Name: Digitonin-permeabilize BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde oksidatif fosforilasyon bağlanmasının kolinergik ligand-bağımlı modülasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 14 min 39 s
Description: Öğrenin, BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde digitonin ile seçici permeabilizasyon kullanarak oksidatif fosforilasyon fonksiyonunu değerlendirmeyi. Bu yöntem, farmakolojik modülasyon çalışmalarında mitokondriyal solunumu doğrudan analiz etme olanağı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Yin, Y., Shen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+methods+in+mitochondrial+research+%28review%29%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Common methods in mitochondrial research (review).</a> Int J Mol Med. 50 (4), 148(2022).</li>
<li>Walsh, M. A., Musci, R. V., Jacobs, R. A., Hamilton, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+perspective+on+how+to+develop%2C+implement%2C+execute%2C+and+reproduce+high-resolution+respirometry+experiments%3A+the+physiologist%27s+guide+to+an+Oroboros+O2k%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">A practical perspective on how to develop, implement, execute, and reproduce high-resolution respirometry experiments: the physiologist's guide to an Oroboros O2k.</a> FASEB J. 37 (12), e23280(2023).</li>
<li>Severinghaus, J. W., Astrup, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+blood+gas+analysis.+IV.+Leland+Clark%27s+oxygen+electrode%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Monit%22%5BJournal%5D)">History of blood gas analysis. IV. Leland Clark's oxygen electrode.</a> J Clin Monit. 2 (2), 125-139 (1986).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+pathways+and+respiratory+control%5BTitle%5D)+AND+%22Drug-induced+mitochondrial+dysfunction%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial pathways and respiratory control.</a> Drug-induced mitochondrial dysfunction. , 325-352 (2008).</li>
<li>Chance, B., Williams, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+and+rapid+assay+of+oxidative+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A simple and rapid assay of oxidative phosphorylation.</a> Nature. 175 (4469), 1120-1121 (1955).</li>
<li>Gu, X., Ma, Y., Liu, Y., Wan, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+mitochondrial+respiration+in+adherent+cells+by+Seahorse+XF96+cell+mito+stress+test%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of mitochondrial respiration in adherent cells by Seahorse XF96 cell mito stress test.</a> STAR Protoc. 2 (1), 100245(2021).</li>
<li>Rogers, G. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+throughput+microplate+respiratory+measurements+using+minimal+quantities+of+isolated+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">High throughput microplate respiratory measurements using minimal quantities of isolated mitochondria.</a> PLoS One. 6 (7), e21746(2011).</li>
<li>Subczynski, W. K., Pasenkiewicz-Gierula, M., Widomska, J., Mainali, L., Raguz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+cholesterol%2Flow+cholesterol%3A+effects+in+biological+membranes%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">High cholesterol/low cholesterol: effects in biological membranes: a review.</a> Cell Biochem Biophys. 75 (3-4), 369-385 (2017).</li>
<li>Pesta, D., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+respirometry%3A+OXPHOS+protocols+for+human+cells+and+permeabilized+fibers+from+small+biopsies+of+human+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">High-resolution respirometry: OXPHOS protocols for human cells and permeabilized fibers from small biopsies of human muscle.</a> Methods Mol Biol. 810, 25-58 (2012).</li>
<li>Fan, H. Y., Heerklotz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digitonin+does+not+flip+across+cholesterol-poor+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Colloid+Interface+Sci%22%5BJournal%5D)">Digitonin does not flip across cholesterol-poor membranes.</a> J Colloid Interface Sci. 504, 283-293 (2017).</li>
<li>Sabbir, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+receptor+muscarinic+1+co-localized+with+mitochondria+in+cultured+dorsal+root+ganglion+neurons%2C+and+its+deletion+disrupted+mitochondrial+ultrastructure+in+peripheral+neurons%3A+implications+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">Cholinergic receptor muscarinic 1 co-localized with mitochondria in cultured dorsal root ganglion neurons, and its deletion disrupted mitochondrial ultrastructure in peripheral neurons: implications in Alzheimer's disease.</a> J Alzheimers Dis. 98 (1), 247-264 (2024).</li>
