Name: E. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 5 min 58 s
Description: Öğrenin, E. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu yöntemini. Bu teknik, protein fonksiyonu ve tümör metabolizması üzerindeki etkileri incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+gene+expression+by+histone+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of gene expression by histone lactylation.</a> Nature. 574 (7779), 575-580 (2019).</li>
<li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+lactylation+drives+oncogenesis+by+facilitating+m6A+reader+protein+YTHDF2+expression+in+ocular+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Histone lactylation drives oncogenesis by facilitating m6A reader protein YTHDF2 expression in ocular melanoma.</a> Genome Biol. 22 (1), 85(2021).</li>
<li>Pan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demethylzeylasteral+targets+lactate+by+inhibiting+histone+lactylation+to+suppress+the+tumorigenicity+of+liver+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Demethylzeylasteral targets lactate by inhibiting histone lactylation to suppress the tumorigenicity of liver cancer stem cells.</a> Pharmacol Res. 181, 106270(2022).</li>
<li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Royal+jelly+acid+suppresses+hepatocellular+carcinoma+tumorigenicity+by+inhibiting+H3+histone+lactylation+at+H3K9la+and+H3K14la+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Royal jelly acid suppresses hepatocellular carcinoma tumorigenicity by inhibiting H3 histone lactylation at H3K9la and H3K14la sites.</a> Phytomedicine. 118, 154940(2023).</li>
<li>Chai, P., Zhao, F., Jia, R., Zhou, X., Fan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate%2Flactylation+in+ocular+development+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Lactate/lactylation in ocular development and diseases.</a> Trends Mol Med. 31 (12), 1073-1076 (2025).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+and+clinical+significance+of+lactylation+modification+in+digestive+system+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">The relationship and clinical significance of lactylation modification in digestive system tumors.</a> Cancer Cell Int. 24 (1), 246(2024).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylome+analysis+suggests+lactylation-dependent+mechanisms+of+metabolic+adaptation+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">Lactylome analysis suggests lactylation-dependent mechanisms of metabolic adaptation in hepatocellular carcinoma.</a> Nat Metab. 5 (1), 61-79 (2023).</li>
<li>Chen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate-lactylation+hands+between+metabolic+reprogramming+and+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lactate-lactylation hands between metabolic reprogramming and immunosuppression.</a> Int J Mol Sci. 23 (19), 11943(2022).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+diapause-like+colorectal+cancer+cells+induced+by+smc4+attenuation+are+characterized+by+low+proliferation+and+chemotherapy+insensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">The diapause-like colorectal cancer cells induced by smc4 attenuation are characterized by low proliferation and chemotherapy insensitivity.</a> Cell Metab. 35 (9), 1563-1579 (2023).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+positive+feedback+loop+between+inactive+VHL-triggered+histone+lactylation+and+PDGFR%CE%B2+signaling+drives+clear+cell+renal+cell+carcinoma+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">A positive feedback loop between inactive VHL-triggered histone lactylation and PDGFRβ signaling drives clear cell renal cell carcinoma progression.</a> Int J Biol Sci. 18 (8), 3470-3483 (2022).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-derived+lactate+promotes+resistance+to+bevacizumab+treatment+by+facilitating+autophagy+enhancer+protein+Rubcnl+expression+through+histone+H3+lysine+18+lactylation+%28H3K18la%29+in+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Tumor-derived lactate promotes resistance to bevacizumab treatment by facilitating autophagy enhancer protein Rubcnl expression through histone H3 lysine 18 lactylation (H3K18la) in colorectal cancer.</a> Autophagy. 20 (1), 114-130 (2024).</li>
<li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate+modulates+cellular+metabolism+through+histone+lactylation-mediated+gene+expression+in+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lactate modulates cellular metabolism through histone lactylation-mediated gene expression in non-small cell lung cancer.</a> Front Oncol. 11, 647559(2021).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311 (2024).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycometabolic+reprogramming-induced+XRCC1+lactylation+confers+therapeutic+resistance+in+ALDH1A3-overexpressing+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycometabolic reprogramming-induced XRCC1 lactylation confers therapeutic resistance in ALDH1A3-overexpressing glioblastoma.</a> Cell Metab. 36 (8), 1696-1710.e10 (2024).</li>
<li>Liberti, M. V., Locasale, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+warburg+effect%3A+How+does+it+benefit+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">The warburg effect: How does it benefit cancer cells.</a> Trends Biochem Sci. 41 (3), 211-218 (2016).</li>
<li>Varner, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+lactoyl-CoA+%28lactyl-CoA%29+by+liquid+chromatography+mass+spectrometry+in+mammalian+cells+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantification of lactoyl-CoA (lactyl-CoA) by liquid chromatography mass spectrometry in mammalian cells and tissues.</a> Open Biol. 10 (9), 200187(2020).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311.e21 (2024).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NBS1+lactylation+is+required+for+efficient+DNA+repair+and+chemotherapy+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">NBS1 lactylation is required for efficient DNA repair and chemotherapy resistance.</a> Nature. 631 (8021), 663-669 (2024).</li>
<li>Zong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alanyl-trna+synthetase%2C+AARS1%2C+is+a+lactate+sensor+and+lactyltransferase+that+lactylates+p53+and+contributes+to+tumorigenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Alanyl-trna synthetase, AARS1, is a lactate sensor and lactyltransferase that lactylates p53 and contributes to tumorigenesis.</a> Cell. 187 (10), 2375-2392.e33 (2024).</li>
