Name: Somatosensoriyel Nöronlarda Nöronal Membran Proteazomunun Hücre Alt Tipine Özgü Analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 27 s
Description: Keşfedin somatosensoryal nöronlarda nöronal membran proteazomunun hücre alt tipine özgü analizini. Bu yöntem, dorsal kök gangliyonlarından NMP eksprese eden nöronları izole ederek duyu algısının moleküler mekanizmalarını araştırmanıza olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Cartelli, D., Cavaletti, G., Lauria, G., Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ubiquitin+proteasome+system+and+microtubules+are+master+regulators+of+central+and+peripheral+nervous+system+axon+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Ubiquitin proteasome system and microtubules are master regulators of central and peripheral nervous system axon degeneration.</a> Cells. 11 (8), 1358(2022).</li>
<li>Fortun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+proteasome+activity+and+accumulation+of+ubiquitinated+substrates+in+a+hereditary+neuropathy+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Impaired proteasome activity and accumulation of ubiquitinated substrates in a hereditary neuropathy model.</a> J Neurochem. 92 (6), 1531-1541 (2005).</li>
<li>Thibaudeau, T. A., Smith, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+review+of+proteasome+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">A practical review of proteasome pharmacology.</a> Pharmacol Rev. 71 (2), 170-197 (2019).</li>
<li>Türker, F., Cook, E. K., Margolis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+proteasome+and+its+role+in+the+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">The proteasome and its role in the nervous system.</a> Cell Chem Biol. 28 (7), 903-917 (2021).</li>
<li>VerPlank, J. J. S., Lokireddy, S., Feltri, M. L., Goldberg, A. L., Wrabetz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+protein+degradation+and+proteasome+function+in+hereditary+neuropathies%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Impairment of protein degradation and proteasome function in hereditary neuropathies.</a> Glia. 66 (2), 379-395 (2018).</li>
<li>Moss, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+of+the+ubiquitin-proteasome+system+in+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A role of the ubiquitin-proteasome system in neuropathic pain.</a> J Neurosci. 22 (4), 1363-1372 (2002).</li>
<li>Meregalli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+painful+neuropathy+in+rats%3A+a+behavioral%2C+neurophysiological+and+pathological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pain%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced painful neuropathy in rats: a behavioral, neurophysiological and pathological study.</a> Eur J Pain. 14 (4), 343-350 (2010).</li>
<li>Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+bortezomib-induced+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxics%22%5BJournal%5D)">An overview of bortezomib-induced neurotoxicity.</a> Toxics. 3 (3), 294-303 (2015).</li>
<li>Velasco, R., Alberti, P., Bruna, J., Psimaras, D., Argyriou, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib+and+other+proteosome+inhibitors-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+from+pathogenesis+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Peripher+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Bortezomib and other proteosome inhibitors-induced peripheral neurotoxicity: from pathogenesis to treatment.</a> J Peripher Nerv Syst. 24 (Suppl 2), S52-S62 (2019).</li>
<li>Cavaletti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+a+neurophysiological+and+pathological+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced peripheral neurotoxicity: a neurophysiological and pathological study in the rat.</a> Exp Neurol. 204 (1), 317-325 (2007).</li>
<li>Cata, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+sensory+findings+in+patients+with+bortezomib-induced+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Quantitative sensory findings in patients with bortezomib-induced pain.</a> J Pain. 8 (4), 296-306 (2007).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+neuropathy+during+concomitant+administration+of+proteasome+inhibitors+and+factor+Xa+inhibitors%3A+identifying+the+likelihood+of+drug-drug+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Peripheral neuropathy during concomitant administration of proteasome inhibitors and factor Xa inhibitors: identifying the likelihood of drug-drug interactions.</a> Front Pharmacol. 13, 757415(2022).</li>
<li>Mina, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-marketing+analysis+of+peripheral+neuropathy+burden+with+new-generation+proteasome+inhibitors+using+the+FDA+adverse+event+reporting+system%5BTitle%5D)+AND+%22Turk+J+Hematol%22%5BJournal%5D)">Post-marketing analysis of peripheral neuropathy burden with new-generation proteasome inhibitors using the FDA adverse event reporting system.</a> Turk J Hematol. 38 (3), 218-221 (2021).</li>
