Name: Farklı Memeli Beyinlerinde Nicel Hücre Sayımı Çalışmaları İçin Karşılaştırmalı Yaklaşım (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-16T13:15:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Öğrenin, farklı memeli türlerindeki nöronal popülasyon farklılıklarını karşılaştırmalı analizle incelemeyi. Bu yöntem, evrimsel örüntüleri ortaya çıkarmak ve büyük beyinli memelilerdeki teknik zorlukları aşmak için araştırmacılara çerçeve sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Brenowitz, E. A., Zakon, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+from+the+bottleneck%3A+benefits+of+the+comparative+approach+to+modern+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Emerging from the bottleneck: benefits of the comparative approach to modern neuroscience.</a> Trends Neurosci. 38 (5), 273-278 (2015).</li>
<li>Bolker, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+translational+research%3A+rosetta+stone+or+stumbling+block%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">Animal models in translational research: rosetta stone or stumbling block.</a> Bioessays. 39 (12), 1-8 (2017).</li>
<li>Moreno-Jiménez, E. P., Terreros-Roncal, J., Flor-García, M., Rábano, A., Llorens-Martín, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidences+for+adult+hippocampal+neurogenesis+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Evidences for adult hippocampal neurogenesis in humans.</a> J Neurosci. 41 (12), 2541-2553 (2021).</li>
<li>Sorrells, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+controls+in+adults+and+children+support+that+very+few%2C+if+any%2C+new+neurons+are+born+in+the+adult+human+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Positive controls in adults and children support that very few, if any, new neurons are born in the adult human hippocampus.</a> J Neurosci. 41 (12), 2554-2565 (2021).</li>
<li>Simard, S., Matosin, N., Mechawar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+hippocampal+neurogenesis+in+the+human+brain%3A+updates%2C+challenges%2C+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscientist%22%5BJournal%5D)">Adult hippocampal neurogenesis in the human brain: updates, challenges, and perspectives.</a> Neuroscientist. 31 (4), 141-158 (2024).</li>
<li>Bao, H., Song, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treating+brain+disorders+by+targeting+adult+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Treating brain disorders by targeting adult neural stem cells.</a> Trends Mol Med. 24 (12), 991-1006 (2018).</li>
<li>Ghibaudi, M., Zanone, A., Bonfanti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+structural+plasticity+in+large-brained+mammals%3A+not+only+narrowing+roads%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Brain structural plasticity in large-brained mammals: not only narrowing roads.</a> Neural Regen Res. 21 (5), 1669-1680 (2026).</li>
<li>Bonfanti, L., La Rosa, C., Ghibaudi, M., Sherwood, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+neurogenesis+and+%26%2334%3Bimmature%26%2334%3B+neurons+in+mammals%3A+an+evolutionary+tradeoff+in+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">Adult neurogenesis and &#34;immature&#34; neurons in mammals: an evolutionary tradeoff in plasticity.</a> Brain Struct Funct. 229 (8), 1775-1793 (2024).</li>
<li>Paredes, M. F., Sorrells, S. F., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+size+and+limits+to+adult+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Brain size and limits to adult neurogenesis.</a> J Comp Neurol. 524 (3), 646-664 (2016).</li>
<li>Parolisi, R., Cozzi, B., Bonfanti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humans+and+dolphins%3A+decline+and+fall+of+adult+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Humans and dolphins: decline and fall of adult neurogenesis.</a> Front Neurosci. 12, 497(2018).</li>
<li>Snyder, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recalibrating+the+relevance+of+adult+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Recalibrating the relevance of adult neurogenesis.</a> Trends Neurosci. 42 (3), 164-178 (2019).</li>
<li>Bonfanti, L., Charvet, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+plasticity+in+humans+and+model+systems%3A+advances%2C+challenges%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Brain plasticity in humans and model systems: advances, challenges, and future directions.</a> Int J Mol Sci. 22 (17), 9358(2021).</li>
<li>Duque, A., Arellano, J. I., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+assessment+of+the+existence+of+adult+neurogenesis+in+humans+and+value+of+its+rodent+models+for+neuropsychiatric+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">An assessment of the existence of adult neurogenesis in humans and value of its rodent models for neuropsychiatric diseases.</a> Mol Psychiatry. 27, 377-382 (2022).</li>
<li>Gómez-Climent, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+population+of+prenatally+generated+cells+in+the+rat+paleocortex+maintains+an+immature+neuronal+phenotype+into+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">A population of prenatally generated cells in the rat paleocortex maintains an immature neuronal phenotype into adulthood.</a> Cereb Cortex. 18 (10), 2229-2240 (2008).</li>
<li>Rotheneichner, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+plasticity+in+the+adult+murine+piriform+cortex%3A+continuous+maturation+of+dormant+precursors+into+excitatory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">Cellular plasticity in the adult murine piriform cortex: continuous maturation of dormant precursors into excitatory neurons.</a> Cereb Cortex. 28 (7), 2610-2621 (2018).</li>
<li>Sorrells, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immature+excitatory+neurons+develop+during+adolescence+in+the+human+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Immature excitatory neurons develop during adolescence in the human amygdala.</a> Nat Commun. 10 (1), 2748(2019).</li>
<li>La Rosa, C., Parolisi, R., Bonfanti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((structural+plasticity%3A+from+adult+neurogenesis+to+immature+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">structural plasticity: from adult neurogenesis to immature neurons.</a> Front Neurosci. 14, 75(2020).</li>