<li>Ju, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+alanyl-tRNA+synthetase+AARS1+moonlights+as+a+lactyltransferase+to+promote+YAP+signaling+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer.</a> J Clin Invest. 134 (10), e174587(2024).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+of+METTl16+promotes+cuproptosis+via+m6A-modification+on+FDX1+mRNA+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lactylation of METTl16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer.</a> Nat Commun. 14 (1), 6523(2023).</li>
<li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+induces+mitochondrial+protein+lactylation+to+limit+oxidative+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Hypoxia induces mitochondrial protein lactylation to limit oxidative phosphorylation.</a> Cell Res. 34 (1), 13-30 (2024).</li>
<li>Lv, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitogenic+and+oncogenic+stimulation+of+K433+acetylation+promotes+PKM2+protein+kinase+activity+and+nuclear+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Mitogenic and oncogenic stimulation of K433 acetylation promotes PKM2 protein kinase activity and nuclear localization.</a> Mol Cell. 52 (3), 340-352 (2013).</li>
<li>Okada, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysine+acetylation+regulates+the+interaction+between+proteins+and+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lysine acetylation regulates the interaction between proteins and membranes.</a> Nat Commun. 12 (1), 6466(2021).</li>
<li>Wan, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+immonium+ion+of+lactyllysine+reveals+widespread+lactylation+in+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cyclic immonium ion of lactyllysine reveals widespread lactylation in the human proteome.</a> Nat Methods. 19 (7), 854-864 (2022).</li>
<li>Shao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+reveals+site-specific+lactylation+in+living+cells+reshapes+protein+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion reveals site-specific lactylation in living cells reshapes protein functions.</a> Nat Commun. 16 (1), 227(2025).</li>
<li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+encoding+of+%CE%B5-N-L-lactyllysine+for+detecting+delactylase+activity+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">Genetic encoding of ε-N-L-lactyllysine for detecting delactylase activity in living cells.</a> Chem Commun (Camb). 58 (61), 8544-8547 (2022).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanding+the+scope+of+genetically+encoded+lysine+post-translational+modifications+with+lactylation%2C+%CE%B2-hydroxybutyrylation+and+lipoylation%5BTitle%5D)+AND+%22Chembiochem%22%5BJournal%5D)">Expanding the scope of genetically encoded lysine post-translational modifications with lactylation, β-hydroxybutyrylation and lipoylation.</a> Chembiochem. 23 (18), e202200302(2022).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+unnatural+cells+with+a+21st+amino+acid+as+a+living+epigenetic+sensor%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Engineering unnatural cells with a 21st amino acid as a living epigenetic sensor.</a> Nat Commun. 16 (1), 9388(2025).</li>
<li>Elsasser, S. J., Ernst, R. J., Walker, O. S., Chin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+in+stable+cell+lines+enables+encoded+chromatin+modification%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion in stable cell lines enables encoded chromatin modification.</a> Nat Methods. 13 (2), 158-164 (2016).</li>
<li>Zhu, W., Fan, C., Hou, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+in+tumor+microenvironment+and+immunotherapy+resistance%3A+New+mechanisms+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Lactylation in tumor microenvironment and immunotherapy resistance: New mechanisms and challenges.</a> Cancer Lett. 627, 217835(2025).</li>
<li>Mills, E. M., Barlow, V. L., Jones, A. T., Tsai, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+mammalian+cell+logic+gates+controlled+by+unnatural+amino+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of mammalian cell logic gates controlled by unnatural amino acids.</a> Cell Rep Methods. 1 (6), 100073(2021).</li>
<li>Italia, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+protein+sulfation+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded protein sulfation in mammalian cells.</a> Nat Chem Biol. 16 (4), 379-382 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>6*onun, Onun etiketi Rekombinant monoklonal antikor</td><td>Proteintech</td><td>84814-1-RR</td><td>6&times hedefleyen spesifik immünoglobulin sınıfı; Rekombinant proteinlerdeki etiketi (altı ardışık histidin kalıntısından oluşan kısa bir peptit, HHHHHH).</td></tr><tr><td>ACQUITY UPLC sistemi</td><td>Sular</td><td></td><td>UltraPerformance Sıvı Kromatografi</td></tr><tr><td>Anti-L-Laktillisin Tavşan mAb</td><td>PTM Biolabs</td><td>PTM-1401RM</td><td>Proteinlerin translasyon sonrası modifikasyonu (PTM) olan L-Lactil Lizin (Klac) hedefleyen spesifik immünoglobulin sınıfı.</td></tr><tr><td>ClonExpress II Tek Adımlı Klonlama Kiti</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>C112</td><td>Basit, hızlı ve verimli DNA kesintisiz klonlama teknolojisine dayanan insert parçaları, herhangi bir vektörün herhangi bir bölgesine yönlü olarak klonlanabilir.</td></tr><tr><td>CytoFlex akış sitometresi</td><td>Beckmann Coulter</td><td></td><td>Yüksek hassasiyetli algılama ve çok renk analiz yeteneğine sahip akış sitometresi</td></tr><tr><td>DH10B</td><td>Biorabbit</td><td>EC005H-S</td><td>Plazmid dönüşümü, gen klonlama ve mavi-beyaz tarama için yetkin bir hücre türü.</td></tr><tr><td>DH5&alpha;</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>C502</td><td>Plazmid dönüşümü, gen klonlama ve mavi-beyaz tarama için yetkin bir hücre türü.</td></tr><tr><td>EASY-nano LC 1200 sistemi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>Yüksek duyarlı, yüksek çözünürlüklü karmaşık örnekleri ayırmak için nano-sıvı kromatografi</td></tr><tr><td>Orbitrap Eclipse Tribrid kütle spektrometresi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>amiral gemisi üst düzey tribrid sıvı kromatografi-kütle spektrometrisi (LC-MS) sistemi</td></tr><tr><td>Phanta Max Süper Doğrulu DNA Polimeraz</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>P505</td><td>Hızlı amplifikasyon ve isabetliliği birleştiren yüksek isabetlilikte tek bir enzim</td></tr><tr><td>PolyJet</td><td>SignaGen</td><td>SL100688</td><td>PolyJet DNA In Vitro Transfeksiyon Reaktifi, daha az sitotoksisiteyle etkili ve tekrarlanabilir transfeksiyon sağlayan güçlü bir transfeksiyon reaktifi olarak formüle edilmiştir.</td></tr></tbody></table>

e. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu

Site-Specific Lysine Lactylation via Genetic Code Expansion in E. coli and Mammalian Cells

İlk olarak Klac'ın E. coli'deki proteinlere dahil edilme özgüllüğünü değerlendirdik. İnsan enolaz 1 geni (hENO1), kalıntı K89 (hENO1-89TAG) üzerinde amber stop kodonu içerecek şekilde tasarlandı ve bu yapı, ortogonal KlacRS ve E. coli'deki benzer tRNA çiftiyle birlikte eksprese edildi. 1 mM Klac takviyesi olmadığında, tam boy hENO1 tespit edilmedi; Buna karşılık, büyüme ortamına 1 mM Klac eklendiğinde, 89 pozisyonda Klac içeren tam boy hENO1 (hENO1-89Klac) ~1,2 mg/L verimiyle üretilmiştir (<str...

E. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu

Lactylation is a recently discovered post-translational modification (PTM) with diverse biological functions. Since its initial identification in 2019 as ...

site-specific-lysine-lactylation-via-genetic-code-expansion-e-coli

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Indüklenebilir lizin dekarboksilaz aktivitesi toluen diferansiyel çözünürlüğü adducts oluşturmak için substrat L-lizin ve ürün cadaverine 2,4,6-trinitrobenzensulfonic asit ile reaksiyona girerek izlenir.

Etkinlik Ölçüm Bir Testi Escherichia coli Lizin Decarboxyase Đndüklenebilir

biyokimyasal yollarla ilgili enzimatik faaliyetlerin doğrulama fonksiyonel tamamlama analizi (FCA) kullanılarak aydınlatılmıştır edilebilir. amino asitler, bakteriyel katı cevabı ve bakteriyel peptidoglikan biyosentezinin metabolizmasında rol oynayan enzimlerin enzimatik aktivitesi gösteren FCA deneyi Bu yazıda tarif edilmektedir.