<li>Holzer, A. -K., Suciu, I., Karreman, C., Goj, T., Leist, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+attenuation+of+purinergic+signaling+during+bortezomib-induced+peripheral+neuropathy+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Specific attenuation of purinergic signaling during bortezomib-induced peripheral neuropathy in vitro.</a> Int J Mol Sci. 23 (7), 3734(2022).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((a+potent+and+selective+proteasome+inhibitor%2C+exhibits+in+vivo+antiinflammatory+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">a potent and selective proteasome inhibitor, exhibits in vivo antiinflammatory activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (18), 10403-10408 (1999).</li>
<li>Maupin-Furlow, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteasomes+and+protein+conjugation+across+domains+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Proteasomes and protein conjugation across domains of life.</a> Nat Rev Microbiol. 10 (2), 73-82 (2012).</li>
<li>Coux, O., Tanaka, K., Goldberg, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+functions+of+the+20S+and+26S+proteasomes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Structure and functions of the 20S and 26S proteasomes.</a> Annu Rev Biochem. 65 (1), 801-847 (1996).</li>
<li>Groll, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+20S+proteasome+from+yeast+at+2.4+%C3%85+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure of 20S proteasome from yeast at 2.4 Å resolution.</a> Nature. 386 (6624), 463-471 (1997).</li>
<li>Pines, J., Lindon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteolysis%3A+anytime%2C+any+place%2C+anywhere%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Proteolysis: anytime, any place, anywhere.</a> Nat Cell Biol. 7 (8), 731-735 (2005).</li>
<li>Landeros, E. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nociceptive+activity+of+peripheral+sensory+neurons+is+modulated+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">The nociceptive activity of peripheral sensory neurons is modulated by the neuronal membrane proteasome.</a> Cell Rep. 43 (4), 114058(2024).</li>
<li>Qi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+DRG+genetic+toolkit+reveals+morphological+and+physiological+diversity+of+somatosensory+neuron+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A mouse DRG genetic toolkit reveals morphological and physiological diversity of somatosensory neuron subtypes.</a> Cell. 187 (6), 1508-1526.e16 (2024).</li>
<li>Sharif, B., Ase, A. R., Ribeiro-da-Silva, A., Séguéla, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+coding+of+itch+and+pain+by+a+subpopulation+of+primary+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Differential coding of itch and pain by a subpopulation of primary afferent neurons.</a> Neuron. 106 (6), 940-951.e4 (2020).</li>
<li>Krueger, E. R., Church, T. R., Brennan, A., Türker, F., Landeros, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+study+neuronal+membrane+proteasome+function+in+mouse+peripheral+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to study neuronal membrane proteasome function in mouse peripheral sensory neurons.</a> STAR Protoc. 6 (1), 103552(2025).</li>
<li>Chiu, M. L., Goulet, D. R., Teplyakov, A., Gilliland, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+structure+and+function%3A+the+basis+for+engineering+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Antibodies%22%5BJournal%5D)">Antibody structure and function: the basis for engineering therapeutics.</a> Antibodies. 8 (4), 55(2019).</li>
<li>Ramachandran, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-dependent+degradation+of+the+nascentome+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Activity-dependent degradation of the nascentome by the neuronal membrane proteasome.</a> Mol Cell. 71 (1), 169-177.e6 (2018).</li>
<li>He, H. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+membrane+proteasomes+regulate+neuronal+circuit+activity+in+vivo+and+are+required+for+learning-induced+behavioral+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Neuronal membrane proteasomes regulate neuronal circuit activity in vivo and are required for learning-induced behavioral plasticity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 120 (3), e2216537120(2023).</li>
