Name: Klonlama için Nükleer Donör olarak Kryokonserif At Sperminden Somatik Hücreleri İzole Etmek İçin Basit Bir Mikroaspirasyon Tekniği (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Öğrenin, klonlama için at spermindeki somatik hücreleri mikroaspirasyon tekniğiyle izole etme yöntemini. Bu teknik, uzun kültür sürelerini ve sperm kontaminasyonunu önleyerek hücreleri hemen kullanılabilir hale getirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Pandey, A., Gupta, S. C., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+potential+of+cultured+skin+fibroblast%2C+cumulus%2C+and+granulosa+cell+to+produce+somatic+cell+nuclear+transfer+%28SCNT%29+preimplantation+embryos+in+buffaloes+%28Bubalus+bubalis%29+in+relation+to+gene+expressions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Comparative potential of cultured skin fibroblast, cumulus, and granulosa cell to produce somatic cell nuclear transfer (SCNT) preimplantation embryos in buffaloes (Bubalus bubalis) in relation to gene expressions.</a> Cell Reprogram. 12 (3), 357-368 (2010).</li>
<li>Galli, C., Duchi, R., Moor, R. M., Lazzari, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+leukocytes+contain+all+the+genetic+information+necessary+for+the+development+of+a+new+individual%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning%22%5BJournal%5D)">Mammalian leukocytes contain all the genetic information necessary for the development of a new individual.</a> Cloning. 1 (3), 161-170 (1999).</li>
<li>Olsson, P. O., Yeonwoo, J., Park, K., Yoo, Y. M., Hwang, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+births+from+urine+derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Live births from urine derived cells.</a> PLoS One. 18 (1), e0278607(2023).</li>
<li>Vignon, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+potential+of+bovine+embryos+reconstructed+from+enucleated+matured+oocytes+fused+with+cultured+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22C+R+Acad+Sci+III%22%5BJournal%5D)">Developmental potential of bovine embryos reconstructed from enucleated matured oocytes fused with cultured somatic cells.</a> C R Acad Sci III. 321 (9), 735-745 (1998).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culture+and+characterisation+of+somatic+cells+derived+from+semen+and+milk+of+endangered+sheep+and+eland+antelope%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation, culture and characterisation of somatic cells derived from semen and milk of endangered sheep and eland antelope.</a> Reprod Fertil Dev. 19 (4), 576-584 (2007).</li>
<li>Kjelland, M. E., Liu, J., Hyatt, D., Kraemer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection%2C+isolation%2C+and+culture+of+somatic+cells+from+avian+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Collection, isolation, and culture of somatic cells from avian semen.</a> Avian Biol Res. 6 (4), 255-260 (2013).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloned+embryos+from+semen.+Part+1%3A+in+vitro+proliferation+of+epithelial+cells+on+embryonic+fibroblasts+after+isolation+from+semen+by+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Cloned embryos from semen. Part 1: in vitro proliferation of epithelial cells on embryonic fibroblasts after isolation from semen by gradient centrifugation.</a> Cloning Stem Cells. 10 (1), 143-160 (2008).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+culture+systems+for+attachment+and+proliferation+of+epithelial+cells+cultured+from+ovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of culture systems for attachment and proliferation of epithelial cells cultured from ovine semen.</a> Anim Reprod Sci. 115 (1-4), 49-57 (2009).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryo+production+and+possible+species+preservation+by+nuclear+transfer+of+somatic+cells+isolated+from+bovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Embryo production and possible species preservation by nuclear transfer of somatic cells isolated from bovine semen.</a> Theriogenology. 74 (9), 1629-1635 (2010).</li>
<li>Saini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+epithelial+cells+from+stored+buffalo+semen+and+their+use+for+the+production+of+cloned+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of epithelial cells from stored buffalo semen and their use for the production of cloned embryos.</a> Reprod Fertil Dev. 31 (10), 1581-1588 (2019).</li>