<li>Bonfanti, L., Seki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PSA-NCAM-positive+%26%2334%3Bimmature%26%2334%3B+neurons%3A+an+old+discovery+providing+new+vistas+on+brain+structural+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The PSA-NCAM-positive &#34;immature&#34; neurons: an old discovery providing new vistas on brain structural plasticity.</a> Cells. 10 (10), 2542(2021).</li>
<li>Benedetti, B., Couillard-Després, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+would+the+brain+need+dormant+neuronal+precursors%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Why would the brain need dormant neuronal precursors.</a> Front Neurosci. 16, 877167(2022).</li>
<li>Luzzati, F., Bonfanti, L., Fasolo, A., Peretto, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DCX+and+PSA-NCAM+expression+identifies+a+population+of+neurons+preferentially+distributed+in+associative+areas+of+different+pallial+derivatives+and+vertebrate+species%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">DCX and PSA-NCAM expression identifies a population of neurons preferentially distributed in associative areas of different pallial derivatives and vertebrate species.</a> Cereb Cortex. 19 (5), 1028-1041 (2009).</li>
<li>Palazzo, O., La Rosa, C., Piumatti, M., Bonfanti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+large+brains+of+long-living+mammals+prefer+non-newly+generated%2C+immature+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Do large brains of long-living mammals prefer non-newly generated, immature neurons.</a> Neural Regen Res. 13 (4), 633-634 (2018).</li>
<li>La Rosa, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetic+variation+in+cortical+layer+II+immature+neuron+reservoir+of+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Phylogenetic variation in cortical layer II immature neuron reservoir of mammals.</a> Elife. 9, e55456(2020).</li>
<li>Sherwood, C. C., Gómez-Robles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+plasticity+and+human+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Anthropol%22%5BJournal%5D)">Brain plasticity and human evolution.</a> Annu Rev Anthropol. 46, 399-419 (2017).</li>
<li>Piumatti, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-newly+generated%2C+%26%2334%3Bimmature%26%2334%3B+neurons+in+the+sheep+brain+are+not+restricted+to+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Non-newly generated, &#34;immature&#34; neurons in the sheep brain are not restricted to cerebral cortex.</a> J Neurosci. 38 (4), 826-842 (2018).</li>
<li>Pattaro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetic+variation+of+layer+II+cortical+immature+neurons+in+dog+and+horse+confirms+covariance+with+brain+size+and+neocortical+surface%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">Phylogenetic variation of layer II cortical immature neurons in dog and horse confirms covariance with brain size and neocortical surface.</a> Brain Struct Funct. 230 (6), 115(2025).</li>
<li>Ghibaudi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consistency+and+variation+in+doublecortin+and+Ki67+antigen+detection+in+the+brain+tissue+of+different+mammals%2C+including+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Consistency and variation in doublecortin and Ki67 antigen detection in the brain tissue of different mammals, including humans.</a> Int J Mol Sci. 24 (3), 2514(2023).</li>
<li>Ben Abdallah, N. M., Slomianka, L., Vyssotski, A. L., Lipp, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+age-related+changes+in+adult+hippocampal+neurogenesis+in+C57+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Early age-related changes in adult hippocampal neurogenesis in C57 mice.</a> Neurobiol Aging. 31, 151-161 (2010).</li>
<li>Ghibaudi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+layer+II+immature+neurons+of+the+murine+piriform+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in layer II immature neurons of the murine piriform cortex.</a> Front Cell Neurosci. 17, 1205173(2023).</li>
<li>Workman, A. D., Charvet, C. J., Clancy, B., Darlington, R. B., Finlay, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+transformations+of+neurodevelopmental+sequences+across+mammalian+species%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Modeling transformations of neurodevelopmental sequences across mammalian species.</a> J Neurosci. 33 (17), 7368-7383 (2013).</li>
<li>Charvet, C. J., de Sousa, A. A., Vassilopoulos, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+time%3A+challenges%2C+progress%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Translating time: challenges, progress, and future directions.</a> Brain Res Bull. 221, 111212(2025).</li>
<li>Bartges, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAHA+canine+life+stage+guidelines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Anim+Hosp+Assoc%22%5BJournal%5D)">AAHA canine life stage guidelines.</a> J Am Anim Hosp Assoc. 48, 1-11 (2012).</li>
<li>Ghibaudi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multispecies+characterization+of+immature+neurons+in+the+mammalian+amygdala+reveals+their+expansion+in+primates%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Multispecies characterization of immature neurons in the mammalian amygdala reveals their expansion in primates.</a> PLoS Biol. 23 (8), e3003322(2025).</li>
<li>Ghibaudi, M., Boda, E., Bonfanti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+mice+to+humans%3A+a+need+for+comparable+results+in+mammalian+neuroplasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">From mice to humans: a need for comparable results in mammalian neuroplasticity.</a> Neural Regen Res. 20 (2), 464-466 (2025).</li>
<li>Smulders, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relevance+of+brain+evolution+for+the+biomedical+sciences%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Lett%22%5BJournal%5D)">The relevance of brain evolution for the biomedical sciences.</a> Biol Lett. 5, 138-140 (2009).</li>
<li>Keck, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+theory+and+experiment+in+%28statistical%29+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Bridging theory and experiment in (statistical) learning.</a> Curr Opin Neurobiol. 94, 103106(2025).</li>
</ol>

