Name: Hayvan Dokusunda Glikojen Sentaz Enzim Aktivitesinin Radyokimyasal Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T14:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 30 s
Description: Öğrenin, radyoizotoplar kullanarak fare iskelet kası homojenatında glikojen sentaz enzim aktivitesini nasıl ölçeceğinizi. Bu yüksek verimli yöntem, metabolik hastalıklarda tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Preiss, J., Walsh, D. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPreiss%2C+J+%22Biology+of+Carbohydrates%22">Biology of Carbohydrates</a>. Ginsburg, V., Robbins, P. 1, John Wiley. 199-314 (1981).</li>
<li>Pederson, B. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPederson%2C+BA+%22Enzymology+of+Complex+Alpha-Glucans%22">Enzymology of Complex Alpha-Glucans</a>. , CRC Press. 84-137 (2021).</li>
<li>Wayllace, N. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+enzyme-coupled+continuous+spectrophotometric+assay+for+glycogen+synthases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Rep%22%5BJournal%5D)">An enzyme-coupled continuous spectrophotometric assay for glycogen synthases.</a> Mol Biol Rep. 39 (1), 585-591 (2012).</li>
<li>Wilson, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectrophotometric+Methods+for+the+Study+of+Eukaryotic+Glycogen+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Spectrophotometric Methods for the Study of Eukaryotic Glycogen Metabolism.</a> J Vis Exp. (174), e63046(2021).</li>
<li>Danforth, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+synthetase+activity+in+skeletal+muscle.+Interconversion+of+two+forms+and+control+of+glycogen+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Glycogen synthetase activity in skeletal muscle. Interconversion of two forms and control of glycogen synthesis.</a> J Biol Chem. 240, 588-593 (1965).</li>
<li>Leloir, L. F., Olavarria, J. M., Goldemberg, S. H., Carminatti, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthesis+of+glycogen+from+uridine+diphosphate+glucose%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Biosynthesis of glycogen from uridine diphosphate glucose.</a> Arch Biochem Biophys. 81 (2), 508-520 (1959).</li>
<li>Schalin-Jantti, C., Harkonen, M., Groop, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+activation+of+glycogen+synthase+in+people+at+increased+risk+for+developing+NIDDM%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Impaired activation of glycogen synthase in people at increased risk for developing NIDDM.</a> Diabetes. 41 (5), 598-604 (1992).</li>
<li>Huang, X., Hansson, M., Laurila, E., Ahren, B., Groop, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fat+feeding+impairs+glycogen+synthase+activity+in+mice+without+effects+on+its+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fat feeding impairs glycogen synthase activity in mice without effects on its gene expression.</a> Metabolism. 52 (5), 535-539 (2003).</li>
<li>Holt, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+CD71+Centyrin%3A+Gys1+siRNA+conjugate+reduces+glycogen+synthesis+and+glycogen+levels+in+a+mouse+model+of+Pompe+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">A novel CD71 Centyrin: Gys1 siRNA conjugate reduces glycogen synthesis and glycogen levels in a mouse model of Pompe disease.</a> Mol Ther. 33 (1), 235-248 (2025).</li>
<li>Prats, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphorylation-dependent+translocation+of+glycogen+synthase+to+a+novel+structure+during+glycogen+resynthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphorylation-dependent translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis.</a> J Biol Chem. 280 (24), 23165-23172 (2005).</li>
<li>Perezleon, J. A., Osorio-Paz, I., Francois, L., Salceda, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+localization+of+glycogen+synthase+and+GSK3beta%3A+Control+of+glycogen+content+in+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Res%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical localization of glycogen synthase and GSK3beta: Control of glycogen content in retina.</a> Neurochem Res. 38 (5), 1063-1069 (2013).</li>
<li>Thomas, J. A., Schlender, K. K., Larner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+filter+paper+assay+for+UDP-glucose-glycogen+glucosyltransferase%2C+including+an+improved+biosynthesis+of+UDP-14C-glucose%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">A rapid filter paper assay for UDP-glucose-glycogen glucosyltransferase, including an improved biosynthesis of UDP-14C-glucose.</a> Analytical Biochemistry. 25 (1), 486-499 (1968).</li>
<li>Parker, G. J., Lund, K. C., Taylor, R. P., McClain, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+of+glycogen+synthase+mediated+by+O-linked+N-acetylglucosamine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance of glycogen synthase mediated by O-linked N-acetylglucosamine.</a> J Biol Chem. 278 (12), 10022-10027 (2003).</li>
