Name: In vitro miyogenez çalışmaları için iskelet kası uydu hücrelerinin izolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Keşfedin, fare iskelet kasından uydu hücrelerinin izolasyonu için optimize edilmiş bir protokol. Yüksek sağkalım, %97'den fazla saflık ve tekrarlanabilirlik sağlayan bu yöntem, miyogenez ve kas rejenerasyonu çalışmaları için idealdir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Yeh, C. -J., Sattler, K. M., Lepper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+satellite+cells+via+intercellular+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of satellite cells via intercellular signaling.</a> Gene. 858, 147172(2023).</li>
<li>Gonzalez, M. L., Busse, N. I., Waits, C. M., Johnson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+their+regulation+in+livestock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and their regulation in livestock.</a> J Anim Sci. 98 (5), skaa081(2020).</li>
<li>Mauro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+of+skeletal+muscle+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophys+Biochem+Cytol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell of skeletal muscle fibers.</a> J Biophys Biochem Cytol. 9 (2), 493-495 (1961).</li>
<li>Yin, H., Price, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+the+muscle+stem+cell+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and the muscle stem cell niche.</a> Physiol Rev. 93, 23-67 (2013).</li>
<li>Kahn, R. E., Dayanidhi, S., Lacham-Kaplan, O., Hawley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+clocks%2C+satellite+cells%2C+and+skeletal+muscle+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Molecular clocks, satellite cells, and skeletal muscle regeneration.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 324 (1), C1332-C1340 (2023).</li>
<li>Abreu, P., Mendes, S. V. D., Ceccatto, V. M., Hirabara, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+activation+induced+by+aerobic+muscle+adaptation+in+response+to+endurance+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cell activation induced by aerobic muscle adaptation in response to endurance exercise.</a> Life Sci. 170, 33-40 (2017).</li>
<li>Dueweke, J. J., Awan, T. M., Mendias, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+skeletal+muscle+after+eccentric+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sport+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Regeneration of skeletal muscle after eccentric injury.</a> J Sport Rehabil. 26 (2), 171-179 (2017).</li>
<li>Michele, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+skeletal+muscle+repair+and+regeneration+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of skeletal muscle repair and regeneration in health and disease.</a> FEBS J. 289 (21), 6460-6462 (2022).</li>
<li>Domingues-Faria, C., Vasson, M. -P., Goncalves-Mendes, N., Boirie, Y., Walrand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+regeneration+and+impact+of+aging+and+nutrition%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle regeneration and impact of aging and nutrition.</a> Ageing Res Rev. 26, 22-36 (2016).</li>
<li>Tierney, M. T., Sacco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+heterogeneity+in+skeletal+muscle+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell heterogeneity in skeletal muscle homeostasis.</a> Trends Cell Biol. 26 (6), 434-444 (2016).</li>
<li>Troy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+satellite+cell+activation+and+self-renewal+by+Par-complex-dependent+asymmetric+activation+of+p38%CE%B1%2F%CE%B2+MAPK%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Coordination of satellite cell activation and self-renewal by Par-complex-dependent asymmetric activation of p38α/β MAPK.</a> Cell Stem Cell. 11 (4), 541-553 (2012).</li>
<li>Dumont, N. A., Wang, Y. X., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+and+extrinsic+mechanisms+regulating+satellite+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Intrinsic and extrinsic mechanisms regulating satellite cell function.</a> Development. 142 (9), 1572-1581 (2015).</li>
<li>Danoviz, M. E., Yablonka-Reuveni, Z. Skeletal muscle satellite cells: background and methods for isolation and analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDanoviz%2C+ME+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, J. X. 798, Humana Press. 21-52 (2012).</li>
<li>Gharaibeh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+slowly+adhering+cell+fraction+containing+stem+cells+from+murine+skeletal+muscle+by+the+preplate+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1501-1509 (2008).</li>
<li>Benedetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+for+the+isolation+and+long-term+expansion+of+pure+satellite+cells+based+on+ice-cold+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Skelet+Muscle%22%5BJournal%5D)">A novel approach for the isolation and long-term expansion of pure satellite cells based on ice-cold treatment.</a> Skelet Muscle. 11 (1), 7(2021).</li>
<li>Yoshioka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+preplating+method+for+high-yield+and+high-purity+muscle+stem+cell+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">A modified preplating method for high-yield and high-purity muscle stem cell isolation.</a> Front Cell Dev Biol. 8, 793(2020).</li>