Sinirbilim araştırmaları, sonuçları insanlara aktarmak için büyük ölçüde akraba evliliği yapmış fareler ve fareler kullanır. Moleküler, hücresel ve hatta anatomik benzerliklere rağmen, önemli türler arası farklılıklar da mevcuttur ve bu da preklinik verilerin yorumlanması içinyanıltıcı olabilir 1,2. Karşılaştırmalı çalışmalar gerekse de, büyük beyinler söz konusu olduğunda teknik ve pratik zorluklar nedeniyle engellenirler (örneğin, farelerde ortalama 0,5 g'den insanlarda 1300 g'a kadar; Şekil 1A). Ayrıca, farklı laboratuvarların heterojen deneysel yaklaşımları, özellikle nicel analizler gibi sonuçların karşılaştırmasını sınırlayabilir ve bazen tartışmalara yol açabilir. Bu, beyin yapısal plastisitesi örneğidir; özellikle nörojenik süreçler 3,4,5 ile ilgili, gelişimsel nöroplastisite ve beyinonarımını anlamak için ilgi çekici bir konu olan 6,4,5.
Beyin plastisitesi alanındaki son keşifler, evrim sırasında farklı nörojenik süreçlerin meydana gelmesi, hızı ve anatomik konumunda önemli farklılıklar ortaya çıktığını güçlü bir şekildegöstermektedir 8. Buna örnek olarak, kök hücre kaynaklı nörogenezin laboratuvar kemirgenlerine kıyasla büyük beyinli yetişkinmemelilerde görülen belirgin azalması verilebilir 5,9,10; bu durum, muhtemelen beyin bölgelerinin farklı genişlemesiyle ve ekolojik baskılara uyum işlevi ile bağlantılıdır 7,8 ve farklı nörogelişimsel zamansüreçleriyle 11,12. Nörogenezin hızı fareler ve insanlar arasında dikkat çekici şekilde farklılık gösteriyor ve bu da çeviri13 sorununu gündeme getiriyor.
Öte yandan, durgun olgunlaşmada tıkanmış nöronlarla temsil edilen yeni bir "bölünmesiz nörogenez" türü (olgunlaşmamış veya uykuda olan nöronlar 14,15,16,17,18,19) küçük beyinlilerden büyük beyinli türlere doğru arttığı varsayılmıştır 20,21. İlginç bir şekilde, kök hücreden bağımsız olgun olmayan nöron popülasyonu, beyin korteksinde (gyrensefalik türlerde yüksek dereceli bilişin bir alanı22,23) ve çoğunlukla koku alma ve mekânsal navigasyonla bağlantılı olan kanonik nörojenik sitelerden uzakta yer alır ve lissensefaliktürlerde büyük öneme sahiptir 7,8. Beyin yapıları ve memeli türleri arasındaki bu farklılıklar, sadece karşılaştırmalı ilginin ötesine geçer; çünkü fare ve insanlarda plastisitenin potansiyelini değiştirerek çeviri açısından önemli olabilirler. Bu nedenlerle, farklılıkların çok farklı memeliler arasında ne ölçüde filogenetik bir varyasyon temsil ettiğini "karşılaştırılabilir şekilde" değerlendirmek, özellikle laboratuvar kemirgenleri ve primatlara atıfta bulunmak önemlidir.
Beyin boyutu, girensefali ve sosyoekolojik niş 22,24,25 bakımından oldukça farklılık gösteren memelilerde katman II kortikal olgunlaşmamış nöron (cIN) popülasyonunun türler arası varyasyonunu incelemek için yakın zamanda kurulan bir yaklaşım tanımlanmıştır. Bu yöntem üç ilkeye dayanır: i) aynı prosedürlerle paralel olarak işlenecek birkaç (çeşitli) memeli türünü düşünmek; ii) çok farklı beyinlerde tam olarak standartlaştırılamayan değişkenleri en aza indirmeyi (fiksasyon prosedürü, ölüm sonrası aralık, yaş) ve immünositokimya için antikorların tür-özgüllüğünü, incelenen hücre popülasyonunun yaygın ortak özelliklerini iç pozitif kontroller olarak kullanarak ele almak; ve iii) farklı türlerin karşılık gelen beyin seviyelerinde hücre sayımı yapmak için referans noktası olarak karşılık gelen anatomik yapıları oluşturmak (Şekil 1B ve Şekil 2). İyi bilinen işaretleyici çift kortin (DCX15,17,26) ile tanımlanan hücrelerin sayılması yoluyla elde edilen veriler (örneğin, hücre yoğunlukları), filogenetik ağaçlara eşlenebilir ve evrimsel desenler ortaya çıkarılabilir ve beyin boyutu, gyrensefali ve kortikal yüzey alanı gibi farklı parametrelerle kovaryans açısından analiz edilir.
<img alt="Şekil 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69446/69446fig1.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 1"> 
Şekil 1: Kortikal mantoda cIN dağılımı ve miktarının değerlendirilmesi için çok farklı memeli beyinlerinin işlenmesi. (A) Farklı türlere ve takımlara ait memeliler, beyin boyutları ve girenekefaliyi ile kortikal genişleme dereceleriyle karakterize edilir. BioRender lisansıyla yeniden üretilen beyin ikonları. (B) Beyinlerden çok farklı boyutlarda ve kortikal manto uzantısında kesilmiş temsil Toluidin mavisi boyalı koronal kesitler. Histolojik olarak boyanmış seri kesitler (kriyost kesimi, koronal, 40 μm kalınlığında) her hayvan türünün ana nöroanatomik yapılarını tanımlamak için kullanılır ( bkz. Şekil 3); Beyin boyutu ve kortikal çevresindeki dikkat çekici farklılıklara dikkat edin. Panel A'daki hayvan ikonları, La Rosa ve ark.22'nin izniyle çoğaltıldı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69446/69446fig1large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Son olarak, tüm plastik süreçler genellikle27,28 yaş arttıkça kademeli bir azalma geçirdiğinden, karşılaştırmalı nöroplastislikte bir diğer konu da bu indirgenin farklı zaman süreçlerini değerlendirmektir; bu durum, memeliler arasında nörogelişimsel süreçlerin farklı zaman süreçleriyle ilişkiliolabilir 12,29,30 . Aslında, hızlı olgunlaşan (fare) ile yavaş olgunlaşan türlerin (primatlar) varlığı, biyomedikal bilimlerdeki zorlukları çözmede en yaygın model sistemi olan laboratuvar faresinin sınırlı olmasının bir diğer nedenidir. Burada açıklanan yöntem, her türün yaşam süresi boyunca farklı yaşlardaki hücre popülasyonlarını değerlendirmek ve ardından türler arasındaki eğilimleri karşılaştırmak için de faydalı olabilir. cIN yoğunluğundaki filogenetik varyasyon ve yaşlar boyunca kalıcılıklarındaki farklılıklar, küçük beyinli ve büyük beyinli memelilerarasında tespit edilmiştir 22,28.