<li>Paradise, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ApoE+isoforms+differentially+regulate+neuronal+membrane+proteasomes+to+shift+the+threshold+for+pathological+aggregation+of+endogenous+tau%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">ApoE isoforms differentially regulate neuronal membrane proteasomes to shift the threshold for pathological aggregation of endogenous tau.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBanker%2C+G+%22Culturing+nerve+cells%22">Culturing nerve cells</a>. , 2nd edn, MIT Press. (1998).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 M HEPES tampon çözeltisi, pH 7,3</td><td>Kaliteli Biyolojik</td><td>118-089-721</td><td>FACS arabelleği</td></tr><tr><td>10x PBS</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>70011-044</td><td>FACS arabelleği</td></tr><tr><td>%16 Paraformaldehit (PFA) stok çözeltisi; EM sınıfı</td><td>EMS</td><td>15710</td><td>Fiksatif Çözüm</td></tr><tr><td>1x Fosfat tamponlu salin (PBS)</td><td>Fisher Bilimsel</td><td>10-010-023</td><td>FACS yıkamaları</td></tr><tr><td>5 mL polistiren yuvarlak tabanlı tüp</td><td>Fisher Bilimsel</td><td>14-959-6</td><td>FACS tüpleri</td></tr><tr><td>7-Aminoaktinomisin D (7-AAD)</td><td>Davetli</td><td>A1310 Serisi</td><td>Ölü hücreleri etiketler</td></tr><tr><td>B27 takviyesi</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>17504044</td><td>Kültür ortamı</td></tr><tr><td>Sığır serum albümini</td><td>MilliporeSigma</td><td>A9647; CAS: 9048-46-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür dihidrat (CaCl?-2H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>C7902 (İngilizce)</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Tavuk anti-nörofilament ağır zincir (NF-H)</td><td>MilliporeSigma</td><td>AB5539 Serisi</td><td>antikor</td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>11320033</td><td>kültür ortamı; BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Eşek anti-keçi IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 555</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>A32816 Serisi</td><td>antikor</td></tr><tr><td>Eşek anti-tavşan IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 488</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>A32790 Serisi</td><td>antikor</td></tr><tr><td>DyLight 405 eşek anti-tavuk</td><td>Jackson İmmünoAraştırma</td><td>703-475-155</td><td>antikor</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>MilliporeSigma</td><td>E5134; CAS: 6381-92-6</td><td>Liberase TM/Liberase TL-papain çalışma çözümleri</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>MilliporeSigma</td><td>A9647 Serisi</td><td>kültür ortamı/FACS tamponu/bloke edici çözelti</td></tr><tr><td>Cam pastör pipeti, 9 inç</td><td>Fisher Bilimsel</td><td>1367820D</td><td>Titrurasyon</td></tr><tr><td>Keçi anti-PSMA2</td><td>evde yapılmıştır</td><td>NA</td><td>antikor</td></tr><tr><td>HEPES tozu</td><td>MilliporeSigma</td><td>H4034 Serisi</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>H21492</td><td>nükleer leke</td></tr><tr><td>At serumu</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>26050070</td><td>Engelleme çözümü</td></tr><tr><td>IB4, biyotin konjugatı</td><td>MilliporeSigma</td><td>L2140 Serisi</td><td>antikor</td></tr><tr><td>Laminin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L2020-1MG</td><td>Kültür yemeği</td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>25030081</td><td>Kültür ortamı</td></tr><tr><td>Liberase öğütme düşük (TL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>54010200001</td><td>Liberase TL stok çözümü</td></tr><tr><td>Liberase öğütme orta (TM)</td><td>MilliporeSigma</td><td>5401119001</td><td>Liberase TM stok çözümü</td></tr><tr><td>Magnezyum klorür heksahidrat (MgCl?-6H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M2393 Serisi</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Montaj ortamı</td><td>Güney Biyoteknoloji</td><td>0100-01</td><td>Flor Montajı-G</td></tr><tr><td>Papain</td><td>Worthington</td><td>Kedi #: 9001-73-4</td><td>Liberase TL-papain çalışma çözümü</td></tr><tr><td>Penisilin/streptomisin</td><td>MilliporeSigma</td><td>15140122</td><td>kültür ortamı/FACS tamponu</td></tr><tr><td>Poli-L-lizin hidrobromür (PLL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>P4707</td><td>Kültür yemeği</td></tr><tr><td>Potasyum klorür (KCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>P5405 (İngilizce)</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Tavşan anti-CGRP</td><td>İmmünostar</td><td>24112</td><td>antikor</td></tr><tr><td>sodyum klorür (NaCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>S9888; CAS: 7647-14-5</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Sorbitol</td><td>MilliporeSigma</td><td>56755-M</td><td>Komple tuzlu su çözeltisi</td></tr><tr><td>Streptavidin Alexa Fluor 647 eşleniği</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>S21374</td><td>antikor</td></tr><tr><td>Sakaroz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S0389-500G</td><td>Fiksatif Çözüm</td></tr><tr><td>Tripsin inhibitörü</td><td>MilliporeSigma</td><td>T9253; CAS: 9035-91-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr></tbody></table>