<li>Uezumi, A., Fukada, S., Yamamoto, N., Takeda, S., Tsuchida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+progenitors+distinct+from+satellite+cells+contribute+to+ectopic+fat+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal progenitors distinct from satellite cells contribute to ectopic fat formation.</a> Nat Cell Biol. 12 (2), 143-152 (2010).</li>
<li>Christov, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+satellite+cells+and+endothelial+cells%3A+close+neighbors+and+privileged+partners%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Muscle satellite cells and endothelial cells: close neighbors and privileged partners.</a> Mol Biol Cell. 18 (4), 1397-1409 (2007).</li>
<li>Elizalde, G., Munoz, A. Z., Almada, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+isolation+of+mouse+muscle+stem+cells+using+fluorescence-activated+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the isolation of mouse muscle stem cells using fluorescence-activated cell sorting.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102656(2023).</li>
<li>Pasut, A., Oleynik, P., Rudnicki, M. A. Isolation of muscle stem cells by fluorescence-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPasut%2C+A+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, X. 798, Humana Press. 53-64 (2012).</li>
<li>Lee, J. D., Sinha, B. C., Larkin, L. M., Vandenburgh, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+satellite+cells+for+skeletal+muscle+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of satellite cells for skeletal muscle tissue engineering.</a> J Regen Med. 3 (2), (2015).</li>
<li>Llufrio, E. M., Wang, L., Naser, F. J., Patti, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorting+cells+alters+their+redox+state+and+cellular+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Sorting cells alters their redox state and cellular metabolome.</a> Redox Biol. 16, 381-387 (2018).</li>
<li>Cusmano, A. A., et al. Efficient isolation and ex vivo differentiation of murine satellite cells. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCusmano%2C+AA+%22Stem+Cell%22">Stem Cell</a>. Turksen, K. 2939, Springer. 37-54 (2025).</li>
<li>Park, Y. G., Moon, J. H., Kim, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+magnetic-activated+cell+sorting+and+preplating+for+myoblast+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Yonsei+Med+J%22%5BJournal%5D)">Comparative study of magnetic-activated cell sorting and preplating for myoblast purification.</a> Yonsei Med J. 47 (2), 179-186 (2006).</li>
<li>Park, Y. G., Baek, A., Kim, S. Myoblast purifying by magnetic-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPark%2C+YG+%22Methods+Cell+Biol%22">Methods Cell Biol</a>. 112, Elsevier. 439-447 (2012).</li>
<li>Lee, H., Han, N. R., Kim, S. J., Yun, J. I., Lee, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+high-yield+isolation+protocol+for+active+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Development of a high-yield isolation protocol for active muscle satellite cells.</a> Int J Stem Cells. 15 (3), 283-290 (2022).</li>
<li>Cui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+easy+and+practical+method+for+isolation%2C+culture+and+identification+of+mouse+skeletal+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">An easy and practical method for isolation, culture and identification of mouse skeletal muscle satellite cells.</a> Int J Clin Exp Med. 9, 19424-19431 (2016).</li>
<li>Ding, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+isolation+of+highly+purified+porcine+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Characterization and isolation of highly purified porcine satellite cells.</a> Cell Death Discov. 3, 17003(2017).</li>
<li>Pawlikowski, B., Vogler, T. O., Gadek, K., Olwin, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+skeletal+muscle+stem+cells+by+fibroblast+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Regulation of skeletal muscle stem cells by fibroblast growth factors.</a> Dev Dyn. 246 (5), 359-367 (2017).</li>
<li>Shahini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+high-yield+isolation+of+myoblasts+from+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Efficient and high-yield isolation of myoblasts from skeletal muscle.</a> Stem Cell Res. 30, 122-129 (2018).</li>
<li>Lee, D. H., Kwak, K. B., Park, Y. C., Chung, C. H., Ha, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+myoblast+fusion+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of myoblast fusion inhibitor.</a> Mol Cells. 1, 177-182 (1991).</li>
<li>Moulin, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+and+adult+human+skin+fibroblasts+display+intrinsic+differences+in+contractile+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fetal and adult human skin fibroblasts display intrinsic differences in contractile capacity.</a> J Cell Physiol. 188 (2), 211-222 (2001).</li>
<li>Wilson, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+expression+of+collagen+receptors+in+rat+cardiac+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Microanal%22%5BJournal%5D)">Age-dependent expression of collagen receptors in rat cardiac fibroblasts.</a> Microsc Microanal. 17 (4), 555-562 (2011).</li>
