Name: Lewis Farelerinden Pankreas Adacığı İzolyasyonu ve Arındırma, Enzimatik Sindirim ve Yoğunluk-Gradient Ayrımı Kullanılarak (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T12:53:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Keşfedin Lewis farelerinden enzimatik sindirim ve yoğunluk-gradient ayrımı kullanarak yüksek saflıkta pankreas adacığı izolasyonu. Bu yöntem diyabet araştırmaları ve transplantasyon çalışmaları için üstün verim ve canlılık sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Grattoni, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harnessing+cellular+therapeutics+for+type+1+diabetes+mellitus%3A+progress%2C+challenges%2C+and+the+road+ahead%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Harnessing cellular therapeutics for type 1 diabetes mellitus: progress, challenges, and the road ahead.</a> Nat Rev Endocrinol. 21 (1), 14-30 (2025).</li>
<li>Páez-Mayorga, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+strategies+for+%CE%B2+cell+transplantation+to+treat+type+1+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Emerging strategies for β cell transplantation to treat type 1 diabetes mellitus.</a> Cell Transplant. 31, 963689721004(2022).</li>
<li>Cabrera, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unique+cytoarchitecture+of+human+pancreatic+islets+and+its+relevance+to+%CE%B2-cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">The unique cytoarchitecture of human pancreatic islets and its relevance to β-cell function.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (7), 2334-2339 (2006).</li>
<li>Brissova, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+islet+microvasculature+and+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Pancreatic islet microvasculature and blood flow.</a> J Clin Invest. 124 (4), 1871-1883 (2014).</li>
<li>Jiang, F. X., Morahan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+islet+architecture+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Pancreatic islet architecture and function.</a> Cell Death Discov. 10, 170(2024).</li>
<li>Sato, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+induces+%CE%B2-cell+apoptosis+and+functional+suppression+in+isolated+islets%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hypoxia induces β-cell apoptosis and functional suppression in isolated islets.</a> PLoS One. 9 (12), e114868(2014).</li>
<li>Tiedge, M., Lortz, S., Drinkgern, J., Lenzen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+between+antioxidant+enzyme+gene+expression+and+antioxidative+defense+status+of+insulin-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Relation between antioxidant enzyme gene expression and antioxidative defense status of insulin-producing cells.</a> Diabetes. 46 (11), 1733-1742 (1997).</li>
<li>Ichii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shipment+of+human+islets+for+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Shipment of human islets for transplantation.</a> Am J Transplant. 7 (4), 1010-1020 (2007).</li>
<li>Carobbio, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+GSIS+kinetics+in+freshly+isolated+mouse+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Rapid GSIS kinetics in freshly isolated mouse islets.</a> Diabetologia. 47 (9), 1652-1662 (2004).</li>
<li>Zawalich, W. S., Zawalich, K. C., Kelley, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immediate+perifusion+of+fresh+rat+and+mouse+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Immediate perifusion of fresh rat and mouse islets.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 294 (2), E444-E450 (2008).</li>
<li>Wassmer, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+use+of+freshly+isolated+islets+transplanted+within+48+h%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Clinical use of freshly isolated islets transplanted within 48 h.</a> Transplant Proc. 53 (6), 1907-1912 (2021).</li>
<li>Tai, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immediate+autotransplantation+of+islets+following+total+pancreatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Surg%22%5BJournal%5D)">Immediate autotransplantation of islets following total pancreatectomy.</a> JAMA Surg. 150 (5), 472-479 (2015).</li>