somatosensoriyel nöronlarda nöronal membran proteazomunun hücre alt tipine Özgü analizi

Cell Subtype-specific Analysis of Neuronal Membrane Proteasome in Somatosensory Neurons

NMP ile hücre içi proteazomlar arasında ayrım yapma yeteneği, membran geçirimsiz etiketleme yaklaşımlarına dayanır. Antikor beslemesi, yalnızca hücrenin dışından erişilebilen proteazomları etiketlemek için canlı nöronlar üzerinde proteazom alt birimine özgü antikorların kullanılmasına izin verir. Boyutları ve hidrofiliklikleri nedeniyle antikorlar, bozulmamış hücre zarlarını geçemezler24. Canlı nöronlar membran bütünlüğünü koruyarak antikorların hücreye girmesini e...

Somatosensoriyel Nöronlarda Nöronal Membran Proteazomunun Hücre Alt Tipine Özgü Analizi

Sensory neuron signaling depends on functional proteasomes, and their subcellular localization influences function. A specialized proteasome complex, the ...

cell-subtype-specific-analysis-neuronal-membrane-proteasome

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Fare beyin korteksi translationally etkin, sağlam synaptoneurosomes (SNS) hazırlamak için bir yöntem açıklanmıştır. Bu yöntem, aktif SNS hızlı hazırlanması için izin veren bir süreksiz Percoll sakaroz yoğunluk gradiyenti kullanır.

Süreksiz Percoll Sakkaroz Yoğunluk Gradient kullanarak Fare Cortex Synaptoneurosomes hazırlanması

Bir özel poliklonal antikor, hücre dışı epitopuna kullanarak canlı nöronlar yüzeyinde proteini etiket için bir yöntem tarif eder. Hücre yüzeyi üzerinde antikor tarafından bağlanan ve daha sonra endositoz üzerinden içsel protein Protein kalan ayırt veya inkübasyon sırasında yüzeye, kaçırılan edilebilir.

Canlı Kültür Nöronlar Antikor Besleme sonra Hücre-yüzey ve İçselleştirilmiş Proteinlerin Diferansiyel Etiketleme

Bu makalede, bir sükroz gradyanı üzerinde süreksiz bir ultra-santrifüj ile sinaptik plazma membranı ile bağlantılı proteinlerin zenginleştirme göstermektedir. Post-sinaptik yoğunluk proteinlerin takip eden hazırlama de tarif edilmektedir. Protein preparatları western blotting ya da 2 boyutlu DIGE analiz için uygundur.

Süreksiz Sukroz Degrade&#39;yi kullanma Sinaptik Plazma Membran ve postsinaptik Yoğunluk Proteinlerin Hazırlanması

Işık mikroskobu teknikleri, biyokimyasal tahlillerle birleştiğinde, netrin bağımlı akson dallanmasında SNARE aracılı ekzositozun katılımını aydınlatmaktadır. Bu tekniklerin kombinasyonu, akson dallanmasını ve hücre şekli değişikliğini kontrol eden moleküler mekanizmaların tanımlanmasına izin verir.