<table><tbody><tr><td>%10 formalin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>2-metilbutan&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320404</td><td>İzopentan</td></tr><tr><td>3,3&prime;-Diaminobenzidin tetrahidroklorür hidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5637</td><td></td></tr><tr><td>%4 paraformaldehit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>441244</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serum Albümini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Limon asit&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>C0759</td><td></td></tr><tr><td>Histoloji için DPX mountant</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; 06522</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Merck</td><td>1.00983</td><td></td></tr><tr><td>Etilen glikol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>102466</td><td></td></tr><tr><td>Gliserol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G7893</td><td></td></tr><tr><td>Hidrojen peroksit çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>Killik - O.C.T. Yerleşkesi</td><td>Biyo-optika</td><td>&nbsp; 05-9801</td><td></td></tr><tr><td>Mesquite yazılımı</td><td>Mesquite Projesi</td><td>Mesquite sürüm 3.81 (build 955)</td><td></td></tr><tr><td>Neo-mount</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1.09016</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu (PB)</td><td>na</td><td>na</td><td>Özel yapım</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu tuzlu (PBS)</td><td>na</td><td>na</td><td>Özel yapım</td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit</td><td>Riedel-de Haen</td><td>6213</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum fosfat dibazi dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71645</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum fosfat monobazik dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71500</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td>Toluidin Mavisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>89640</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td></td></tr><tr><td>VECTASTAIN Elite ABC-HRP Kit Peroksidaz (Standart)</td><td>Vektör Laboratuvarları</td><td>PK-6100</td><td></td></tr><tr><td>Xylol&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>247642</td><td></td></tr></tbody></table>