<li>Carter, J. D., Dula, S. B., Corbin, K. L., Wu, R., Nunemaker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+rodent+islet+isolation+and+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Proced+Online%22%5BJournal%5D)">A practical guide to rodent islet isolation and assessment.</a> Biol Proced Online. 11, 3-31 (2009).</li>
<li>Emamaullee, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewis+rats+in+transplantation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Lewis rats in transplantation studies.</a> Diabetes. 65 (5), 1350-1359 (2016).</li>
<li>de Groot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+islet+isolation+yield+and+function+are+donor+strain+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Rat islet isolation yield and function are donor strain dependent.</a> Lab Anim. 38 (2), 200-206 (2004).</li>
<li>Moazenchi, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+variability+in+islet+yield+and+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Islets%22%5BJournal%5D)">Strain variability in islet yield and isolation.</a> Islets. 2 (5), 283-289 (2010).</li>
<li>Dolenšek, J., Slak Rupnik, M., Stožer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+variability+limits+reproducibility+in+rat+islet+studies%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Isolation variability limits reproducibility in rat islet studies.</a> PLoS One. 14 (5), e0216136(2019).</li>
<li>Stehno-Bittel, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+flaws+and+future+of+islet+volume+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">The flaws and future of islet volume measurements.</a> Cell Transplant. 27 (4), 571-578 (2018).</li>
<li>Kissler, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+methodologies+for+quantifying+isolated+human+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Validation of methodologies for quantifying isolated human islets.</a> Cell Transplant. 18 (6), 611-620 (2009).</li>
<li>Papas, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+assessment+for+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Islet assessment for transplantation.</a> Cell Transplant. 18 (6), 519-528 (2009).</li>
<li>Dono, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+temperature+collagenase+digestion+for+islet+isolation+from+48-hour+cold-preserved+rat+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Low temperature collagenase digestion for islet isolation from 48-hour cold-preserved rat pancreas.</a> Transplantation. 57 (1), 22-26 (1994).</li>
<li>Shapiro, A. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+yield+of+rodent+islets+with+intraductal+collagenase+distension+and+warm+incubation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">High yield of rodent islets with intraductal collagenase distension and warm incubation.</a> Cell Transplant. 5 (6), 631-638 (1996).</li>
<li>Corbin, K. L., Hughes, J. W., Nunemaker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+rodent+islet+isolation+and+assessment+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Proced+Online%22%5BJournal%5D)">A practical guide to rodent islet isolation and assessment revisited.</a> Biol Proced Online. 23, 10(2021).</li>
<li>de Haan, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+influencing+isolation+of+functional+pancreatic+rat+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Factors influencing isolation of functional pancreatic rat islets.</a> Pancreas. 29 (1), e15-e22 (2004).</li>
<li>Kenyon, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+and+function+of+intrahepatic+islet+allografts+in+baboons+treated+with+humanized+anti-CD154%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Long-term survival and function of intrahepatic islet allografts in baboons treated with humanized anti-CD154.</a> Diabetes. 48 (7), 1473-1481 (1999).</li>
<li>Kenyon, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+and+function+of+intrahepatic+islet+allografts+in+rhesus+monkeys+treated+with+humanized+anti-CD154%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Long-term survival and function of intrahepatic islet allografts in rhesus monkeys treated with humanized anti-CD154.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (14), 8132-8137 (1999).</li>
<li>Liberase T-Flex Research Grade - Method Sheet. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22eLabDoc%22">eLabDoc</a>. , Roche Diagnostics GmbH. (2025).</li>