<li>Brom-de-Luna, J. G., Canesin, H. S., Wright, G., Hinrichs, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+of+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+equine+semen+using+fluorescence-assisted+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Culture of somatic cells isolated from frozen-thawed equine semen using fluorescence-assisted cell sorting.</a> Anim Reprod Sci. 190, 10-17 (2018).</li>
<li>Ramos, B., Rodríguez, A. A., Rosales, A. M., Montiel, A. J., Hernández, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+somatic+cell+populations+in+cryopreserved+equine+semen+as+a+source+of+donor+nuclei+for+somatic+cloning%3A+preliminary+results%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Identification of somatic cell populations in cryopreserved equine semen as a source of donor nuclei for somatic cloning: preliminary results.</a> Reprod Fertil Dev. 37 (1), (2025).</li>
<li>Moulavi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer+in+Asiatic+cheetah+using+nuclei+derived+from+post-mortem+frozen+tissue+in+absence+of+cryo-protectant+and+in+vitro+matured+domestic+cat+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer in Asiatic cheetah using nuclei derived from post-mortem frozen tissue in absence of cryo-protectant and in vitro matured domestic cat oocytes.</a> Theriogenology. 90, 197-203 (2017).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Ooga, M., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+mouse+offspring+from+zygotes+fertilized+with+freeze-dried+spermatids%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Production of mouse offspring from zygotes fertilized with freeze-dried spermatids.</a> Sci Rep. 12 (1), 18430(2022).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Hayashi, E., Ishiuchi, T., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+cloned+offspring+derived+from+freeze-dried+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Healthy cloned offspring derived from freeze-dried somatic cells.</a> Nat Commun. 13 (1), 3666(2022).</li>
<li>Loi, P., Fulka, J., Hildebrand, T., Ptak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+of+non-living+cells%3A+Trash+or+recycle%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Genome of non-living cells: Trash or recycle.</a> Reproduction. 142 (4), 497-503 (2011).</li>
<li>Wakayama, S., Wakayama, T., Wells, D. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWakayama%2C+S+%22Encyclopedia+of+Life+Sciences%22">Encyclopedia of Life Sciences</a>. , 1-10 (2023).</li>
<li>Lanza, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cell+life-span+and+telomere+length+in+animals+cloned+from+senescent+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Extension of cell life-span and telomere length in animals cloned from senescent somatic cells.</a> Science. 288, 665-669 (2000).</li>
<li>González-Bermúdez, B., Guinea, G. V., Plaza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+micropipette+aspiration%3A+applications+in+cell+biomechanics%2C+models%2C+and+extended+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Advances in micropipette aspiration: applications in cell biomechanics, models, and extended studies.</a> Biophys J. 116 (4), 587-594 (2019).</li>
<li>Hochmuth, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration+of+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration of living cells.</a> J Biomech. 33 (1), 15-22 (2000).</li>
<li>Vajta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+healthy+calf+by+somatic+cell+nuclear+transfer+without+micromanipulators+and+carbon+dioxide+incubators+using+the+handmade+cloning+%28HMC%29+and+the+submarine+incubation+system+%28SIS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Production of a healthy calf by somatic cell nuclear transfer without micromanipulators and carbon dioxide incubators using the handmade cloning (HMC) and the submarine incubation system (SIS).</a> Theriogenology. 62 (8), 1465-1472 (2004).</li>
<li>Alteri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+embryo+assisted+hatching+approaches%3A+A+systematic+review+of+the+current+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Revisiting embryo assisted hatching approaches: A systematic review of the current protocols.</a> J Assist Reprod Genet. 35 (3), 367-391 (2018).</li>
<li>Briski, O., Salamone, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+ICSI+in+livestock+species%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of ICSI in livestock species.</a> Anim Reprod Sci. 246, 106925(2022).</li>