<li>Sabbir, M. G., Swanson, M., Speth, R. C., Albensi, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+versus+cortical+deletion+of+cholinergic+receptor+muscarinic+1+in+mice+differentially+affects+post-translational+modifications+and+supramolecular+assembly+of+respiratory+chain-associated+proteins%2C+mitochondrial+ultrastructure%2C+and+respiration%3A+implications+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Hippocampal versus cortical deletion of cholinergic receptor muscarinic 1 in mice differentially affects post-translational modifications and supramolecular assembly of respiratory chain-associated proteins, mitochondrial ultrastructure, and respiration: implications in Alzheimer's disease.</a> Front Cell Dev Biol. 11, 1100854(2023).</li>
<li>Sabbir, M. G., Swanson, M., Albensi, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+cholinergic+receptor+muscarinic+1+impairs+cortical+mitochondrial+structure+and+function%3A+implications+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Loss of cholinergic receptor muscarinic 1 impairs cortical mitochondrial structure and function: implications in Alzheimer's disease.</a> Front Cell Dev Biol. 11, 1158604(2023).</li>
<li>Sabbir, M. G., Fernyhough, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscarinic+receptor+antagonists+activate+ERK-CREB+signaling+to+augment+neurite+outgrowth+of+adult+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Muscarinic receptor antagonists activate ERK-CREB signaling to augment neurite outgrowth of adult sensory neurons.</a> Neuropharmacology. 143, 268-281 (2018).</li>
<li>Sabbir, M. G., Taylor, C. G., Zahradka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CAMKK2+regulates+mitochondrial+function+by+controlling+succinate+dehydrogenase+expression%2C+post-translational+modification%2C+megacomplex+assembly%2C+and+activity+in+a+cell-type-specific+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Commun+Signal%22%5BJournal%5D)">CAMKK2 regulates mitochondrial function by controlling succinate dehydrogenase expression, post-translational modification, megacomplex assembly, and activity in a cell-type-specific manner.</a> Cell Commun Signal. 19 (1), 98(2021).</li>
<li>Sabbir, M. G., Calcutt, N. A., Fernyhough, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscarinic+acetylcholine+type+1+receptor+activity+constrains+neurite+outgrowth+by+inhibiting+microtubule+polymerization+and+mitochondrial+trafficking+in+adult+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Muscarinic acetylcholine type 1 receptor activity constrains neurite outgrowth by inhibiting microtubule polymerization and mitochondrial trafficking in adult sensory neurons.</a> Front Neurosci. 12, 402(2018).</li>
<li>Facino, R. M., Carini, M., Stefani, R., Aldini, G., Saibene, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-elastase+and+anti-hyaluronidase+activities+of+saponins+and+sapogenins+from+Hedera+helix%2C+Aesculus+hippocastanum%2C+and+Ruscus+aculeatus%3A+factors+contributing+to+their+efficacy+in+the+treatment+of+venous+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Pharm+%28Weinheim%29%22%5BJournal%5D)">Anti-elastase and anti-hyaluronidase activities of saponins and sapogenins from Hedera helix, Aesculus hippocastanum, and Ruscus aculeatus: factors contributing to their efficacy in the treatment of venous insufficiency.</a> Arch Pharm (Weinheim). 328 (10), 720-724 (1995).</li>
<li>Dervishi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sterols+govern+membrane+susceptibility+to+saponin-induced+lysis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Sterols govern membrane susceptibility to saponin-induced lysis.</a> bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Mhada, M., Metougui, M. L., El Hazzam, K., El Kacimi, K., Yasri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+of+saponins%2C+minerals+and+total+phenolic+compounds+due+to+processing+and+cooking+of+quinoa+%28Chenopodium+quinoa+Willd.%29+seeds%5BTitle%5D)+AND+%22Foods%22%5BJournal%5D)">Variations of saponins, minerals and total phenolic compounds due to processing and cooking of quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) seeds.</a> Foods. 9 (5), 660(2020).</li>
<li>Fasciani, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+C-terminus+of+the+prototypical+M2+muscarinic+receptor+localizes+to+the+mitochondria+and+regulates+cell+respiration+under+stress+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">The C-terminus of the prototypical M2 muscarinic receptor localizes to the mitochondria and regulates cell respiration under stress conditions.</a> PLoS Biol. 22 (4), e3002582(2024).</li>
<li>Skok, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+nicotinic+acetylcholine+receptors%3A+mechanisms+of+functioning+and+biological+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial nicotinic acetylcholine receptors: mechanisms of functioning and biological significance.</a> Int J Biochem Cell Biol. 143, 106138(2022).</li>
<li>Felmlee, M. A., Jones, R. S., Rodriguez-Cruz, V., Follman, K. E., Morris, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocarboxylate+transporters+%28SLC16%29%3A+function%2C+regulation%2C+and+role+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">Monocarboxylate transporters (SLC16): function, regulation, and role in health and disease.</a> Pharmacol Rev. 72 (2), 466-485 (2020).</li>