<li>Miyazaki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategy+towards+tailored+donor+tissue-specific+pancreatic+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Strategy towards tailored donor tissue-specific pancreatic islet isolation.</a> PLoS One. 14 (5), e0216136(2019).</li>
<li>Cross, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+matrix+proteins+within+the+pancreatic+islet+basement+membrane+are+differentially+digested+during+human+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Key matrix proteins within the pancreatic islet basement membrane are differentially digested during human islet isolation.</a> Am J Transplant. 17 (2), 451-461 (2017).</li>
<li>O'Gorman, D., Kin, T., Pawlick, R., Imes, S., Senior, P. A., Shapiro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+islet+isolation+outcomes+with+a+highly+purified+neutral+protease+for+pancreas+dissociation%5BTitle%5D)+AND+%22Islets%22%5BJournal%5D)">Clinical islet isolation outcomes with a highly purified neutral protease for pancreas dissociation.</a> Islets. 5 (3), 111-115 (2013).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjustment+of+digestion+enzyme+composition+improves+islet+isolation+outcome+from+marginal+grade+human+donor+pancreata%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Bank%22%5BJournal%5D)">Adjustment of digestion enzyme composition improves islet isolation outcome from marginal grade human donor pancreata.</a> Cell Tissue Bank. 8, 187-194 (2007).</li>
<li>McCall, M. D., Maciver, A. H., Pawlick, R., Edgar, R., Shapiro, A. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopaque+provides+optimal+mouse+islet+purification+kinetics%3A+comparison+study+with+Ficoll%2C+iodixanol+and+dextran%5BTitle%5D)+AND+%22Islets%22%5BJournal%5D)">Histopaque provides optimal mouse islet purification kinetics: comparison study with Ficoll, iodixanol and dextran.</a> Islets. 3 (4), 144-149 (2011).</li>
<li>Ricordi, C., Lacy, P. E., Finke, E. H., Olack, B. J., Scharp, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+method+for+isolation+of+human+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Automated method for isolation of human pancreatic islets.</a> Diabetes. 37 (4), 413-420 (1988).</li>
<li>BenchChem Technical Support Team. An in-depth technical guide to cell separation using iodixanol. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22BenchChem%22">BenchChem</a>. , (2026).</li>
<li>Dellê, H., Saito, M. H., Yoshimoto, P. M., Noronha, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+iodixanol+for+the+purification+of+rat+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">The use of iodixanol for the purification of rat pancreatic islets.</a> Transplant Proc. 39 (2), 467-469 (2007).</li>
<li>Noguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iodixanol-controlled+density+gradient+during+islet+purification+improves+recovery+rate+in+human+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Iodixanol-controlled density gradient during islet purification improves recovery rate in human islet isolation.</a> Transplantation. 87 (11), 1629-1635 (2009).</li>
<li>Min, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superiority+of+Visipaque+%28iodixanol%29-controlled+density+gradient+over+Ficoll-400+in+adult+porcine+islet+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Superiority of Visipaque (iodixanol)-controlled density gradient over Ficoll-400 in adult porcine islet purification.</a> Transplant Proc. 42 (5), 1825-1829 (2010).</li>
<li>Paez-Mayorga, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neovascularized+implantable+cell+homing+encapsulation+platform+with+tunable+local+immunosuppressant+delivery+for+allogeneic+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Neovascularized implantable cell homing encapsulation platform with tunable local immunosuppressant delivery for allogeneic cell transplantation.</a> Biomaterials. 257, 120232(2020).</li>
<li>Paez-Mayorga, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantable+niche+with+local+immunosuppression+for+islet+allotransplantation+achieves+type+1+diabetes+reversal+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Implantable niche with local immunosuppression for islet allotransplantation achieves type 1 diabetes reversal in rats.</a> Nat Commun. 13, 7951(2022).</li>