<li>Kohen, N. T., Little, L. E., Healy, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Matrigel+interfaces+during+defined+hESC+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biointerphases%22%5BJournal%5D)">Characterization of Matrigel interfaces during defined hESC culture.</a> Biointerphases. 4 (4), 69-79 (2009).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+system+supporting+robust+expansion+of+myogenic+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22BioRes+Open+Access%22%5BJournal%5D)">In vitro culture system supporting robust expansion of myogenic progenitors.</a> BioRes Open Access. 3 (3), 79-87 (2014).</li>
<li>Péault, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+and+progenitor+cells+in+skeletal+muscle+development+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Stem and progenitor cells in skeletal muscle development and therapy.</a> Mol Ther. 15 (5), 867-877 (2007).</li>
<li>Le Grand, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+satellite+cells+and+adult+myogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle satellite cells and adult myogenesis.</a> Curr Opin Cell Biol. 19 (6), 628-633 (2007).</li>
<li>Rando, T. A., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+mouse+myoblast+purification+and+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Primary mouse myoblast purification and transplantation.</a> J Cell Biol. 125 (6), 1275-1287 (1994).</li>
<li>Hindi, L., McMillan, J., Afroze, D., Hindi, S., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culturing%2C+and+differentiation+of+primary+myoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, culturing, and differentiation of primary myoblasts.</a> Bio Protoc. 7 (9), (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>%0,25 tripsin-EDTA&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>100 & mikro; M hücre süzücüsü&nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2759</td><td></td></tr><tr><td>30 &micro; M Strainer&NBSP;</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro; M hücre süzücüsü&nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2757</td><td></td></tr><tr><td>70 &micro; M hücre süzücüsü&nbsp;</td><td>VWR</td><td>130-095-823</td><td></td></tr><tr><td>Asetik asit&nbsp;</td><td>POCH</td><td>568760114</td><td>dH2O içinde çözünür ve son konsantrasyon 20 mM ile sterilize edilir; m filtresi</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488, eşek karşıtı Tavşan</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>A21206</td><td>Bloklama çözeltisinde (bkz. Bölüm 8.7) 1:250 seyreltme ile çözüldü</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488, keçi fare karşıtı&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab150113</td><td>Bloklama çözeltisinde (bkz. Bölüm 8.7) 1:250 seyreltme ile çözüldü</td></tr><tr><td>Amonyum klorür (NH4Cl)&nbsp;</td><td>BioShop</td><td>AMC303.500</td><td>Suda çözünerek son konsantrasyon 50 mM</td></tr><tr><td>Antifade Montaj Medyası</td><td>Vectashield</td><td>H-2000-10</td><td></td></tr><tr><td>Anti-PAX7 antikor</td><td>Abcam</td><td>AB187339</td><td>Bloklama çözeltisinde (bkz. Bölüm 8.7) 1:100 seyreltme ile çözülmüş</td></tr><tr><td>Temel fibroblast büyüme faktörü&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354060</td><td>Steril dH2O'da 10 &micro stok konsantrasyonuna çözünür; g/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>Betadin, 100 mg/mL</td><td>EGIS İlaç</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültür plakası, 6 kuyruk, Hücre+</td><td>SARSTEDT</td><td>83.3902.300</td><td></td></tr><tr><td>Tavuk embriyosu ekstraktı&nbsp;</td><td>MP Biyomedikal</td><td>2850145</td><td></td></tr><tr><td>Kollajen I, fare kuyruğu</td><td>Gibco</td><td>A10483-01</td><td>20 mM asetik asit&nbsp içinde çözünmüş;</td></tr><tr><td>Kollajenaz, tip I</td><td>Sigma</td><td>C0130-500MG</td><td>DMEM'de çözünür ve 0.2 &micro ile sterilize edilir; m filtresi</td></tr><tr><td>Dissosiyasyon tüpü (nazik MACS C Tüpleri)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı, yüksek glikoz</td><td>Gibco</td><td>31966-021</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Konik Santrifüj Tüpleri, 15 mL</td><td>Corning</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Konik Santrifüj Tüpleri, 50 mL</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Gibco</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>At serumu &nbsp;</td><td>Gibco</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>Manyetik etiketleme reaktifi (Uydu Hücre İzolasyon Kiti)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-104-268</td><td></td></tr><tr><td>Manyetik ayırıcı (MidiMACS Ayırıcı)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-302</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel&nbsp;</td><td>Corning</td><td>CLS356234</td><td>DMEM'de %10 konsantrasyona ve nbsp'ye çözünür;</td></tr><tr><td>Paraformaldehit %4 PBS'de</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>J61899. AK</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat-tamponlu tuzlu sıvı&nbsp;</td><td>VWR</td><td>392-0334</td><td></td></tr><tr><td>Ayırma kolonu (LS Sütunları)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>İskelet Kası Miozin Antikoru, MHC</td><td>Santa Cruz</td><td>SC-32732</td><td>Bloklama çözeltisinde (bkz. Bölüm 8.7) 1:50 seyreltme ile çözülmüş</td></tr><tr><td>TC-anten, 100 x 20 mm</td><td>SARSTEDT</td><td>83.3902</td><td></td></tr><tr><td>Doku Dissosiyatörü (GentleMACS Dissociator)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-1L</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro miyogenez çalışmaları için iskelet kası uydu hücrelerinin izolasyonu