farklı memeli beyinlerinde nicel hücre sayımı Çalışmaları İçin karşılaştırmalı yaklaşım

A Comparative Approach for Quantitative Cell Counting Studies in Widely Different Mammalian Brains

İncelenen tüm türlerin beyin korteksindeki DCX+ hücreleri, iyi korunmuş bir nöronlu popülasyonun varlığını gösteren bir dizi özelliği tutarlı şekilde paylaşır (Şekil 4A). Kısacası, bunlar: (i) topografik olarak kortikal katman II boyunca bir monokatman oluşturacak şekilde düzenlenmiştir; (ii) olgunlaşmamış nöronlarda farklı olgunlaşma evreleri için tanımlanan morfolojik alt tipleri göstermek, (a) küçük, unipolar/bipolar hücrelerin büyük yaygınlığı ve piramidal nöronları andıran karmaşık dend...

Farklı Memeli Beyinlerinde Nicel Hücre Sayımı Çalışmaları İçin Karşılaştırmalı Yaklaşım

Most neurobiological studies are conducted on laboratory rodents. Despite many similarities across mammalian brains, important differences also exist, ...

Beyin yapısal plastisitesinin memeliler arasında belirgin şekilde farklı olabileceği keşfedilmiştir. Bu nedenle, sistematik nicel analizin ortaya çıkması gerekiyordu. Oldukça farklı beyinlerin sistematik analizi, filogenetik bağlamda karşılaştırılabilir sonuçlar verebilir.Başlamak için, 20 derece Santigras soğudolabından serbest yüzen beyin bölümlerini içeren 12 kuyuyla bir tabak alın ve bazı dilimleri PBS çözeltisiyle dolu bir Petri kabına çıkarın. Bölümleri seçin ve bir slayta yerleştirin. Kesitler histolojik olarak boyandıktan sonra, belirli nöroanatomik özelliklere göre beyin seviyeleri belirlenir.Aynı sayıda 40 mikrometre kalınlığında seri kesitler kullanarak 1'den 4'e kadar seviyelere ayırın, her beyin seviyesinden eşit aralıklı üç koronal kesit seçin ve immünohistokimyasal boyama yapın. İş istasyonundaki Neurolucida yazılımını açın ve slaytı mikroskop altına yerleştirin, hücre sayımı için seçilen hedefi kullanın. Düşük büyütmede, yazılımın İz menüsündeki serbest el kontur çizgisi aracıyla kortikal katman 2'yi kontur çizin.Çevreyi takip ederek hem paleokorteks hem de neokorteksi kapsayan kortikal katman 2'nin uzunluğunu elde edin. Belirticiler araç çubuğundan hücre sayımı için tercih edilen sembolleri seçin. İlgi alanındaki bölgede 3 ila 9 mikrometre arasında değişen soma çapı olan ve bipolar şekilli küçük bir soma ile tanımlanan Tip 1 hücreleri sayın.Karmaşık dendritik arborizasyona sahip daha büyük bir soma ile tanımlanan Tip 2 hücreleri sayın, soma çapı 9 ila 18 mikrometre arasında değişir. Şimdi, paleokorteks ve neokorteks verilerinin birleştirilmesiyle elde edilen paleokorteks, neokorteks ve beyin korteksinden filogenetik analiz için verileri toplayın. Kortikal katman 2 çevresini milimetre cinsinden ölçülüp kontur ölçüm araç çubuğunda görünen bir tablo dosyasına toplayın.Aynı tabloda, işaretçiler araç çubuğunda görünen Tip 1 ve Tip 2 hücrelerinin sayısını toplayın. Her beyin, bölge ve beyin seviyesi için Tip 1 ve Tip 2 hücreler ekleyerek toplam hücre sayısını hesaplayın ve kaydedin; her seviye için üç bölüm kullanılarak, her örnek için