<li>Piemonti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Endotext%22%5BJournal%5D)">Islet transplantation.</a> Endotext. , (2022).</li>
<li>Patel, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+foundation+for+engineering+a+pancreatic+islet+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">The foundation for engineering a pancreatic islet niche.</a> Front Endocrinol. 13, 881525(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>21 G x 2 in. BD PrecisionGlide İğnesi</td><td>BD</td><td>305129</td><td></td></tr><tr><td>500 &micro; m Pirinç Çerçeve ve 304 Paslanmaz Çelik Perde, 3" Çapta x 1" Derinlikte (Elekter numarası 35)</td><td>McMaster-Carr</td><td>34735K525</td><td></td></tr><tr><td>Air-Tite Steril Şırıngalar, Luer Kilidi</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-178</td><td></td></tr><tr><td>Biogel PI UltraTouch M</td><td>M&ouml; Lnlycke</td><td>42665</td><td></td></tr><tr><td>Bonn Makasları; Straight; Keskin Uçlar; 15 mm bıçak uzunluğu; 3 1/2" Toplam Uzunluk</td><td>Roboz</td><td>RS-5840</td><td></td></tr><tr><td>Braintree Scientific GERMINATOR 500 KURU STERIL</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9956482</td><td></td></tr><tr><td>Cell-IQ Serisi 5.8 cu.ft. CO2 Laboratuvar Kuluçka Makinesi</td><td>PHCBI</td><td>MCO-170AICUVHL-PA</td><td></td></tr><tr><td>Corning 100 mm TC ile işlenmemiş kültür tabağı</td><td>Corning</td><td>430591</td><td></td></tr><tr><td>Corning fetal sığır serumu, 500 mL, normal, USDA güvenlik testinden geçti (ısı inaktive edildi)</td><td>Corning</td><td>35011CV</td><td></td></tr><tr><td>Corning Adacığı Gradienti 1.069 (yoğunluk 1.069 g/cm3)</td><td>Corning</td><td>99-815-CIS</td><td>Şirketten özel bir talep gerektirir</td></tr><tr><td>Corning Adacığı Gradienti 1.096 (yoğunluk 1.096 g/cm3)</td><td>Corning</td><td>99-691-CIS</td><td>Şirketten özel bir talep gerektirir</td></tr><tr><td>Corning Adacığı Gradienti 1.108 (yoğunluk 1.108 g/cm3)</td><td>Corning</td><td>99-692-CIS</td><td>Şirketten özel bir talep gerektirir</td></tr><tr><td>Covidien Tendersorb Alt Pedleri</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-225-102</td><td></td></tr><tr><td>DNase I Grade II</td><td>Roche</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>Falcon&nbsp; 50 mL Yüksek Berraklıkta Konik Santrifüj Tüpleri</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Alüminyum Folyo, Standart Açıklıklı Rulo</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-213-100</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp; Dokumasız Gazlı Süngerler</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-028-559</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Yeniden Kullanılabilir Cam Ağır Hizmet Düşük Form Beakerler</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB101600</td><td></td></tr><tr><td>Floresans Mirkoskop&nbsp; BZ-X810</td><td>Keyence</td><td>BZ-X810</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz Çözeltisi</td><td>Gibco</td><td>A2494001</td><td></td></tr><tr><td>Halsey Mikro İğne Tutacağı</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>HBSS, kalsiyum, magnezyum, fenol kırmızı yok</td><td>Gibco</td><td>14025092</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (1 M)</td><td>Gibco</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatik Pensler Klasik Crile 5-1/2 inç Uzunluğu</td><td>McKesson</td><td>1231217</td><td></td></tr><tr><td>Hudson (Ewald) Pensetleri</td><td>Roboz</td><td>RS-5238</td><td></td></tr><tr><td>Hipodermik İğne Monoject 1-1/2 inç Uzunluğu 16 gauge Emniyetsiz Normal Duvar</td><td>McKesson</td><td>43481</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamin (200 mM)</td><td>Gibco</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Liberase T-Flex, Araştırma Derecesi</td><td>Roche</td><td>5989132001</td><td></td></tr><tr><td>CANLI/ÖLÜ Yaşamı/Sitotoksiklik Kiti, memeli hücreleri için</td><td>Invitrogen</td><td>&nbsp; L3224</td><td></td></tr><tr><td>MATLAB yazılım paketi</td><td>MathWorks</td><td><a href="https://www.mathworks.com/pricing-licensing.html?prodcode=ML">https://www.mathworks.com/pricing-licensing.html?prodcode=ML</a></td><td></td></tr><tr><td>NE-4000 İki Kanallı Programlanabilir Şırınga Pompası</td><td>ŞırıngaPompa</td><td>NE-4000-US</td><td></td></tr><tr><td>İĞNE, HIPO STR DISP 27GX1/2"(100/BX) EXLINT</td><td>McKesson</td><td>408877</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Hücre