Isolation of Skeletal Muscle Satellite Cells for In Vitro Myogenesis Studies

In vitro miyogenez çalışmaları için iskelet kası uydu hücrelerinin izolasyonu

Skeletal muscle regeneration and growth depend on satellite cells, the muscle tissue&#39;s resident stem cells. Currently, these cells serve as ...

isolation-skeletal-muscle-satellite-cells-for-vitro-myogenesis

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Mikro-disseke eksplantlar tekniği, iskelet kas kök hücre kaynağı olarak çocuk, yetişkin ya da embriyonik kasları proliferatif iskelet kas hücreleri izole için sağlam ve güvenilir bir yöntemdir. Benzersiz, bu hücrelerin klonal in vivo nakli için kullanılan iskelet kas kök hücre hatları üretmek için türetilmiştir.

Yetişkin ve Embriyonik İskelet, Kas Microexplant Kültür ve İskelet Kası Kök Hücre İzolasyonu

Bu video, uydu hücrelerinin sıçan başı dallıyomerik kas dokularından doku diseksiyonu, enzimatik sindirim ve ardından mekanik ve santrifüj saflaştırma yoluyla izolasyonunu göstermektedir. Hücreler daha sonra miyoblastlara ve sonunda miyotüplere ve olgun kas liflerine farklılaşmak için hücre dışı matris kaplı kuyucuklara ekilir.

Sıçan Başı Kas Dokusundan Uydu Hücrelerini İzole Etmek İçin Bir Teknik

Myofibers izolasyonu ve kültürü altın...

Yetişkin İskelet Kası gelen bireysel Myofibers ve Uydu Hücre İzolasyonu ve Kültür

Hareketsiz uydu hücrelerin saf nüfusun izolasyonu ve kültürü, kas kök hücre topluluğu, kas kök hücre biyolojisi ve rejenerasyon, hem de kas distrofisi ve diğer dejeneratif hastalıklarda tedavileri için kök hücre nakli anlaşılması için gereklidir.

