30 Aralık 2025
Bu çalışma, ferrik klorür ile indüklenen superior sagital sinüs trombozunun tekrarlanabilir, minimal invaziv bir fare modeli oluşturmak için bir protokol sunmaktadır; bu yöntem, lazer benek kontrast görüntüleme ve yüksek çözünürlüklü ultrasonla birlikte ipek-dikiş yöntemi kullanılarak değerlendirilmektedir.
Alanımızda, superior sagital sinüs trombozu için çeşitli modelleme yöntemleri kullanılmaktadır. Ancak, ferrik klorür indüksiyon yöntemi, basitliği ve düşük maliyeti nedeniyle yaygın olarak kullanılmaktadır. Ferrik klorür kaynaklı superior sagittal sinüs trombozu modelini kortikal hasarı azaltarak ve sinüs trombusunu görselleştirerek geliştirmeyi hedefliyoruz.
Başlangıç için, anestezi altındaki bir farenin her iki gözüne oftalmik merhem uygulayın ve saç derisi tüylerini dikkatlice tıraş edin. Sonra, fareyi kemirgen ameliyat platformunda yatağa yatan pozisyonda tıbbi bant ile sabitleyin. Isıtıcı pedle vücut sıcaklığını yaklaşık 37 derece Celsius civarında tutun.
Tıraş edilmiş saç derisini %5 povidon-iyot ve %75 alkol ile iyice dezenfekte edin ve her biri üç kez tekrarlayın. Anestezik derinliği parmak sıkıştırma refleksiyle doğrulandıktan sonra, saç derisinde 15 milimetrelik perimedian bir cilt kesisi yapın. Küt diseksiyon yöntemiyle alttaki fasya ve periostumu ayırarak kafatası tamamen ortaya çıkar.
Kafatası, lambda'dan başlayıp sagittal dikiş boyunca öne doğru 10 milimetre uzanana kadar kafatasını bir kranial matkap ile inceltin. Alttaki dura mater ve üst sagital sinüse zarar vermemek için aralıklı bir sondaj tekniği kullanın ve kortekste termal hasarı önlemek için sondaj ucunu normal tuzlu suyla tekrar tekrar sulanın. Temel koşullar görüntülendikten sonra, açıkta olan üst sagittal sinüs yüzeyine %40 ferrik klorür çözeltisi ile ıslatılmış 10 milimetrelik 2-0 ipek dikiş segmentini beş dakika boyunca uygulayın.
Dikişi yeni ıslatılmış bir segmentle değiştirin ve beş dakika daha uygulayın. Sonra, cerrahi alanı 0,5 mililitre normal salin ile üç kez durulayarak kalan ferrik klorürü çıkarın. Deriyi 4-0 ipek dikişle kesintili dikişlerle kapatın ve bölgeyi povidon-iyot ile dezenfekte edin.
Fareyi tamamen uyanana kadar gözlemleyin, sonra kafesine geri götürün. Lazer lek kontrast görüntüleme sistemini ve ilgili yazılımı olan RF LSI versiyon beşi açın. Canlı görüntülemeyi etkinleştirmek için çevrimiçi mod düğmesine basın.
Gösterge lazeri görüş alanında merkezlenene kadar aletin yüksekliğini ve konumunu ayarlayın. Fareyi köpük bir platforma yerleştirin ve üst sagital sinüs gösterge lazeriyle hizalanana kadar konumunu ayarlayın. Görüntü net görünene kadar büyütmeyi ve odaklamayı ayarlayın.
Pseudocolor eşiğinin alt ve üst sınırlarını ayarlayarak sözde renkli görüntünün görsel görünümünü optimize edin. Üst sagital sinüs üzerinde dairesel bir yatırım getirisi oluşturun, venöz akışı kaydedin ve orijinal ile pseudocolor görüntüleri kaydedin. İzofluran, ultrason jeli, tek kullanımlık jilet bıçakları, tıbbi bantlar hazırlayın ve gerekli tüm aletleri kontrol edin.
Üç boyutlu alım motorunu görüntüleme sistemine takın. Sonra, UHF 57X dönüştürücüsünü takın ve motoru başlatın. Fareyi anestezi ettikten sonra, termostat görüntüleme plakasına 37 derece Celsius ayarlanmış pozisyona yerleştirin ve başını ve uzuvlarını tıbbi bantlarla nazikçe sabitleyin.
Açıkta kalan saç derisine ultrason jeli eşit şekilde uygulayın. Farenin konumunu ve yönünü transdüsere göre ayarlayın; ta ki üst sagital sinüs ve intraluminal trombus net şekilde görselleştirilsin. Sagittal düzlemdeki üst sagital sinüsün ardışık tomografik görüntülerini B modunda 0,04 milimetre adım boyutunda üç boyutlu görüntüleme ile alın, ardından aynı ayarlarla koronal düzlemde tomografik görüntüler alın.
Superior sagital sinüsteki kan akışını gözlemlemek için renk Doppler modunu kullanın ve kan akışı hızını ölçmek için darbeli dalga Doppler modunu uygulayın. Anestezi bırakın ve sıçan tamamen uyanana kadar gözlemleyin. Sonra fareyi kafesine geri götürün.
Son olarak, elde edilen görüntüleri dışa aktarın ve Vevo LAB yazılımı ile analiz edin. Üst sagital sinüsteki maksimum sagital ve koronal kesit alanlarını, trombüsün hacmini ve sinüsün maksimum kan akış hızını kaydedin. Ferrik klorürün lokal uygulamasından sonra, lazer lek kontrast görüntüleme, üst sagital sinüste başlangıç seviyesine kıyasla yerel kan akışında anlamlı bir azalma tespit etti.
Ameliyat sonrası yedinci günde, küçük hayvan ultrasonu superior sagital sinüste tromb oluşumunu kısmi luminal rekanalizasyon ile doğruladı. Darbe dalgalı Doppler ultrasonu, superior sagital sinüsün kalıntı lümeninde ölçülebilir kan akışı hızı gösterdi. Üç boyutlu ultrason görüntüleme, 0,04 milimetre kalınlığında seri görüntü dilimleri kullanılarak superior sagital sinüs trombusunun hacimsel ölçümü mümkün kıldı.
Geliştirilmiş modelimiz daha az invazivci ve ultrason görüntüleme ile daha uyumludur; böylece daha güvenilir, doğrudan terapötik geliştirme ve değerlendirme mümkün olur. Etkileşimli lazer benek kontrast görüntülemenin modelin başarısını doğruladığından emin olun ve ameliyat sonrası yüksek çözünürlüklü ultrason trombus oluşumu, lizisi ve lümen yeniden kanalizasyonunu dinamik olarak izler.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, FeCl3 emdirilmiş sütür tekniği kullanılarak geliştirilmiş, üst sagital sinüs (SSS) trombozu için rafine bir sıçan modelini sunmaktadır. Protokol, kortikal hasarı minimize etmekte ve görüntüleme yöntemleriyle uyumluluğu artırarak, serebral venöz trombozun (CVT) incelenmesi ve potansiyel tedavilerin değerlendirilmesi için tekrarlanabilir ve minimal invaziv bir platform sağlamaktadır.
Serebral venöz trombozun (CVT) güvenilir preklinik modelleri, nörovasküler ilaç keşfinde translasyonel araştırmalar ve terapötik değerlendirmeler için temel teşkil eder. Modifiye FeCl3-indüklü süperior sagital sinüs trombozu modeli; tekrarlanabilir, minimal invaziv ve görüntüleme ile uyumlu çalışmalara olanak tanıyarak, erken evre hedef validasyonu ve mekanistik risk azaltma süreçlerinde öngörüsel güvenilirliği destekler. Bu platform, trombus oluşumu ve rekanalizasyon üzerine kantitatif, boylamsal veriler sağlayarak portföy karar verme süreçlerini güçlendirir.
Bu model, erken dönem mekanistik çalışmalar ile nörovasküler endikasyonlar için translasyonel etkinlik değerlendirmesi arasında köprü kurarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürekliliğe entegre olur.