<li>Wohlrab, C., Phillips, E., Dachs, G. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamin+C+transporters+in+cancer%3A+current+understanding+and+gaps+in+knowledge%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Vitamin C transporters in cancer: current understanding and gaps in knowledge.</a> Front Oncol. 7, 74(2017).</li>
<li>Rovini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tubulin-VDAC+interaction%3A+molecular+basis+for+mitochondrial+dysfunction+in+chemotherapy-induced+peripheral+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tubulin-VDAC interaction: molecular basis for mitochondrial dysfunction in chemotherapy-induced peripheral neuropathy.</a> Front Physiol. 10, 671(2019).</li>
<li>Heuck, A. P., Moe, P. C., Johnson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cholesterol-dependent+cytolysin+family+of+gram-positive+bacterial+toxins%5BTitle%5D)+AND+%22Subcell+Biochem%22%5BJournal%5D)">The cholesterol-dependent cytolysin family of gram-positive bacterial toxins.</a> Subcell Biochem. 51, 551-577 (2010).</li>
<li>Murase, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytolysin+A+%28ClyA%29%3A+a+bacterial+virulence+factor+with+potential+applications+in+nanopore+technology%2C+vaccine+development%2C+and+tumor+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Cytolysin A (ClyA): a bacterial virulence factor with potential applications in nanopore technology, vaccine development, and tumor therapy.</a> Toxins (Basel). 14 (2), 107(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Asetilkolin klorür</td><td>MilliporeSigma</td><td>A6625</td><td>Muskarin agonisti</td></tr><tr><td>ADP</td><td>MP Biomedicals, Inc</td><td>ICN19014901</td><td>Elektron alıcısı, ATP sentezi için substrat.</td></tr><tr><td>Antimisin A</td><td>AAJ63522MA</td><td>Termo Bilimsel</td><td>Mitokondriyal kompleks III'ü inhibe eder</td></tr><tr><td>Atropin</td><td>MilliporeSigma</td><td>1044990</td><td>Muskarinik antagonist</td></tr><tr><td>Be2C hücreleri</td><td>Amerikan Tip Kültürü Koleksiyonu</td><td>CRL-2268</td><td>Nöroblastoma hastası erkek hastanın beyninden izole edilen bir nöroblast hücresi, muskarinik reseptör ifade eder</td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>MilliporeSigma</td><td>D141</td><td>Hafif deterjan, membran geçirici.</td></tr><tr><td>D-Mannitol</td><td>Termobilimsel Kimyasallar</td><td>AA3334236</td><td>Ozmotik stabilizasyon ve zar koruması için kullanılan metabolize edilmeyen bir şeker alkolüdür</td></tr><tr><td>EGTA</td><td>MilliporeSigma</td><td>E0396</td><td>Kalsiyum Şelasyonu, mitokondriyal proteinleri bozabilecek kalsiyuma bağlı proteazların ve diğer enzimlerin aktivasyonunu önler.</td></tr><tr><td>yağ asidi içermeyen BSA</td><td>MilliporeSigma</td><td>126575</td><td>Kontrolsüz yağ asidi etkilerini önler, mitokondrileri stabilize eder</td></tr><tr><td>FCCP</td><td>Cayman Chemical</td><td>NC0904863</td><td>Mitokondrilerde oksidatif fosforilasyonun bir protonoforu ve ayrıcırıcısı</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>MilliporeSigma</td><td>391340</td><td>pH tamponlama, mitokondriyal fonksiyonla uyumluluk</td></tr><tr><td>L-Askorbat</td><td>TCI Amerika</td><td>A053925G</td><td>TCA döngüsü ara, OXPHOS'un substratı</td></tr><tr><td>Magnezyum klorür</td><td>MilliporeSigma</td><td>M8266</td><td>İyonik denge için, enzimatik aktivite desteği</td></tr><tr><td>N1,N1,N1,N1-tetrametil-1,4-fenilen diamin (TMPD)</td><td></td><td></td><td>Elektron Donöründen Sitokrom c'ye, kompleks IV fonksiyonunun Kompleks I ve II'yi atlayarak değerlendirilmesi, TMPD/askorbat, Kompleks IV-bağımlı oksijen tüketiminin doğrudan ölçülmesini sağlar</td></tr><tr><td>Oligomisin</td><td>MilliporeSigma</td><td>1404-19-9</td><td>Mitokondriyal ATP sentezini engeller, Kompleks V</td></tr><tr><td>Pirenzepine dihidroklorür</td><td>MilliporeSigma</td><td>P7412</td><td>Muskarinik önyargılı agonist</td></tr><tr><td>Piruvik asit</td><td>Termobilimsel Kimyasallar</td><td>AC132155000</td><td>TCA döngüsü altlığı</td></tr><tr><td>Rotenone</td><td>MilliporeSigma</td><td>557368</td><td>Mitokondriyal kompleks I'i inhibe eder</td></tr><tr><td>Seahorse XF24 V7 PS Hücre Kültürü Mikroplakaları</td><td>Çevik</td><td>102340-100</td><td>Hücre kültürü mikroplakaları</td></tr><tr><td>Seahorse XFe24 Analizörü</td><td>Çevik</td><td>S7801BR</td><td>Agilent Seahorse XFe24 Analizörleri, 24 kuyu plaka formatında canlı hücrelerin oksijen tüketim oranını (OCR) ve hücre dışı asitlenme oranını (ECAR) ölçer.</td></tr><tr><td>Suksinik asit</td><td>Fisher Chemical</td><td>AC158742500</td><td>TCA döngüsü ara, OXPHOS'un substratı</td></tr><tr><td>XFe24 sensör kartuş kalibrasyon tamponu</td><td>Çevik</td><td>102340100</td><td>PBS tampon pH 7.2</td></tr><tr><td>XFe24 sensör kartuşları</td><td>Çevik</td><td>102340-100</td><td>OCR ve ECAR ölçümü için sensör</td></tr></tbody></table>

