Farelerde Canlı Görüntüleme ve Ovaryan Vasküler Fonksiyonun Ölçülmesi için Doppler Ultrasonografi

Bu araştırma, idrar preovulatif yumurtalık kan akışını invaziv olmayan in vivo yöntemle karakterize etmeyi amaçlamaktadır. Alan, farelerde normal fizyolojiyi bozmadan yumurtalık damar remodelasyonunu gerçek zamanlı incelemek için invaziv olmayan yöntemlerden yoksundur. Başlamak için, görüntüleme sisteminin arkasındaki ana gücü açın.

Sistem açıldıktan sonra, sepetin sol tarafındaki bilgisayar bekleme düğmesini açıp monitör ve bilgisayarı uyandırın. MS700 dönüştürücüsünü en sağdaki portta bulunan görüntüleme ünitesindeki aktif dönüştürücü portuna bağlayın. Transdüser konnektöründeki kilitleme pinini porttaki çentikle hizalayın.

Konnektörü tamamen içeri itin ve kilitleme kolunu dikey konuma çevirerek sabitleyin. Yazılım simgesine tıklayarak analiz yazılımını başlatın. Yeni bir çalışma oluşturmak için Yeni tuşuna tıklayın ve açılır menüden uygun adı seçin.

Çalışma Bilgileri penceresine çalışma adı, seri adını girin. Uygulama paketi yumurtalık, ölçüm paketi ise damarlıdır. Program açıldıktan ve dönüştürücü otomatik olarak algılandığında, yumurtalık uygulama paketini seçin.

Sonra, kalp atış hızı izlemek için doğru temas sağlamak amacıyla elektrotların her birine az miktarda elektrot kremi uygulayın. Hayvan tamamen sedasyon altına alındıktan sonra, gaz akışını görüntüleme platformundaki burun konisine açarak ve stop musluğunu indüksiyon odasına kapatarak yönlendirin. Fareyi nazikçe ısıtmalı görüntüleme platformuna aktarın.

Faresi sırt tarafı yukarıya bakacak şekilde yatağa yerleştirin ve burun konisini burnunun üzerine sabitleyerek anestezi sürdürün. Elektrot kremindeki her ayağını ilgili elektrot pedine bantlayın ve fizyolojik izleme yapın. Anestezi sırasında korneanın kurumasını önlemek için gözlere oftalmik merhem uygulayın.

Ayak sıkıştırma refleks yöntemiyle yeterli anestezi derinliğini doğrulayın. Hayvanın hayati belirtilerini, örneğin nefes alma hızı ve kalp atışı, rahatsızlık gösteren hareketler ve platform sıcaklığını her beş dakikada bir takip edin. Sonra, sağ arka uzuvdan orta hattına kadar elektrikli tıraş makinesiyle sırtın alt sağ kvartını tıraş edin, omurga boyunca yan kalarak.

İnce bir tabaka vücut tüy çıkarıcı krem uygulayın. Bir dakika sonra, kremi nemli gazlı bezle iyice silin. Sonra, tıraş edilen bölgeye bol ve eşit bir ultrason jeli tabakası uygulayın.

Dönüştürücü probu, mekanik standda fareye göre enine modda, yönlendirme çentiği operatörün soluna bakacak şekilde konumlandırın. Probu kelepçeyle sabitleyin. Standart gri tonlama görüntüleme penceresini etkinleştirmek için kontrol panelindeki B-Mode tuşuna basın.

Fare ve platformun düz olduğundan ve dönüştürücünün yüzeye dik olduğundan emin olun. Sonra, deriyi sola çekin ve dönüştürücüyü üst tıraş bölgesine yakın, sırtın orta hattına daha yakın konumlandırın. Dönüştürücüyü, ultrason jeliyle kaplanmış tıraş edilmiş alana nazikçe indirin.

Probun sol kenarını omurga, sağ kenarı ise sağ yana, doğru kenarı ise sağ yanla hizalayın. Yumurtalığı tanımlamak için önce böbreği tanımlayın; böbrek korteks ve medullaya sahip büyük açık gri oval yapıya sahiptir. Görüntüleme platformunu hafifçe farenin başına doğru iterek yumurtalık ve periovar yağ dokusunu ortaya çıkarın.