toplam 12 bölüm elde edin. Toplanan değerleri, her bölgedeki her bölüm için doğrusal hücre yoğunluğunu hesaplamak için hücre sayısını çevreye milimetre cinsinden bölerek hesaplayın.Tip 1 veya Tip 2 hücre sayısını toplam hücre sayısına bölerek ve 100 ile çarparak Tip 1 ve Tip 2 hücrelerin yüzdesini hesaplayın. Sonra, her örnekte Tip 1 ve Tip 2 hücrelerinin yüzdesini formül kullanarak hesaplayın. Tür başına değerlendirilen dört örnek arasında bu yüzdelerin ortalama değerini elektronik tablodaki ortalama fonksiyonu kullanarak elde edin.Filogenetik analizler yapmak için doğrusal hücre yoğunluğunu kullanın ve her koronal kesitte sayılan toplam hücreleri kullanarak yarımküre başına olgun olmayan nöron sayısını tahmin edin. Tablodaki medyan fonksiyonu kullanılarak örnek başına ele alınan 12 bölümün yoğunluk medyan değerini hesaplayın. Medyayı merkezi ölçü olarak kullanın çünkü grup başına olan örneklem nispeten küçüktür ve bazı gruplar asimetrik dağılımlar sergiler.Neurolucida yazılımındaki serbest el kontur aracını kullanarak ana eksene dik olarak soma çapı boyunca bir çizgi çizebilirsiniz. Her türde her iki türden en az 100 rastgele seçilmiş DCX pozitif hücresini, her beyin bölgesinde örnek başına 25 hücre kullanılarak ölçün; böylece Tip 1 ve Tip 2 hücreler için soma çapı aralığı elde edilsin. Şimdi, analiz edilen türlerin bilimsel isimlerini kullanarak not defterinde bir liste oluşturun.Listeyi timetree web sitesine yükleyin. Org ve NWK dosyası olarak dışa aktarılıyor. Mesquite Project Software'de NWK dosyasını yükleyin, verileri entegre edin ve ortaya çıkan dosyayı PDF dosyası olarak kaydedin.Son olarak, daha önce oluşturulan veri sayfasında, her tür için beyin boyutunu içeren bir sütun ekleyin. DCX pozitif hücre yoğunluklarının doğal logaritmasını ve beyin boyutunun doğal logaritmasını hesaplayın. Seçilen istatistiksel yazılımda istatistiksel analiz yapın ve elde edilen dosyaları indirin.Kalıntıları veri sayfasında yeni bir sütuna girerek bir kalıntı grafik oluşturulabilir. İncelenen tüm türlerin beyin korteksinde DCX pozitif hücreler, kortikal katman 2 boyunca topografik bir düzen oluşturan bir topografik düzen gösterdi; bu katman ağırlıklı olarak küçük, unipolar veya bipolar hücreleri ve büyük kompleks hücrelerin az bir kısmını içeriyordu. Hücreler, Ki67 ekspresyonundan yoksun iken PSAN-NCAM ve DCX'i birlikte eksprese etti.Ve NeuN'ı ifade eden karmaşık hücrelerden oluşan bir alt popülasyonu içeriyordu. Kortikal olgunlaşmamış nöronların doğrusal yoğunluğu türler arasında büyük farklılıklar gösteriyordu. Filogenetik karşılaştırmalı analizler, Laurasiatheria grubunun kortikal olgunlaşmamış nöronların Euarchontoglires'e göre daha yüksek yoğunluğuna sahip olduğunu göstermiştir.Kortikal olgunlaşmamış nöron yoğunluğu ile beyin hacmi arasında güçlü bir kovaryans gözlemlendi. Ve kortikal olgunlaşmamış nöron yoğunluğu ile neokortikal katman 2 çevresi arasında. Bulgularımız, farklı plastisite türleri ve farklı beyin bölgeleri arasındaki evrimsel ödünleşmeleri ortaya koyabilir.