digitonin-permeabilize be(2)-c nöroblastom hücrelerinde oksidatif fosforilasyon bağlanmasının kolinergik ligand-bağımlı modülasyonu

Cholinergic Ligand&#8211;dependent Modulation of Oxidative Phosphorylation Coupling in Digitonin-permeabilized BE(2)-C Neuroblastoma Cells

Digitonin-permeabilize BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde oksidatif fosforilasyon bağlanmasının kolinergik ligand-bağımlı modülasyonu

The objective of this study was to assess oxidative phosphorylation (OXPHOS) function in cultured cells using defined substrate&#8211;inhibitor ...

cholinergic-liganddependent-modulation-oxidative-phosphorylation

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Adenilat siklaz sinyal duyarlanmasına inhibitör G protein-eşli reseptörler sonuçları Kalıcı aktivasyonu. Temel moleküler yolları belirlemek için, nonbiased yaklaşımlar gereklidir, ancak bu strateji ölçeklenebilir hücre bazlı cAMP hassaslaşması testin geliştirilmesini gerektirmektedir. Burada, küçük molekül ve siRNA taranması için olan bir hassaslaşma deneyi tarif eder.

Adenilat siklaz uyuşturucu kaynaklı Sensitizasyonu: Küçük Molekül ve siRNA Tarama Uygulamaları için Deney düzene ve minyatür

Bu makale, bir sinaptobrevin2-pHluorin yapısı ve Toplam İç Yansıma Floresan Mikroskobu kullanarak nöroblastom hücrelerinde nörotransmitter vezikül dinamiklerini araştırmak için bir yöntem sağlar. Görüntü işleme ve veri analizi için geliştirilen strateji de raporlanmaktadır.

TIRFM ve pH-duyarlı GFP-sondalar SH-SY5Y Nöroblastom Hücrelerinde nörotransmitter Vesikül Dynamics değerlendirin: Hücre Görüntüleme ve Veri Analizi

Yüksek çözünürlüklü Solunum mitokondriyal oksijen tüketimini belirlemek için kullanılır. Bu mitokondriyal solunum zinciri kompleksleri '(I-IV) solunum hızları, maksimum mitokondriyal elektron transport sistem kapasitesi ve mitokondriyal dış membran bütünlüğü belirlemek için basit bir tekniktir.

Yüksek çözünürlüklü Solunum permeabilize ve bozulmamış Hücreleri Mitokondrial fonksiyonu değerlendirmek için

Bu protokol, hücre farklılaşması ve Xenopus embriyonik gelişimi sırasında mitojenle aktive protein kinaz (MAPK) aktivitesini modüle etmek için bir optogenetik strateji tanımlamaktadır. Bu yöntem, yüksek mekansal ve zamansal çözünürlüğe sahip Xenopus embriyoları gibi memeli hücre kültüründe ve çok hücreli canlı organizmalarda MAPK sinyal yolağının geri dönüşümlü aktivasyonuna izin verir.