Kas Uydu Hücreleri İzolasyon, Kültür ve Transplantasyon

Vitro kültürü sistemleri omurgalı Miyogenesis anlayışımıza vazgeçilmez kanıtlanmıştır. Ancak, çok özellikle bazal taksa içinde, memeli olmayana iskelet kas gelişimi ve büyüme öğrendi gerekmektedir. Bu doku, kas kaynaklı öncü hücreleri (MPCs) yetişkin kök hücrelerin izole edilmesi ve bir birincil kültür ortamda kendi kendini yenileme, proliferasyon ve farklılaşma korumak için etkili ve güçlü bir protokol boyunca korunmuş ve farklı düzenleyici mekanizmaların tanımlanması için sağlar: omurgalı...

Bazal Omurgalı soylarından İlköğretim andMyogenic Öncü Hücre / Miyoblast Kültürlerinin Hazırlanması

İnsan kasından türetilen ana yapışık hücre tipleri miyojenik hücreler ve fibroblastlardır. Burada, hücre popülasyonları, CD56 antijenine dayalı olarak manyetik olarak aktive edilen hücre sıralaması kullanılarak zenginleştirilir. Spesifik antikorlarla müteakip immüno-etiketleme ve görüntü analiz tekniklerinin kullanılması, tek tek hücrelerde sitoplazmik ve nükleer özelliklerin miktar tayinine izin verir.

İnsan İskelet Kası İlköğretim andMyogenic Hücreleri ve Fibroblast İzolasyon ve Kantitatif İmmünositokimyasal Karakterizasyonu

Bu protokol, 9 haftalık farenin branchiomeric merkez kas uydu hücreleri izolasyonunu anlatmaktadır. kaslar, farklı brankiyal kemerlerin kaynaklanmaktadır. Daha sonra, uydu hücreleri farklılaşma çalışma milimetre boyutta bir Noktası kaplama üzerinde kültürlenmiştir. Bu yaklaşım, uydu hücrelerinin genişleme ve pasajlanmasını önler.

Sıçan Başkanı Branchiomeric Kaslar gelen İzolasyon ve Uydu Hücrelerinin Karakterizasyonu

Uydu hücreleri hassas tanımlaması işlevlerini çeşitli fizyolojik ve patolojik koşullarda çalışmak için esastır. Bu makale ayirt tabanlı boyama tarafından uydu hücreleri yetişkin iskelet kas bölümlerinde tanımlamak için bir protokol sunar.

Kas iskelet uydu hücreleri tarafından Pax7 ve Laminin antikorlar ile ayirt tanımlaması

Bu protokol, 1) yetişkin fare gastroknemius kasından primer fibroblastların izolasyonunu ve kültürünü ve ayrıca 2) sükroz yoğunluk gradyanları ile birlikte diferansiyel bir ultrasantrifüj yöntemi kullanılarak eksozomların saflaştırılmasını ve karakterizasyonunu ve ardından western blot analizlerini göstermektedir.

İskelet Kası Fibroblastlarından Eksozomların İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Burada, homozigot mutant Lamin Δ8-11 fare modeli, Emery-Dreifuss kas distrofisi (EDMD) için çok ciddi bir model erken doğum sonrası gelişim aşamalarında verimli bir şekilde tek kas lifleri elde etmek için bir yöntem öneriyoruz.

Erken Doğum Sonrası Gelişimde Emery-Dreifuss Musküler Distrofi'nin Murine Modelinden Tek Miyofiber İzolasyon ve Kültür

İskelet kası, her biri kas homeostazına ve rejenerasyonuna özel bir katkısı olan yerleşik kök hücreler de dahil olmak üzere birden fazla hücre tipinden oluşur. Burada, fizyolojik, in vivo ve çevresel özelliklerin çoğunu koruyan ex vivo bir ortamda kas kök hücrelerinin 2 boyutlu kültürü ve kas hücresi nişi açıklanmaktadır.

Niş ve Kök Hücre Sessizliğini Özetlemek için Fare İskelet Kasının Fraksiyone Edilmemiş Toplu Kültürü

Keşfedin, fare iskelet kasından uydu hücrelerinin izolasyonu için optimize edilmiş bir protokol. Yüksek sağkalım, %97'den fazla saflık ve tekrarlanabilirlik sağlayan bu yöntem, miyogenez ve kas rejenerasyonu çalışmaları için idealdir.

In vitro miyogenez çalışmaları için iskelet kası uydu hücrelerinin izolasyonu

Daha fazla video keşfet