<li>Niederwanger, A., Kranebitter, M., Ritsch, A., Patsch, J. R., Pedrini, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+gel+filtration+assay+to+determine+glycogen+synthase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+B+Analyt+Technol+Biomed+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">A gel filtration assay to determine glycogen synthase activity.</a> J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 820 (1), 143-145 (2005).</li>
<li>Suzuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+control+of+glycogen+metabolism+in+knockout+mice+lacking+the+muscle-specific+protein+phosphatase+PP1G%2FRGL%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Insulin control of glycogen metabolism in knockout mice lacking the muscle-specific protein phosphatase PP1G/RGL.</a> Mol Cell Biol. 21 (8), 2683-2694 (2001).</li>
<li>Nagy, A., Gertsenstein, M., Vintersten, K., Behringer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick+and+humane+sacrifice+of+a+mouse+by+cervical+dislocation%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Quick and humane sacrifice of a mouse by cervical dislocation.</a> CSH Protoc. 2006 (1), prot4357(2006).</li>
<li>Gomes, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+storage+and+muscle+glucose+transporters+%28GLUT-4%29+of+mice+selectively+bred+for+high+voluntary+wheel+running%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Glycogen storage and muscle glucose transporters (GLUT-4) of mice selectively bred for high voluntary wheel running.</a> J Exp Biol. 212 (Pt 2), 238-248 (2009).</li>
<li>Greenberg, C. C., Jurczak, M. J., Danos, A. M., Brady, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+branches+out%3A+new+perspectives+on+the+role+of+glycogen+metabolism+in+the+integration+of+metabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycogen branches out: new perspectives on the role of glycogen metabolism in the integration of metabolic pathways.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 291 (1), E1-E8 (2006).</li>
<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> Anal Biochem. 72, 248-254 (1976).</li>
<li>Gilboe, D. P., Larson, K. L., Nuttall, F. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioactive+method+for+the+assay+of+glycogen+phosphorylases%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Radioactive method for the assay of glycogen phosphorylases.</a> Anal Biochem. 47 (1), 20-27 (1972).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>[14C] Uridin 5-difosfos-glukoz</td><td>Amerikan Radyo Etiketli Kimyasallar</td><td>ARC 0154</td><td></td></tr><tr><td>31 ETCHR kromatografi makalesi</td><td>Whatman</td><td>3031 915</td><td></td></tr><tr><td>Benzamidin hidroklorür hidrat</td><td>Sigma</td><td>B6506</td><td></td></tr><tr><td>Beta merkaptoetanol</td><td>Sigma</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>Kuru banyo</td><td>Torey Pines Scientific</td><td>SC25</td><td></td></tr><tr><td>Etanol (200 proof)</td><td>PharmcoAaper</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Etilen glikol tetraasetik asit (EGTA)</td><td>Sigma</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>Etilen diamintetraasetik asit (EDTA)</td><td>Sigma</td><td>E5134</td><td></td></tr><tr><td>Glukoz-6-fosfat sodyum tuzu</td><td>Sigma</td><td>G7879</td><td></td></tr><tr><td>Tavşan karaciğerinden glikojen (Tip III)</td><td>Sigma</td><td>G8876</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka, düz taban, 96 kuyu</td><td>Greiner</td><td>655101</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka, PCR, 96 iyi</td><td>DOT Scientific</td><td>951-PCR</td><td></td></tr><tr><td>Çok Amaçlı Scintillasyon Sayacı</td><td>Beckman Coulter</td><td>LS 6500</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum florür dihidrat</td><td>Sigma</td><td>221872</td><td></td></tr><tr><td>Proteaz inhibitörü kokteyli</td><td>GoldBio</td><td>GB-108-2</td><td></td></tr><tr><td>Scintillation kokteyli</td><td>Reasearch Products International</td><td>111195</td><td></td></tr><tr><td>Scintillasyon şişeleri</td><td>Reasearch Products International</td><td>125509</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum florür</td><td>Sigma</td><td>S7920</td><td></td></tr><tr><td>Doku Yırtığı</td><td>Biospec Ürünleri</td><td>Model 398</td><td></td></tr><tr><td>Tosillisin Klorometil Keton (TLCK)</td><td>Sigma</td><td>T7254</td><td></td></tr><tr><td>Trizma tabanı (%99,9)</td><td>Sigma</td><td>T1503</td><td></td></tr><tr><td>Trizma hidroklorür</td><td>Sigma</td><td>T3253</td><td></td></tr><tr><td>Uridin 5-difospo-glukoz</td><td>Sigma</td><td>U-4625</td><td></td></tr></tbody></table>