<li>Wall, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronuclear+microinjection%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Pronuclear microinjection.</a> Cloning Stem Cells. 3 (4), 209-220 (2001).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hope+for+restoration+of+dead+valuable+bulls+through+cloning+using+donor+somatic+cells+isolated+from+cryopreserved+semen%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hope for restoration of dead valuable bulls through cloning using donor somatic cells isolated from cryopreserved semen.</a> PLoS One. 9 (3), e90755(2014).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+SCNT+embryos+produced+from+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+semen%3A+Effect+of+trichostatin+A+on+the+in+vitro+and+in+vivo+developmental+potential%2C+quality+and+epigenetic+status%5BTitle%5D)+AND+%22Zygote%22%5BJournal%5D)">Buffalo (Bubalus bubalis) SCNT embryos produced from somatic cells isolated from frozen-thawed semen: Effect of trichostatin A on the in vitro and in vivo developmental potential, quality and epigenetic status.</a> Zygote. 24 (4), 549-553 (2016).</li>
<li>Guevorkian, K., Maître, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration%3A+A+unique+tool+for+exploring+cell+and+tissue+mechanics+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration: A unique tool for exploring cell and tissue mechanics in vivo.</a> Methods Cell Biol. 139, 187-201 (2017).</li>
<li>Duah, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+hand-made+cloned+buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+embryos+from+nonviable+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Anim%22%5BJournal%5D)">Production of hand-made cloned buffalo (Bubalus bubalis) embryos from nonviable somatic cells.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 52 (10), 983-988 (2016).</li>
<li>Loi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclei+of+nonviable+ovine+somatic+cells+develop+into+lambs+after+nuclear+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Nuclei of nonviable ovine somatic cells develop into lambs after nuclear transplantation.</a> Biol Reprod. 67 (1), 126-132 (2002).</li>
<li>Fahrudin, M., Otoi, T., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+competence+of+bovine+embryos+reconstructed+by+the+transfer+of+somatic+cells+derived+from+frozen+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental competence of bovine embryos reconstructed by the transfer of somatic cells derived from frozen tissues.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1151-1154 (2001).</li>
<li>Podico, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-layer+colloid+centrifugation+as+a+method+to+process+urine-contaminated+stallion+semen+after+freezing-thawing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Single-layer colloid centrifugation as a method to process urine-contaminated stallion semen after freezing-thawing.</a> J Equine Vet Sci. 87, 102910(2020).</li>
<li>Zhang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+porcine+urine-derived+cells+as+nuclei+donor+for+somatic+cell+nuclear+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of porcine urine-derived cells as nuclei donor for somatic cell nuclear transfer.</a> J Vet Sci. 23 (2), e40(2022).</li>
<li>Mizutani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cloned+mice+and+nuclear+transfer+embryonic+stem+cell+lines+from+urine-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Generation of cloned mice and nuclear transfer embryonic stem cell lines from urine-derived cells.</a> Sci Rep. 6, 23808(2016).</li>
<li>Long, S., Kenworthy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+cells+in+diagnostic+semen+analysis%3A+a+guide+for+laboratories+and+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Round cells in diagnostic semen analysis: a guide for laboratories and clinicians.</a> Br J Biomed Sci. 79, 10129(2022).</li>
<li>Johanisson, E., Campana, A., Luthi, R., de Agostini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+%27round+cells%27+in+semen+analysis%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Update%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 'round cells' in semen analysis: a comparative study.</a> Hum Reprod Update. 6 (4), 404-412 (2000).</li>
<li>Graber, M., Lane, B., Lamia, R., Pastoriza-Munoz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+cells%3A+Renal+tubular+cells+in+the+urinary+sediment+with+characteristics+of+viability%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Bubble cells: Renal tubular cells in the urinary sediment with characteristics of viability.</a> J Am Soc Nephrol. 1 (7), 999-1004 (1991).</li>
<li>Rahmanian, N., Bozorgmehr, M., Torabi, M., Akbari, A., Zarnani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+separation%3A+Potentials+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Prep+Biochem+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell separation: Potentials and pitfalls.</a> Prep Biochem Biotechnol. 47 (1), 38-51 (2017).</li>
<li>Håård, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+frozen+stallion+semen+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Use of frozen stallion semen in Europe.</a> Acta Vet Scand Suppl. 88, 123-127 (1992).</li>
<li>Klug, E., Treu, H., Hillmann, H., Heinze, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+insemination+of+mares+with+fresh+and+frozen+stallion+semen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Results of insemination of mares with fresh and frozen stallion semen.</a> J Reprod Fertil Suppl. 23, 107-110 (1975).</li>
<li>Pukazhenthi, B., Comizzoli, P., Travis, A. J., Wildt, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+emerging+technologies+to+the+study+and+conservation+of+threatened+and+endangered+species%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Applications of emerging technologies to the study and conservation of threatened and endangered species.</a> Reprod Fertil Dev. 18 (1-2), 77-90 (2006).</li>
<li>Swanson, W. F., Magarey, G. M., Herrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+cryopreservation+in+endangered+felids%3A+developing+linkage+of+in+situ-ex+situ+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Sperm cryopreservation in endangered felids: developing linkage of in situ-ex situ populations.</a> Soc Reprod Fertil Suppl. 65, 417-432 (2007).</li>
<li>Lagutina, I., Fulka, H., Lazzari, G., Galli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer%3A+Advancements+and+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer: Advancements and problems.</a> Cell Reprogram. 15 (5), 374-384 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2 beta Merkaptoetanol</td><td>SIGMA</td><td>M7522</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>1x DPBS</td><td>GIBCO</td><td>REF-21600010</td><td>Somatik hücrelerin manipülasyonu</td></tr><tr><td>Mutlak etanol</td><td>HYCEL</td><td>EL CRISOL 50181-1L73</td><td>Pipet üretimi için</td></tr><tr><td>Antibiyotik-antimikotik 100 kat</td><td>INVITRO SA. M&eacute; xico</td><td></td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>Borosilikat kapillyarlar (1,0 mm O.D. & Times; 0,78 mm K.D. & Times; 100 mm Uzunluk)</td><td>HARVARD APPARATI, ABD</td><td>EC1-30-0035</td><td>Pipet üretimi için</td></tr><tr><td>BSA</td><td>SIGMA</td><td>A3311</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>DMEM/F12 orta</td><td>GIBCO</td><td>REF-12500-062</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>At kriyokonservalı menin örneği</td><td></td><td></td><td>Kriyokonserve edilmiş menî örnekleri ticari bir dağıtıcıdan alınmış ve 19 yıldan fazla bir süre sıvı azotta korunmuştur. Tüm dondurulmuş at spermi örnekleri, Meksika'daki ilgili veterinerlik otoriteleri tarafından yetkilendirilen ticari dağıtıcılardan alınmıştır; bu örnek Meksika Resmi Standardı NOM-027-ZOO-1995, Ev Hayvanlarından Spermin Zoosaniter Süreci'ne uygun olarak alınmıştır.</td></tr><tr><td>Okulluk nişangahı</td><td></td><td>Pipet üretimi için araç</td><td>Gerekli ekipmanlar</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>GIBCO</td><td>REF-26140-079</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>Hidroflurik asit</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>339261</td><td>Pipet üretimi için</td></tr><tr><td>Ters Optik Mikroskobu</td><td>Eclipse, TE 200</td><td>NIKON</td><td>Somatik hücrelerin mikromanipülasyonu</td></tr><tr><td>Laboratuvar&nbsp; Kuru fırın</td><td></td><td>Pipet üretimi için araç</td><td>Gerekli ekipmanlar</td></tr><tr><td>Mikro Dökümhane</td><td></td><td>Pipet üretimi için araç</td><td>Gerekli ekipmanlar</td></tr><tr><td>Ters Mikroskop için mikromanipülatör seti</td><td></td><td>Hücrelerin mikromanipülasyonu</td><td>Gerekli ekipmanlar</td></tr><tr><td>Mikropipet çekici</td><td>P-97, SUTTER ALETI</td><td>Pipet üretimi için araç</td><td>Aşağıdaki ayarlar&mdash; Isınma: 720; Çekme: 30; Hız: 50; Süre: 220; Basınç</td></tr><tr><td>Mineral yağ</td><td>SIGMA</td><td>M8410</td><td>Somatik hücrelerin manipülasyonu</td></tr><tr><td>Nunclon&nbsp; hücre kültürü tabakları, kısırlık ve zamanlar; H 35 mm ve zamanlar; 10 mm</td><td>NUNCLON</td><td>Nunc 153066</td><td></td></tr><tr><td>PVA</td><td>SIGMA</td><td>P8136</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>PVP</td><td>SIGMA</td><td>P5288</td><td>Somatik hücreler kültürü</td></tr><tr><td>Tripan mavi çözeltisi %0,4</td><td>GIBCO</td><td>REFERANS 15250061</td><td>Hücre boyası</td></tr></tbody></table>

klonlama için nükleer donör olarak kryokonserif at sperminden somatik hücreleri İzole etmek İçin basit bir mikroaspirasyon tekniği

A Simple Microaspiration Technique for Isolating Somatic Cells from Cryopreserved Equine Semen as Nuclear Donors for Cloning

Tablo 1, mikroaspirasyon tekniğinin, üç aygır arasında kriyokonsertif edilmiş at menisinden somatik hücreleri verimli bir şekilde geri kazandığını ve yakalama oranlarının 317,7 ± 9,60'a ± 424,7 33,65 hücre/saat arasında değiştiğini göstermektedir. En yüksek verimli aygır #03 oldu ve bu yöntemin uzun süreli depolanmış örneklerde bile etkinliğini gösterdi. Veriler, tekniğin somatik hücreleri meniden tutarlı ve etkili şekilde izole ettiğini, ortalama yakalama oranları ve sta...

Klonlama için Nükleer Donör olarak Kryokonserif At Sperminden Somatik Hücreleri İzole Etmek İçin Basit Bir Mikroaspirasyon Tekniği

Semen is a complex fluid that, in addition to spermatozoa, contains other cell populations, including immune cells, immature male germ cells, epithelial ...

a-simple-microaspiration-technique-for-isolating-somatic-cells-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu film ve protokol nükleer transfer öğrenmeye yardımcı olmayı amaçlamaktadır.

Fare Oosit içine Nükleer Transfer

Kardiyak çekirdeklerin yoğunluğu sedimentasyon ile izole edilmiş ve akım sitometri kardiyomiyosit çekirdeklerinin belirlemek ve sıralamak için pericentriolar malzeme 1 (PCM-1) karşı antikorlar ile immunolabeled edilir.

Post-mortem Doku gelen kardiyomiyosit Çekirdeklerin İzolasyonu

Enzimler ve deterjan kaçınarak kemirgen malzemeden testis hücre süspansiyonları, mekanik hazırlanması için bir yeni protokol tarif edilmektedir. Yöntem çok basit, hızlı, tekrarlanabilir ve akış sıralama ve RNA ekstraksiyon için uygun kaliteli hücre süspansiyonları, vermektedir.

Testis Hücre Cezalı Hazırlanması için basit ve Verimli Tekniği

MicroSecure Vitrifikasyon, FDA iyi üretim ve doku işleme uygulamalarıyla uyumlu, ticari olmayan, aseptik kapalı bir vitrifikasyon cihazı sistemi olarak geliştirilmiştir. Hidrofobik tıkalı embriyo pipetlerinin endüstriden çekilmesi nedeniyle, vitrifikasyon prosedürü, standart iç pamuk tapadan önce bir iç conta içerecek şekilde değiştirildi.

Modifiye MicroSecure Vitrifikasyon: İnsan Blastosistlerinin A, Güvenli Basit ve Etkili Kryoprezervasyon Prosedürü

Bu iletişim kuralı cloacal Masaj, kuşlar ve kuş sperm bir ticari ekstraksiyon kiti değişiklikleri ile kullanarak çıkarma DNA meni toplamak için bir non-invaziv el ile teknik açıklar.