a-comparative-approach-for-quantitative-cell-counting-studies-widely

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Primat beynin anatomik organizasyonu, insanlarda normal ve patolojik durumları önemli bilgiler sağlayabilir. Hakkında tarafsız stereology, doğru ve etkin bir biçimde, belirli bir referans alanı toplam nöron numarası (veya başka bir hücre tipi) tahmin etmek için bir...

Sigara insan Primate Beyin | Stereology: sayar ne bilmek

Karşılaştırmalı tür yaklaşım davranışsal sinirbilimciler, belirli bir hayvan modelinin karakteristik olarak görülmelidir özel davranışları ile ilgili çeşitli nörobiyolojik faktörler keşfetmek için izin verir. Yakından ilgili türler arasındaki davranış farklılıkları doğal olarak meydana gelen yararlanarak, bu tekniği invaziv tekniklerin davranış ifade işlemek için gerekli değildir.

Baba Yanıtları Nörobiyoloji incelenmesi Karşılaştırmalı Türlerin Yaklaşım

Kaynak: Olesen, M. V.,  et al. Elektrokonvülsif Tedavinin Bir Sıçan Modelinde Hücre Sayılarını Tahmin Etmek için Optik Fraksiyonlayıcı Tekniği. J. Vis. Uzm.  (2017).  Video, beyin dokusunda yeni üretilen nöronları ölçme tekniğini göstermektedir. Bromodeoksiüridin (BrdU) işaretli nöronları içeren hipokampal doku dilimleri, immünohistokimya kullanılarak boyandı ve daha sonra optik fraksiyonatör tekniği kullanılarak doku kalınlığı boyunca ölçüldü.

Sıçan Beyin Dokusunda Yeni Üretilen Nöronların Optik Fraksiyonatör Tekniği Kullanılarak Ölçülmesi

Burada, elektrokonvülsif uyarımı takiben sıçan hipokampusunda, yeni nöronların oluşumunu ve canlılığını ölçmek için kullanılan bir optik fraktatör olan stereolojik bir yöntemi sunuyoruz. Doğru şekilde uygulandığında, stereolojik yöntemlerin duyarlılığı ve verimliliği, sabit ve önceden belirlenmiş bir hassaslıkla doğru tahminler sağlar.

Elektrokonvülsif Terapi Sıçan Modelinde Hücre Sayılarını Tahmin Etmek İçin Optik Fraksiyonlama Tekniği

Burada biz bir doku takas, floresan etiketleme ve büyük ölçekli görüntüleme sağlayan, böylece, görselleştirme yeni korteksimiz hücre tiplerinin üç boyutlu kuruluşun fare beyin dokusunun açıklayınız.

Hücresel Örgütü fare yeni korteksimiz yılında büyük ölçekli üç boyutlu görüntüleme

Bu makalede küçük hayvan beyin mikro-CT görüntüleme, hangi lezyonlar sayılabilir ve tüm beyin bağlamında yüksek hassasiyetle yer alan elektrotlar hazırlamak için basit bir yöntem.

Lezyonlar karakterize ve küçük hayvan beyinlerinde elektrot bulmak için bir mikro-CT-esaslı Yöntem

Burada, bir sinaptik protein ayirt boyama kullanarak işaret protein, confocal mikroskobu ve bilgisayar tabanlı analiz göre dağılımını belirlemek için nicel bir yaklaşım açıklar.

Türdeş olmayan dağıtım ayirt kullanarak fare beynindeki bir sinaptik protein miktarının

Fare beyninin çıkarılması ve taze beyin dokusundan ayrı bölgelerin diseksiyonu için uygulamalı, adım adım, hızlı bir protokol sunuyoruz. Moleküler analiz için beyin bölgelerinin elde edilmesi birçok sinirbilim laboratuvarında rutin hale gelmiştir. Bu beyin bölgeleri, sistem seviyesi analizi için yüksek kaliteli transkriptomik veriler elde etmek için hemen dondurulur.

Fare Beyninin İşlevsel ve Anatomik Olarak Farklı Bölgelere Mikrodiseksiyonu

Burada sıçan substantia nigra pars compacta dopaminerjik nöron sayısının yarı nicel belirlenmesi için otomatik bir yöntem sunuyoruz.

Otomatik Görüntü Analizi Kullanılarak Kemirgen Modellerinin Substantia Nigra'sında Dopaminerjik Nöron Yoğunluğunun Yarı Nicel Belirlenmesi

Bu protokol, iDISCO + kullanarak bozulmamış fare beyinlerinin manyetik rezonans görüntüleme, temizleme ve immünoetiketleme yöntemlerini açıklar, ardından ışık tabakası mikroskobu kullanılarak görüntülemenin ayrıntılı bir açıklaması ve NuMorph kullanılarak aşağı akış analizleri yapılır.

Tüm Beyin Tek Hücreli Görüntüleme ve MRG, Doku Temizleme ve Işık Tabakası Mikroskobu Kullanarak Bozulmamış Yenidoğan Fare Beyinlerinin Analizi

Seri iki fotonlu tomografi (STPT) görüntüleme, iki fotonlu görüntülemeyi otomatik evre kontrolü ve mikrotom dilimleme ile birleştirerek bir doku kütlesini üç boyutlu şeklinde görüntülemek için kullanılan bir tekniktir. Burada, marmoset beyinlerinin yapısal özelliklerini daha iyi anlamaları için bunu uygulamak için bir protokol açıklıyoruz.

Nöroanatomik Analizler için Tüm Marmoset Beyninin Seri İki Fotonlu Tomografisi

Öğrenin, farklı memeli türlerindeki nöronal popülasyon farklılıklarını karşılaştırmalı analizle incelemeyi. Bu yöntem, evrimsel örüntüleri ortaya çıkarmak ve büyük beyinli memelilerdeki teknik zorlukları aşmak için araştırmacılara çerçeve sunar.

Farklı Memeli Beyinlerinde Nicel Hücre Sayımı Çalışmaları İçin Karşılaştırmalı Yaklaşım

Daha fazla video keşfet