hayvan dokusunda glikojen sentaz enzim aktivitesinin radyokimyasal değerlendirilmesi

Radiochemical Assessment of Glycogen Synthase Enzyme Activity in Animal Tissue

Hayvan Dokusunda Glikojen Sentaz Enzim Aktivitesinin Radyokimyasal Değerlendirilmesi

Glycogen is an important metabolite to many eukaryotic cells, integral to energy storage and quick energy release. The building of the molecule is ...

radiochemical-assessment-glycogen-synthase-enzyme-activity-animal

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Bu videoda, glikojen sentaz aktivitesinin tahmini için bir spektrofotometrik test açıklanmaktadır. Yöntem, zamanla NADH absorbansındaki azalmaya dayanır ve glikojen sentaz aktivitesini gösterir.

Glikojen sentaz aktivitesini belirlemek için spektrofotometrik test

Bu videoda, karakterize edilmemiş bir yapıya sahip bir glikojen numunesindeki dallanma derecesini belirlemek için kalitatif bir spektrofotometrik testi açıklıyoruz. Karakterize edilmemiş numunenin absorbans maksimumlarının bilinen dallı yapılara sahip polisakkaritlerinkiyle karşılaştırılması, karakterize edilmemiş numunede dallanmanın varlığını gösterir.

Glikojen dallanma derecesini ölçmek için glikojen dallanma deneyi

Burada in vitro glikojen titrasyonu için bir doğru, tekrarlanabilir ve uygun biyokimyasal yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik Abcam Glikojen deney kiti kullanır ve floresan ile titrasyon glikoz ve glikoz glikojen ardışık hidrolizi dayanmaktadır.

Glikojenin Biyokimyasal titrasyonu<em&gt; In vitro</em

Periyodik asit Schiff boyama, dokuların polisakkarit içeriğini görselleştiren bir tekniktir. Bu makale, insan venöz kanından saflaştırılmış periferik kan mononükleer hücrelerinde kullanılmak üzere uyarlanmış periyodik asit Schiff boyama protokolünü göstermektedir. Bu tür örnekler, lenfositler ve bağışıklık sisteminin diğer beyaz kan hücreleri için zenginleştirilmiştir.

Periyodik Asit Schiff Boyama ile periferik kan mononükleer hücreleri glikojen algılama

Burada, siyanobakteriyel hücrelerdeki glikojen içeriğini ölçmek için güvenilir ve kolay bir test sunuyoruz. İşlem, çökeltme, seçilebilir depolimerizasyon ve glikoz artıklarının belirlenmesini gerektirir. Bu yöntem hem vahşi hem de genetik mühendisliği yapılmış suşlar için uygundur ve siyanobakterilerin metabolik mühendisliğini kolaylaştırabilir.

Siyanobakterlerde Glikojen İçeriğinin Belirlenmesi

Kas glukoz alımının bozulmamış bir şekilde düzenlenmesi, tüm vücut glikoz homeostazını korumak için önemlidir. Bu protokol, çeşitli fizyolojik müdahalelerin tüm vücut glikoz metabolizması üzerindeki etkisini tanımlarken, izole ve inkübe edilmiş olgun iskelet kasında insülin ve kontraksiyonla uyarılmış glikoz alımının değerlendirilmesini sunar.

Farelerden İzole ve İnkübe Olgun İskelet Kasında İnsülin ve Kasılma ile Uyarılmış Glikoz Alımının Ölçülmesi

Glikojen metabolizmasının anahtar enzimlerinin aktivitesini ölçmek için teknikler, görünür aralıkta çalışan basit bir spektrofotometre kullanılarak sunulmaktadır.

Ökaryotik Glikojen Metabolizmasının İncelenmesi için Spektrofotometrik Yöntemler

Sükroz yoğunluk gradyan santrifüjlemesi kullanılarak karaciğer glikojeninin ekstraksiyonu için optimal bir sükroz konsantrasyonu belirlendi. Glikojen parçalayıcı enzimleri inhibe etmek için 10 dakikalık bir kaynatma adımının eklenmesinin faydalı olduğu kanıtlandı.

Glikojen Yapısının Belirlenmesi için Karaciğer Glikojen Moleküllerinin Ekstraksiyonu

Modifiye edilmiş bir fiksasyon sonrası prosedür, dokudaki glikojen parçacıklarının kontrastını arttırır. Bu yazıda, iskelet kasında lif tipine özgü hücre altı glikojen dağılımı hakkında tarafsız ve nicel veriler elde etmek için dokunun nasıl ele alınacağını, görüntülemenin nasıl yapılacağını ve stereolojik yöntemlerin nasıl kullanılacağını açıklayan adım adım bir protokol sunulmaktadır.

İskelet Kas Liflerinde Subsellüler Glikojen Dağılımının İletim Elektron Mikroskobu Kullanılarak Ölçülmesi

Mitokondri bitki hücre sadece küçük bir yüzdesi olarak, onlar çalışmalar bir dizi için saf gerekir. Mitokondri bitki organları çeşitli Homojenizasyon, son derece saf mitokondriyal kesir elde etmek için Diferansiyel ve yoğunluk gradient Santrifüjü tarafından takip tarafından ayrılmış olabilir.

Yalıtım ve solunum ölçümleri mitokondri Arabidopsis thaliana üzerinden

Öğrenin, radyoizotoplar kullanarak fare iskelet kası homojenatında glikojen sentaz enzim aktivitesini nasıl ölçeceğinizi. Bu yüksek verimli yöntem, metabolik hastalıklarda tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Hayvan Dokusunda Glikojen Sentaz Enzim Aktivitesinin Radyokimyasal Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet