LC-mate kullanarak otomatik HPLC Ayrımı: Mikro Ölçekli Arıtma İçin Entegre Tekrarlayan Otomatik Numune Alan ve Fraksiyon Toplayıcı

Araştırmamız, HPLC kurulumlarına doğrudan bağlanarak tüm tekrarlayan manuel adımları otomatikleştiren bir cihaz tasarlamaya odaklanıyor. Manuel numune enjeksiyonu ve fraksiyon toplama çok zahmetli. LC-Mate, HPLC örnek arıtması için çapraz platformlu otomatik bir çözüm sunar.

Başlamak için, HPLC sistemi, LC-Mate ve kromatografik kolon arasındaki çözücü tesisat bağlantılarını doğrulayarak doğru akış yollarını kontrol edin. UV dedektörü ile LC-Mate arasındaki sinyal iletim hattının bağlantısını kontrol etmek için, siyah tebloyu kırmızı terminale, beyaz tebloyu ise siyah terminale analog sinyal çıkışının polaritesini eşleştirmek için bağlayın. Analog sinyal dalga formunun göründüğünü doğrulamak için LC-Mate ekranını inceleyin.

Eğer bir dalga formu görünmüyorsa, siyah teli siyah terminale, beyaz teli ise kırmızı terminale bağlayarak kablo bağlantılarını tersine çevirin. Ultraviyole dedektörü ile LC-Mate arasındaki tetik bağlantısını kontrol etmek için, veri kablosunun tek ucunu ultraviyole dedektörün çıkış portuna takın. Kablonun diğer ucundaki siyah ve beyaz kabloları sırasıyla LC-Mate'deki siyah ve mavi tetik terminallerine bağlayın. Stabil bir tetik bağlantısı için terminalleri sıkın.

Sonra, HPLC sisteminin ve LC-Mate'in doğru şekilde açıldığından emin olun. Sistem kendi kendini test programını otomatik olarak çalıştırmak ve anahtar donanım modüllerini başlatmak için arayüzdeki LC Mate simgesine tıklayın. Başlatmanın tamamlandığını doğrulamak için kısa istem sesi ve kendi kendini test eden mesajın kaybolmasını bekleyin.

HPLC ayrım koşullarını yapılandırın ve sütunu dengelemek için eluasyona başlayın. Test arayüzünde, enjeksiyon hacmı, elution süresi ve tekrar sürelerini girin, ardından otomatik örnekleyici, kesri toplayıcı ve HPLC işlemini başlatmak için Start simgesine basın. Çözüm, çalışma süresi, tutma süresi, enjeksiyon hacmi ve ultraviyole dalga boyu dahil olmak üzere uygulanabilir ayırma koşullarını belirleyin.

Parametre ayarı ekranını açmak için arayüzün sol tarafındaki Threshold fonksiyon modülünü seçin. Enjeksiyon hacmı, tekrar süreleri, eşik ve elusiyon süresini girin ve otomatik çalışmaya başlamak için Start tuşuna basın. Durum göstergelerini takip edin.

Örnek tanıtımını doğrulamak için enjeksiyonun devam ettiğini gözlemleyin. Kromatografik ayrımın devam ettiğini doğrulamak için Ayrım Devam Göstergesini kontrol edin. Şırınganın kalıntı sıvıyı ne zaman temizlediğini anlamak için şırınganın boşaltma göstergesine dikkat edin.

Zamana göre kesirleme toplama işlemi yapmak için, arayüzün sol tarafından zamanlama toplama modülünü seçerek parametre menüsünü açın. Giriş enjeksiyon hacmi, tekrar süreleri, elution süresi ve gerekli toplama süreleri. Tekrarlanan otomatik diziyi başlatmak için Start düğmesine basın.

Sonra, arayüzün sol tarafındaki Collect All fonksiyon modülünü seçin. Tüm kromatografik zirveleri ayrı ayrı toplamak için bir koleksiyon eşik değeri ayarlayın. Boru hattı temizliği için, autos-sampler'ın enjeksiyon boru hattını temiz çözücü içeren küçük bir şişeye yerleştirin.

Parametre menüsünü açmak için arayüzün sol tarafından Cleansing modülünü seçin. Sonra enjeksiyon hacmini sıfır ile 1000 arasında ayarlayın ve enjektör boru hattı temizliği için tekrar sürelerini ayarlayın. Enjektör boru hattı temizliğine başlamak için Cleansing Tamamlandı'nın altındaki Cleansing seçeneğine tıklayın.

Tamamlanmış yıkama döngülerini takip etmek için döngü sayısını izleyin. Toplama boru hattı temizliği için temizleme süresini ayarlayın. Koleksiyon boru hattı temizliğine başlamak için Mevcut Boru Hattı'nın altındaki Temizlik seçeneğine tıklayın.

Mevcut boru hattı ekranını izleyerek boru hattı 0'dan 10 boru hattına kadar sıralı temizliği doğrulayın. Her elusiyon döngüsünden sonra kromatografi kaydetmesini sağlamak için otomatik kaydı etkinleştirin. Alternatif olarak, elution'dan sonra Kaydet butonuna tıklayarak verileri manuel olarak kaydedebilirsiniz.

Meta verileri diyalog kutusuna girdikten sonra, yerel depolama, SD kart veya harici evrensel seri veri sürücüsünden depolama yerini seçin. LC-Mate ile yarı preparatif HPLC ayrımı, 2"O-galloyl-hyperoside arındırılması sırasında sürekli ve stabil örnek enjeksiyonu ve fraksiyon toplama sağladı. Küçük safsızlıklar, LC-Mate sistemi kullanılarak saflaştırılmış 2"O-galloyl-hiperozid elde etmek için etkili bir şekilde çıkarıldı.

Sürekli ve stabil örnek enjeksiyonu ve fraksiyon toplama da phloridzin ve trilobatinin arındırılması sırasında başarıyla gerçekleştirilmiştir. LC-Mate sisteminin manuel müdahaleyi büyük ölçüde azaltarak operasyonel verimliliği önemli ölçüde artırdığını göstermektedir. Tam halka enjeksiyon zirve alanının göreli standart sapması %0,813 olup, LC-Mate enjeksiyonlarının mükemmel stabilitesi ve tekrarlanabilirliğini göstermektedir.

Bu sistem, verimli makro ölçekli HPLC iş akışları için otomatik olarak arıtma ve hassas kesirlik toplamayı kolaylaştırır. Doğru sinyal varyantı, doğru mod seçimi ve parametre ayarı, LC-Mate enstrümanının başarılı uygulanması için kritiktir. Daha iyi platformlar arası uyumluluk için kanal kapasitesini artırmayı ve yeni dedektörler entegre etmeyi planlıyoruz.