Name: Proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasının modellenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: Keşfedin, proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasını modellemek için kullanılan bu basit ve yeniden üretilebilir in vitro protokolü. Böbrek iskemi-reperfüzyon hasarının mekanizmalarını anlamak ve yeni tedavi stratejileri geliştirmek için ideal bir yöntem sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>384-kuyuklu qPCR plakası</td><td>Uygulamalı Biyosistemler</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Ortoalresa</td><td>Biocen22R</td><td></td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>Epidermal Büyüme Faktörü</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>PanReac AppliChem</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Biowest</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma bloğu</td><td>Eppendorf</td><td>TermoMikser C</td><td></td></tr><tr><td>Hidrokortizon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>Hipoksi Kuluçka Makinesi</td><td>Memmert</td><td>ICO 50med</td><td></td></tr><tr><td>IFN-&gamma;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>Kuluçka makinesi</td><td>Memmert</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>İzopropanol</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>Gibco</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Gibco</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Çok kanallı pipet</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Non-CO2 kuluçka makinesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCR primerleri</td><td>Eurofins Genomics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penisilin - Streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>qPCR Master Mix</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>Gerçek Zamanlı qPCR Sistemi</td><td>Uygulamalı Biyosistemler</td><td>QuantStudio 5</td><td></td></tr><tr><td>Ters transkripsiyon Master Mix</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>Enzim karışımı içerir</td></tr><tr><td>RNAssız su</td><td>HyClone</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Hücre Mito Stres Test Kiti</td><td>Çevik</td><td>103015-100</td><td>Oligomisin, FCCP, Antimisin A ve Rotenon içerir</td></tr><tr><td>Seahorse XF DMEM ortamı</td><td>Çevik</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Glikozu</td><td>Çevik</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>Deniz Atı XF Glutamin</td><td>Çevik</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Pyruvate</td><td>Çevik</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 Analizörü</td><td>Çevik</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 FluxPak</td><td>Çevik</td><td>103792-100</td><td>XFe96 Hücre Kültürü Mikroplakası ve XFe96 Sensör Kartuşu içerir</td></tr><tr><td>Termal döngücü</td><td>BIO-RAD</td><td>T100 Termal Döngücü</td><td></td></tr><tr><td>Triiodotironin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>UV-Vis spektrofotometre</td><td>DeNovix</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasının modellenmesi

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasının modellenmesi

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

modeling-hypoxiareoxygenation-injury-proximal-tubular-epithelial

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Solunum ve oksidatif fosforilasyon ile ve hücre canlılığı üzerindeki ilişkili mitokondriyal fonksiyonları üzerinde, protein kinaz C (PKC), izozimlerinin aktivasyon etkisi tarif edilmektedir. Yaklaşım seçici olarak mitokondriyal işlev ve hücre enerji durumunu belirlemek için birincil hücre kültürü deneyleri ve çeşitli PKC izozimleri overexpress için adenoviral teknik uyum sağlar.

Böbrek Hücreleri aşırı eksprese eden protein kinaz C izozimlerinin Mitokondriyal Fonksiyonlar ve Hücre Canlılık Değerlendirilmesi

Kaynak: Alluri, H., et.al. Kan-beyin bariyeri disfonksiyonunu incelemek için  in vitro  iskemi-reperfüzyon hasarı modeli olarak oksijen-glikoz yoksunluğu ve reoksijenasyon. J. Vis. Uzm.  (2015). Video, hipoksik ve besin yoksunluğundan yoksun koşulları simüle ederek oksijen-glikoz yoksunluğunun ve ardından yeniden oksijenasyonun sıçan beyni mikrovasküler endotel hücreleri (RBMEC'ler) üzerindeki etkisini göstermektedir. Bu koşullar, ATP'nin tükenmesine, hücre içi kalsiyumun artmasına ve hücre...

Oksijen-Glukoz Yoksunluğu ve Reoksijenasyonun Hücre-Hücre Etkileşimleri Üzerine Etkisi

İskemi-Reperfüzyon (İR) yaralanması yüksek oranda morbidite ve mortalite ile ilişkilidir. Burada tarif edilen oksijen-glukoz yoksunluğu ve reoksijenasyonunun (OGD-R) in vitro modelinin amacı, iskemi reperfüzyon hasarının, özellikle kan-beyin bariyeri (BBB) endotel hücrelerinde olmak üzere çeşitli hücreler üzerindeki etkilerini değerlendirmektir.