Kuş sperm toplama Cloacal masaj ve Sperm DNA izolasyonu

Biz fare klonlama trichostatin A, C vitamini ve deiyonize sığır serum albümin kullanarak büyük ölçüde geliştirilmiş bir yöntem açıklanmaktadır. Verimli klonlanmış embriyo gelişimini destekleyen bir basitleştirilmiş, tekrarlanabilir protokol gösteriyoruz. Bu nedenle, bu yöntemi fare klonlama için standart bir prosedür haline gelebilir.

Kombinasyon tedavisi Trichostatin A ve C vitamini fareler somatik hücre nükleer Transfer tarafından klonlama daha etkili olmasını sağlar.

Bu makale, yarı klonlanmış embriyoların yapımında sperm yerine partenogenetik haploid embriyonik kök hücrelerin kullanımını göstermeyi amaçlamaktadır.

Sperm Yerine Fare Partenogenetik Haploid Embriyonik Kök Hücrelerin Uygulanması

Burada, hücre çekirdeği hazırlığını tanımlayan bir protokol sunuyoruz. Kardiyak dokunun mikrodiseksiyonu ve enzimatik ayrışmasından sonra, progenitör hücreler donduruldu, ardından tek çekirdekli RNA dizilimi için kullanılan saf canlı hücrelerin izolasyonu ve yüksek verimli dizileme analizleri ile transpozaz erişilebilir kromatin için tek çekirdekli tahlil yapıldı.

Epigenom ve Tek Hücre Çözünürlüğünde Gen Ekspresyon Profillemesi için Fare Kardiyak Progenitör Hücrelerinden Çekirdek İzolasyonu

Çalışma, aşağı akış tek çekirdekli RNA dizilimi için donmuş memeli dokularından yüksek kaliteli çekirdekleri izole etmek için basit, hızlı ve kısmen otomatikleştirilmiş bir protokolü açıklamaktadır.

Tek Çekirdek Dizilimi için Donmuş Memeli Dokularından Tek Çekirdeklerin İzolasyonu için Basit, Hızlı ve Kısmen Otomatik Bir Protokol

Tek çekirdekli yeni nesil dizileme analizlerini desteklemek için kriyoprezervasyonlu indüklenmiş pluripotent kök hücre türevli stromal/endotel ve kan hücresi tiplerinden yüksek kaliteli çekirdeklerin çıkarılması için bir protokol açıklıyoruz. Yüksek kaliteli, sağlam çekirdekler üretmek, multiomik deneyler için zorunludur, ancak bazı laboratuvarlar için sahaya giriş için bir engel olabilir.

Dondurularak Saklanmış İn Vitro Kaynaklı Kan Hücrelerinden Nükleer İzolasyon

Koroner endarterektomi doku örnekleri, optimize edilmiş bir dissosiyasyon protokolü kullanılarak tek çekirdekleri izole etmek için işlendi. İzole çekirdeklerin bütünlüğü üç tamamlayıcı yaklaşımla doğrulandı: zar bütünlüğünü değerlendirmek için tripan mavisi dışlama boyama, nükleer morfolojiyi doğrulamak için DAPI tabanlı konfokal mikroskopi ve nükleer verim ile saflığı nicelikten ölçemek için akış sitometrisi.

Koroner Endarter Baypas Grefti Hastalarının Koroner Endarterektomi Dokusundan Tek Çekirdek İzolasyonu

Öğrenin, klonlama için at spermindeki somatik hücreleri mikroaspirasyon tekniğiyle izole etme yöntemini. Bu teknik, uzun kültür sürelerini ve sperm kontaminasyonunu önleyerek hücreleri hemen kullanılabilir hale getirir.

Klonlama için Nükleer Donör olarak Kryokonserif At Sperminden Somatik Hücreleri İzole Etmek İçin Basit Bir Mikroaspirasyon Tekniği (Video) | JoVE Journal

Klonlama için Nükleer Donör olarak Kryokonserif At Sperminden Somatik Hücreleri İzole Etmek İçin Basit Bir Mikroaspirasyon Tekniği

Daha fazla video keşfet