Fonksiyonel tamamlama Analizi (FCA): Tasarım ve Biyokimyasal Yolların Öğretim Ek için Uygulanan A Laboratory Egzersiz

Tıbbi, farmasötik, yapısal ve fonksiyonel çalışmalar için Kanonik olmayan amino asit analoglarının proteinlere kalıntıya özgü dahil edilmesi için kullanımı kolay, hücresiz bir ekspresyon protokolü sunulmuştur.

Bir Kullanarak Modeli Proteinler içine Kuralsız Amino Asit kalıntı özgü Ortaklığın<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Hücre içermeyen Transkripsiyon-çeviri Sistemi

Biyokimyasal ve yapısal analizleri glikozile proteinlerin homojen örnekleri nispeten büyük miktarda gerektirir. Burada, reaktif Cys thiols hedefleyerek bakterilerden saflaştırılmış rekombinant proteinlerin siteye özgü Glikozilasyon için verimli bir kimyasal yöntem mevcut.

Sistein Thiols rekombinant proteinler Vitro siteye özgü Glikozilasyon için hedefleme

Sentetik Biyoloji Mühendisliği proteinlerin kanonik olmayan amino asitlerin co-translational ekleme kullanarak benzersiz özellikleri ile sağlar. Burada, GFP türü fluorophore "altın" floresan protein (GdFP) olarak adlandırdığı roman Floresans spektroskopik özellikleri ile hayalice kırmızı kaymıştır bir türevi E. coli seçici basınç birleşme (SPI) yolu ile nasıl üretilir sundu.

Mühendislik kanonik olmayan Amino asitler ve seçici basınç eklenmesi tarafından 'Altın' floresan ve kütle spektrometresi ve floresan göre Protein analizi

Genetik kod genişleme biyolojik süreçler, protein asetilasyon dahil olmak üzere geniş bir çalışma için güçlü bir araç olarak hizmet vermektedir. Burada biz homojen oluşturmak için bu teknik yararlanma facile bir protokol proteinler, Escherichia coli hücreleri belirli sitelerdeki acetylated göstermek.

Escherichia Coli proteinler Site-Specifically oluşturmak için Facile iletişim kuralı Acetylated

Protokol Escherichia colisunar-lactococcal antimikrobiyal peptid nisin içine seçici basınç birleşme kanonik olmayan amino asit (ncAAs) dayalı. Özelliklerini rekombinant ifade ile ikame ile tanımlanmış büyüme medya istenen ncAAs sırasında değiştirilebilir. Bioactivity ortaya çıkan değişimler büyüme inhibisyon deneyleri ve floresan mikroskopi tarafından eşleştirilir.

Antimikrobiyal peptidler kanonik olmayan Amino asitler ve seçici basınç eklenmesi tarafından üretilen

Bu çalışmada, aynı anda doğruluk, hassasiyet ve yüksek verim elde etmek için nadir kodon zengin işaretçileri kullanarak amino asit overüreticilerinin belirlenmesi geleneksel toksik analog tabanlı yöntem için alternatif bir strateji sunar.

Nadir-Codon zengin Işaretçileri kullanarak amino asit Overüreticiler tanımlama

Burada, genetik kod genişlemesini kullanarak asetillenmiş histone proteinlerini ifade etmek ve yeniden inşa edilmiş nükleozomları in vitro olarak birleştirmek için bir yöntem sunuyoruz.

Escherichia coli'de Genetik Kod Genişlemesi Kullanılarak Nükleozom Rekonses için Histonların Siteye Özgü Lizin Asetilasyonu

Bu protokol, Escherichia coli'nin tasarlanmış bir suşunu kullanarak ve sadece standart laboratuvar ekipmanı gerektiren hücresiz gen ekspresyözü için bakteriyel lisat üretmek için hızlı ve basit bir yöntemi açıklar.

Bakteri hücresi içermeyen Lysate'in Hızlı, Uygun Fiyatlı ve Karmaşık Olmayan Üretimi

Bu makale, genetik kod genişlemesi (GCE) bölgesini kullanarak Salmonella salgılanan efektörlerini spesifik olarak etiketlemek ve doğrudan stokastik optik rekonstrüksiyon mikroskobu (dSTORM) kullanarak HeLa hücrelerinde salgılanan proteinlerin hücre altı lokalizasyonunu görüntülemek için basit ve açık bir protokol sunmaktadır...

Genetik Kod Genişlemesi Kullanılarak Bakteriyel Salgılanan Proteinlerin Süper Çözünürlüklü Görüntülenmesi

Öğrenin, E. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu yöntemini. Bu teknik, protein fonksiyonu ve tümör metabolizması üzerindeki etkileri incelemek için kullanılır.

E. coli ve memeli hücrelerinde genetik kod genişletmesiyle siteye özgü lizin laktilasyonu

Daha fazla video keşfet