Bir oksijen-Glukoz Yoksunluk ve reoksijenizasyonun<em&gt; In Vitro</em&gt; İskemi-Reperfüzyon Modeli incelenmesi Kan-Beyin Bariyeri Disfonksiyon için

Bu iletişim kuralı yalıtmak ve daha sonra böbrek biyolojik fonksiyonları ex vivomitokondriyal bioenergetics de dahil olmak üzere, değerlendirmek için alt kültürlü fare birincil renal tübüler hücreler karakterize için düşük maliyetli bir yaklaşım sağlar.

Yalıtım, karakterizasyonu ve yüksek işlem hacmi ekstraselüler akı analiz fare birincil Renal tübüler epitel hücresi

Bu protokol, apikal yüzeye erişime izin veren, ters polariteye sahip ince bağırsak enteroidlerini kullanan apikal-dışarı nekrotizan enterokolit (NEC) bir çanak içi modelini tanımlar. NEC ile ilişkili epitel bozulmasını tespit etmek için bir immünofloresan boyama protokolü ve NEC-in-a-dish protokolüne tabi tutulan apikal-out enteroidlerin yaşayabilirliğini belirlemek için bir yöntem sunuyoruz.

İn Vitro Nekrotizan Enterokolitin Apikal-Out Enteroid Modeli

Burada, hücre dışı bir matris (3D-HRTEC) üzerinde tek tabakalar ve üç boyutlu kültürler geliştirmek için böbrek korteksinden insan renal tübüler epitel hücrelerinin (HRTEC) birincil kültürlerini elde etmek için protokolleri açıklıyoruz.

İnsan Renal Tübüler Epitel Hücre Primer Kültürlerinin Tek Tabakalı ve Üç Boyutlu Koşullarda Geliştirilmesi

Primer renal proksimal tübül epitel hücrelerini izole etmek ve kültürlemek için tüm insan böbreklerinin işlenmesi ve bu hücrelerin renal proksimal tübülü özetlemek için üç boyutlu, mikroakışkan, mikrofizyolojik bir platformda uygulanması için optimize edilmiş bir protokol sunuyoruz.

Primer İnsan Proksimal Tübül Epitel Hücrelerinin İzolasyonu ve Renal Proksimal Tübülün Mikrofizyolojik Modelinin Oluşturulmasında Kullanımı

Kendi kendine oluşan insan kalp organoidleri (hCO'lar), insan kalp gelişimi ve hastalıklarını modellemek için ortaya çıkan bir sistemdir. Burada, hipoksi-reoksijenlenme ile hCO'ların oluşturulması ve yaralanması için bir metodoloji ve yaralanma sonrası beklenen histolojik ve fonksiyonel sonuçların detayları sunulmaktadır.

Kendi Kendini Oluşturan İnsan Kardioidlerinde Hipoksi-Reoksijenlenme Yaralanma Modeli

Burada bir hava-sıvı arayüzü farklılaştırılmış büyüme de dahil olmak üzere insan bronşiyal solunum yolu doku eksplantlar birincil insan bronşiyal epitel hücreleri büyümek için detaylı bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, insan akciğer sağlığı ve hastalıkları, solunum yolu epitel rolünü araştırmak için birincil hücreleri bol miktarda kaynak sağlar.

Eksplantlar gelen Yetiştirilen İlköğretim İnsan Bronşiyal Epitel Hücreleri

Cıvıldamak uzun kodsuz RNA'lar genomik bağlanma yerleri (lncRNAs) eşleştirmek için yeni ve hızlı bir tekniktir. Yöntemi lncRNA bağlı genomik sitelerin numaralandırılmasına izin anti-sense fayans oligonükleotidden özgüllük yararlanır.

RNA Saflaştırma tarafından Kromatin İzolasyon (chirp)

Keşfedin, proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasını modellemek için kullanılan bu basit ve yeniden üretilebilir in vitro protokolü. Böbrek iskemi-reperfüzyon hasarının mekanizmalarını anlamak ve yeni tedavi stratejileri geliştirmek için ideal bir yöntem sunar.

Proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasının modellenmesi

Daha fazla video keşfet