B-Mode videosunu yakalamak için Cine Store düğmesine basın. Şimdi, kontrol panelindeki Power Doppler Modu tuşuna basarak düşük hızlı akışa karşı yüksek hassasiyete sahip kan damarlarını görselleştirin. Doppler kazancını 32 ila 55 desibel, hassasiyeti 5, dinamik aralığı 15 DR ve hızı bir kilohertz olarak ayarlayın.

Platformu hafifçe ileri geri hareket ettirerek yumurtalık damarlarını en iyi şekilde görebilir ve yumurtalık hilumuna giren yumurtalık arterini, merkezi medulladaki medullar damarları ve gelişen foliküllerin çevresindeki kortikal damarları tespit edersiniz. Sinestore'a basarak yumurtalık ve damarların Power Doppler Modu'nda görüntülenen videosunu kaydet. Arteriyel ve venöz akışı ayırt etmek için Renk Doppler Modu'na basın.

Kırmızı, dönüştürücüye doğru akışı gösterirken, mavi ise ondan uzaklaşan akışı gösterir. Daha yüksek ortalama hıza sahip damar yumurtalık arteridir. Pulsed Wave PW Doppler düğmesine basarak örnek tarih çizgilerini açın.

Doppler Spektral Dalgaformunu etkinleştirmek için tekrar basın. Örnek kapısını gemi lümeninin merkezine yerleştirdikten sonra, insonasyon açısını açı düğmesi kullanarak 60 dereceden küçük veya eşit ve akışa paralel olacak şekilde ayarlayın. Yumurtalık arteri için kapıyı yumurtalığa girmeden hemen önce yerleştirin.

Medullary damar için, onu merkezi bifurkasyona yerleştirin. Kortikal damarlar için, büyüyen bir folikülün tabanına yerleştirilin. Hem ultrason görüntüsünü hem de spektral dalga formunu kaydetmek için Cine Store'a basın.

Görüntüleme tamamlandığında, ultrason jeli arkadan silin ve fareyi görüntüleme platformundan nazikçe çıkarın. Ve fareyi tamamen uyanınca bir ısıtma pedinin üzerine koyun. Power Doppler görüntüleme, insan koriyonik gonadotropin enjeksiyonundan bir saat sonra medullar damarlarda gözle görülür bir artış olduğunu, sekiz saat sonra başlangıç seviyesine döndüğünü ve enjeksiyondan 12 saat sonra daha da azaldığını gösterdi.

Renk Doppler görüntüleme, yumurtalık arteri ile yumurtalık damarı arasındaki net ayrımı ve yumurtalık damarlarındaki akış yönünün daha iyi görselleştirilmesini sağladı. Temsil eden PW Doppler dalga formları, hormon olarak yanıtlı bir farenin yumurtalık arterinde ölçülebilir zirve sistolik ve son diyastolik hızlarla belirgin döngüler gösterirken, tepki vermeyen bir farede tespit edilebilir dalga formu olmayan düşük sinyal izleri sergilendi. İnsan korionik gonadotropin enjeksiyonundan bir saat sonra, uyarıya yanıt veren farelerde yumurtalık arter, medullar damarlar ve kortikal damarlarda kan akışı hızı arttı, ancak tepki vermeyen farede böyle bir artış gözlemlenmedi.

Tepki vermeyen farelerde, kortikal damarlardaki hız, atanan yer tutucu değerlerle belirtilen belirlenen zaman noktalarında tespit eşiğinin altına düştü. Doppler ultrasonografisi kullanarak, farelerde DLH dalgalanmasından sonra yumurtalık kan akışı hızının hızla arttığını belirledik. Doppler ultrasonografisi, preovülatör dönemde yumurtalık hemodinamiğinin tekrar, invaziv olmayan bir şekilde değerlendirilmesini sağlar; bu diğer yöntemler bunu başaramaz.

Normal preovülatör hemodinamik karakterize edildikten sonra, gelecekteki çalışmalar artık bu protokolü PCOS gibi yumurtalık hastalıkları modellerinde kan akışı bozulmalarını incelemek için kullanabilir.