></td></tr><tr><td>Zen Blue 3.11 Yazılımı</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>Görüntü edinim ve analiz yazılımı</td></tr><tr><td>Antikorlar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Parça Keçi Fare Karşıtı IgG, Fc parçasına özel</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>115-546-071</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Parça Keçi Anti-Tavşan IgG, Fc Fragment Özel</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>111-546-046</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure F(ab')? Parça Keçi Anti-İnsan IgG, Fc&gamma; Parçaya özgü</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>109-606-170</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG, Fc fragment specifi</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>106-605-008</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Gine Domuzu anti-MLH3 pAb</td><td></td><td></td><td>Thermo-Fisher ile özel olarak üretilmiş, 1:500 seyreltme kullanılmış</td></tr><tr><td>Gine Domuzu anti-SYCP1 pAb</td><td></td><td></td><td>Christer H&ouml'dan; &ouml; g (Kouznetsova ve ark. 2005), 1:200 seyreltme kullandı</td></tr><tr><td>İnsan anti-Centromere proteini pAb</td><td>Antikorlar Inc.</td><td>15-234</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Fare anti-MLH1 mAb</td><td>BD Biosciences</td><td>550838</td><td>1:100 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Fare anti-SYCP3 mAb</td><td>Abcam</td><td>ab97672</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Tavşan anti-HORMAD1 pAb</td><td>Proteintech</td><td>13917-1-AP</td><td>1:500 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Tavşan anti-MSH4 pAb</td><td>Abklonal</td><td>A8556</td><td>1:100 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Tavşan anti-RAD51 pAb</td><td>Millipore</td><td>PC130</td><td>1:500 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Tavşan anti-SYCP3 pAb</td><td>Abcam</td><td>AB15093</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Rhodamine Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Parça Keçi Fare Karşıtı IgG, Fc parçasına özel</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>115-296-071</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr><tr><td>Rhodamine Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Parça Keçi Anti-Tavşan IgG, Fc Fragment Özel</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratuvarları MM.</td><td>111-296-046</td><td>1:1.000 seyreltme kullanıldı</td></tr></tbody></table>

sinapsis ve rekombinasyonun değerlendirilmesi için fare oositlerinden mayotik kromozom yayılımlarının hazırlanması

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapsis and Recombination

Sinapsis ve Rekombinasyonun Değerlendirilmesi için Fare Oositlerinden Mayotik Kromozom Yayılımlarının Hazırlanması

Three critical and interdependent processes define meiotic prophase I: homologous chromosomes must pair together, a proteinaceous structure called the ...

preparation-meiotic-chromosome-spreads-from-mouse-oocytes-for

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Oosit mayotik olgunlaşması sırasında kromozom segregasyon hataları nedeniyle anöploidi yatkındır. Anöploid yumurta, kısırlık, düşüklere veya gelişimsel bozukluklar, Down sendromu gibi neden olabilir. Burada, yumurta ve mayotik olgunlaşma incelemek ve Ploidi değerlendirmek için yöntemler seçim malzemeleri tanıtmak için yöntemler açıklanmaktadır.

Fare Oosit Mikroenjeksiyon, olgunlaşması ve ploidi Değerlendirmesi

Burada, fare oosit mayoz mili montaj ve organizasyon değerlendirmek için immünoflüoresans analizi ile takip özgü siRNA aracılı mRNA tükenmesi için bir protokol mevcut. Bu protokol, transkript in vitro tükenmesi ve farklı mili ve / veya oositlerde MTOC ilişkili faktörler fonksiyonel değerlendirmesi için uygundur.

SiRNA aracılı susturma Mouse Oositlerinin içinde mayoz Mili Değerlendirmesi

Mayoz hangi gamet DNA ikileşmesi bir turu ve kromozom ayrışma birbirini izleyen iki tur üzerinden kurulan gelişimsel işlemidir. Memeli mayoz segregasyonun kromozom yayılır hazırlamak için bir teknik kullanarak incelenebilir. Burada, yüzey-yayılım çekirdeği fare spermatocytes üzerinden hazırlama yöntemi göstermektedir.