Hücre Farklılaştırması Sırasında Mitojenle Aktive Edilen Protein Kinaz Yolunun Hafif-Uyumlu Geri Dönüşümlü Modülasyonu ve<em&gt; Xenopus</em&gt; Embriyonik Gelişim

Bu makalede tarafından istihdam Tetradotoksin ve Tetradotoksin dayanıklı sodyum kanal, NaChBac arasındaki monosynaptic bağlantıları sınamak için bir yöntem sunar.

Tetradotoksin dayanıklı sodyum kanallarını kullanarak Drosophila Monosynaptic bağlantıları inceleyerek

Kemirgenlerin ve insan deneklerin beyin dokularından alınan ex vivo biyolojik örneklerde aksin filamentlerinin nicelleştirilmesi için basit, zaman verimli ve yüksek verimli floresan spektroskopi tabanlı bir tahlil rapor ediyoruz.

Kemirgen ve İnsan Beyin Dokularında Aktüer Polimerizasyon Durumunu Değerlendirmek için Zaman Verimli Floresan Spektroskopi Tabanlı Bir Tahlil

Taze tümör homojenatlarında mitokondriyal oksidatif fosforilasyon ve elektron transfer kapasitesini değerlendirmek için pratik bir protokol ve analitik yaklaşım geliştirdik. Bu protokol, kanser başlangıç, ilerleme ve tedavi yanıtına katkıda bulunan çeşitli mitokondriyal işlevleri incelemek için kolayca uyarlanabilir.

Eksiz katı tümör homojenatlarının Mitokondriyal fonksiyonunun analitik tayini

Aktomiyosin kontraktilitesi hücre ve doku morfogenezinde önemli bir rol oynar. Bununla birlikte, aktomiyosin kontraktilitesini in vivo akut olarak manipüle etmek zordur. Bu protokol, Drosophila embriyolarında Rho1 aracılı aktomiyosin kontraktilitesini hızla inhibe eden ve aktomiyozinin in vivo inaktivasyonundan sonra epitel gerginliğinin ani kaybını ortaya çıkaran bir optogenetik sistemi tanımlar.

Drosophila Embriyolarında Epitelyal Gerginliğin Ölçümü ile Birlikte Rho1 Aracılı Aktomiyosin Kontraktilitesinin Optogenetik İnhibisyonu

İyon kanallarının farmakolojik olarak hedeflenmesi, solid tümörlerin tedavisinde umut verici bir yaklaşımdır. Kanser hücrelerinde iyon kanalı fonksiyonunu karakterize etmek ve iyon kanalı modülatörlerinin kanser canlılığı üzerindeki etkilerini test etmek için ayrıntılı protokoller sağlanmıştır.

Kanser Hücrelerinde İyon Kanallarının Taranması

Burada, bu hücreleri dopaminerjik öncü hücrelere farklılaştırarak, bunları Parkinson hastalığının fare modellerine naklederek ve nakledilen hücrelerin başarılı entegrasyonunu ve fonksiyonel etkinliğini doğrulamak için davranışsal ve elektrofizyolojik sonuçları değerlendirerek hassas nöronal modülasyon elde etmek için kimyasal olarak yeniden programlanmış kök hücrelerin mühendisliği için bir protokol açıklıyoruz.

Nörodejeneratif Hastalıkların Tedavisinde Yeniden Programlanmış Kök Hücre Kaynaklı Öncü Hücrelerde Kemogenetik Düzenleme

Öğrenin, BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde digitonin ile seçici permeabilizasyon kullanarak oksidatif fosforilasyon fonksiyonunu değerlendirmeyi. Bu yöntem, farmakolojik modülasyon çalışmalarında mitokondriyal solunumu doğrudan analiz etme olanağı sağlar.

Digitonin-permeabilize BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde oksidatif fosforilasyon bağlanmasının kolinergik ligand-bağımlı modülasyonu (Video) | JoVE Journal

Digitonin-permeabilize BE(2)-C nöroblastom hücrelerinde oksidatif fosforilasyon bağlanmasının kolinergik ligand-bağımlı modülasyonu

Daha fazla video keşfet