Kombine Metodolojileri kullanan Akson Dallanman ve Nöronal Morfogenez sırasında Plazma Membran Teslimat Rolü tanımlayın

Burada, farklı sinaptik bölmelere ait proteinleri izole etmek için sağlam bir prosedürü temsil eden bir beyin zar fraksiyonasyon protokolünü sunuyoruz.

Beyin Membranı Fraksiyonu: Bir<emEx Vivo</em&gt; Subsınaptik Protein Lokalizasyonunu Değerlendirmede Yaklaşım

Bu iletişim kuralı kritik adımlar ve yama-kelepçe sonra tek hücre multiplex Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu gerçekleştirmek için gereken önlemleri açıklar. Bu teknik ifade profil genler tarafından yama-kelepçe kayıtları ile karakterize bir tek hücreden önceden belirlenmiş bir dizi analiz etmek için basit ve etkili bir yöntemdir.

Tek hücre Multiplex Ters transkripsiyon polimeraz zincir tepkimesi sonra yama-kelepçe

Bu protokol, kemirgen beynin farklı hücresel bölmeler içinde Ubiquitin-proteasome sistemi (UPS) etkinliğini verimli bir şekilde ölçmek için tasarlanmıştır. Kullanıcılar, aynı hayvanlarda nükleer, sitoplazmik ve sinaptik fraksiyonlar içinde çalışan UPS 'i inceleyebilir, bu karmaşık analizleri gerçekleştirmek için gereken zaman ve hayvan sayısını azaltır.

Subcellular Ubiquitin ölçümü-kemirgen beyinde proteasom aktivitesi

Kriyo-kesit diseksiyonu, derin nicel proteom analizi için murine beynindeki en büyük nörojenik nişin taze ve donmuş hazırlanmasını sağlar. Yöntem kesin, verimlidir ve minimum doku pertürbasyonuna neden olur. Bu nedenle, bu nişin moleküler mikroçevriminin yanı sıra diğer organların, bölgelerin ve türlerin incelenmesi için idealdir.

Doğru ve Derin Nicel Proteom Analizi için Yetişkin Subependymal Bölgesinin Kriyo-kesit Diseksiyonu

İnsan kaynaklı pluripotent kök hücre kaynaklı nöronlardaki dinamik lizozomal mikro çevreyi karakterize etmek için proteomik protokolü etiketleyen bir nöronal lizozom yakınlık protokolü burada tanımlanmıştır. Lizozomal membran proteinleri ve lizozomlarla etkileşime giren proteinler (kararlı veya geçici olarak), canlı insan nöronlarında mükemmel hücre içi uzamsal çözünürlük ile bu yöntemde doğru bir şekilde ölçülebilir.

Nöronal lizozom interaktomunun yakınlık etiketleme proteomikleri ile karakterizasyonu

Bu protokol, fare beyninden son derece saf sinaptozomlar, sinaptik veziküller ve diğer sinaptik fraksiyonları elde etmek için sağlam ve ayrıntılı bir yöntem sunar. Bu yöntem, protein lokalizasyonunun ve fonksiyonunun kompartmanlı çözünürlükle biyokimyasal analizi de dahil olmak üzere sinaptik süreçlerin değerlendirilmesini sağlar.

Sinaptik Bileşenlerin Murin Beyinden İzolasyonu için Hücre Altı Fraksiyonasyonu

Keşfedin somatosensoryal nöronlarda nöronal membran proteazomunun hücre alt tipine özgü analizini. Bu yöntem, dorsal kök gangliyonlarından NMP eksprese eden nöronları izole ederek duyu algısının moleküler mekanizmalarını araştırmanıza olanak tanır.

Somatosensoriyel Nöronlarda Nöronal Membran Proteazomunun Hücre Alt Tipine Özgü Analizi

Daha fazla video keşfet