Fare Spermatocytes segregasyonun kromozom hazırlanması yayılır

Oogenesis memelilerde özellikle kromozom missegregation nedeniyle hataya, olduğu bilinmektedir. Bu el yazması için fare profaz, yaymak Kromatin hazırlama yöntemleri açıklar metafaz ı ve II sahnelenen yumurtalar. Bu temel teknikler Kromatin bağlı proteinler ve kromozom morfolojisi memeli oogenesis boyunca çalışma sağlar.

Kromatin fare oosit ilerleme profaz metafaz II analizi için hazırlıklar yaymak

İnsan hastalığı ile ilişkili genetik varyantların ele haline başladığınızda, sistemler ile tanımlanan bu değişik biyolojik önemi hızla değerlendirileceği geliştirmeye giderek önem kazanmaktadır. Bu iletişim kuralı insan gen işlevi kadın mayoz sırasında ben fare yumurta kullanarak değerlendirilmesi yöntemlerini açıklar.

Mayoz sırasında insan gen işlevini değerlendirmek için fare yumurta kullanarak ben

Nükleer yüzey spreadleri, kekozis sırasında kromozom olaylarını incelemek için vazgeçilmez bir araçtır. Burada zebrabalığı spermatositlerinden profaz I sırasında meyotik kromozomları hazırlamak ve görselleştirmek için bir yöntem göstermek.

Zebrabalığı Spermatositlerinden Meiotik Kromozom Spreadlerinin Hazırlanması

Kromozom ayrışmasında hata, oositlerde yaygın bir özelliktir. Bu nedenle, iş mili montaj kontrol noktasının incelenmesi, sağlıklı yumurta üretmek için gereken mekanizmalar hakkında önemli ipuçları verir. Mevcut protokol, fare oositlerinde iş mili montaj kontrol noktası bütünlüğünü değerlendirmek için üç tamamlayıcı tahlil tanımlamaktadır.

Fare Oositlerinde İş Mili Montaj Kontrol Noktası Bütünlüğünün Değerlendirilmesi

Bu protokol, farelerde hamilelik sırasında maternal vaskülatürdeki değişiklikleri değerlendirmek için bir tekniği tanımlar. Stereolojik yöntemler kullanılarak, desidual spiral arterlerin yeniden şekillenmesi kantitatif olarak değerlendirildi ve sonuçlar immünohistokimya kullanılarak kalitatif olarak doğrulandı.

Fare Uterus içinde Gebelikte maternal Vasküler Yaptırma Değerlendirilmesi

Burada Nükleolar organizasyon dayalı fare antral oosit karakterizasyonu için bir protokol mevcut.

Nucleolar Kromatin Teşkilatı dayanarak Fare Antral OOSİT İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Bu el yazması, at oositlerini morfolojik ve biyokimyasal olarak karakterize eden deneysel bir yaklaşımı anlatmaktadır. Özellikle mevcut çalışma, ultrason kılavuzluğundaki ovum toplama (OPU) ile olgunlaşmamış ve olgun ata oositlerinin nasıl toplanacağını ve kromozom ayrımını, iğ morfolojisini, küresel histone asetilasyonunu ve mRNA ekspresyonunu nasıl araştıracağını göstermektedir.

At Oositlerinde Kromozom Ayrımı, Histon Asetilasyonu ve İşmili Morfolojisi Analizi

Keşfedin fare oositlerinden mayotik kromozom yayılımları hazırlama yöntemini sinapsis ve rekombinasyon değerlendirmesi için. Bu teknik gelişimsel biyoloji araştırmalarında genetik süreçleri incelemeye yardımcı olur.

Sinapsis ve Rekombinasyonun Değerlendirilmesi için Fare Oositlerinden Mayotik Kromozom Yayılımlarının Hazırlanması

Daha fazla video keşfet