Kültürü/Petri Kasaları</td><td>Termo-Bilimsel</td><td>174926</td><td></td></tr><tr><td>Olympus CKX41 Ters Faz Kontrast Mikroskobu</td><td>Olympus</td><td>CKX41-B</td><td></td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin Streptomisin (10.000 U/mL)</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640, glikoz yok</td><td>Gibco</td><td>11879020</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Piruvat (100 mM)</td><td>Gibco</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Piruvat (100 mM stok)</td><td>Gibco</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>Sorval ST 16R</td><td>Termo-Bilimsel</td><td>75004381</td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik 304 şırınga iğnesi</td><td>Milipore Sigma</td><td>Z117013-1EA</td><td></td></tr><tr><td>CERRAHI PERDE, TEK KULLANILABILIR, 36 IN X 100 YD</td><td>Covetrus</td><td>10408</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas - ToughCut</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14054-13</td><td></td></tr><tr><td>Başparmak Sarma Pensetleri 4.5" Dişli Hassas 1.3 mm Uç Genişliği</td><td>Roboz</td><td>RS-8120</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Scientific Nunc 200mL Santrifüj Tüpü</td><td>Termo-Bilimsel</td><td>14-962-17</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Scientific Nunc Santrifüj Şişe Adaptörleri ve Yastıkları</td><td>Termo-Bilimsel</td><td>12-565-283B</td><td></td></tr><tr><td>TSDUB15 15L Dubnoff Sallama Su Banyosu</td><td>Fisher Scientific</td><td>300610298</td><td></td></tr><tr><td>TX-400 4 x 400 mL Sallanan Kova Rotoru</td><td>Termo-Bilimsel</td><td>75003181</td><td></td></tr><tr><td>Tygon S-50-HL</td><td>Tygon</td><td>AAXoooo3</td><td></td></tr><tr><td>Ultra Hassas Fare İnsülin ELISA Kiti</td><td>Kristal Kimya</td><td>90060</td><td></td></tr></tbody></table>

lewis farelerinden pankreas adacığı İzolyasyonu ve arındırma, enzimatik sindirim ve yoğunluk-gradient ayrımı kullanılarak

Pancreatic Islet Isolation and Purification from Lewis Rats Using Enzymatic Digestion and Density-Gradient Separation

Aşağıdaki sonuçlar, tarif edilen yöntemle yapılan tipik bir adacik izolasyonunu temsil etmektedir; on iki Lewis sıçan pankreası paralel olarak işlenmiştir.
Verim ve boyut dağılımı
Manuel aliquot sayımı ve IEQ dönüşümü
"Adacık Sayımı", Adım 6.1'de tanımlandığı gibi, karışık adacığı süspansiyonundan iki bağımsız 100 μL aliquot elde edildi ve çaplı kutulara göre sayıldı (50-100 μm, 100-150 μm, 150-200 μm, 200-250 μm, 250-300 μm, 250-300 μm, 250-300 μm). Sayımlar, standart eşdeğerlik tabloları kullanılarak adacığı eşdeğerlerine (IEQ; 150 μm referans) dönüştürüldü ve toplam süspansiyon hacmine ekstrapolasyon yapıldı (bkz. Şekil 4A). Test izolasyonu boyunca (n = 12), verim pankreas için 3330 IEQ, 50-100 μm kutuda ise ortaca bir adacık çapı bulunuyordu. Çoğaltılan aliquotlar, bin başına %18,8 (varyasyon katsayısı) ile uyum sağladı; bu da orta derecede varyasyon olduğunu ancak manuel sayım yöntemleriyle beklendiğini gösteriyor. Önceki 14 adacığı izolasyonunda, bu yöntem pankreas için ortalama 1353 (SD 607) IEQ üretti.
Otomatik tam plaka nicel ölçme
Manuel IEQ'yu karşılaştırmak için, D1'de mikroskop kullanılarak parlak alan görüntüleri alındı ve tüm tabak kompozitleri oluşturmak üzere dikildi (4× objektif; 1/100 s pozlama). Otomatik boyutlandırma ve nesne niceleme Fiji ve önceden tanımlanmış 50-600 μm boyut eşiği ile kodlama kullanılarak gerçekleştirildi. Görüntüler önce arka plan varyasyonunu azaltmak ve kontrast düzenliliğini artırmak için önceden işlendi. Adacık yapıları, çevredeki dokuya göre yoğunluk farklılıklarına göre tanımlandı ve böylece ikili nesne maskeleri oluşturuldu. Bitişik veya kısmen birbirine değinen adabaşlar, nesne sayısının küçümsenmesini önlemek için ayrılmıştır. Belirlenen boyut aralığı dışındaki nesneler, enkaz ve adacığı olmayan dokuları temizlemek için hariç tutuldu. Her tutulan nesne için, alan ve x ile y eksenli çapları dahil morfometrik parametreler çıkarıldı. Adacıklar daha sonra çapına göre binlendi ve IEQ, her boyut kutusundaki adacık sayısının karşılık gelen dönüşüm faktörü ile çarpılmasıyla hesaplandı. Otomatik boyutlandırma, ortalama x ve y eksenli çapları sırasıyla 117 μm ve 116 μm olmak üzere toplam 98.832 nesne elde etti; tahmini toplam 16.350 IEQ oldu; bu da manuel IEQ ile D0 olarak ölçülmesiyle güçlü şekilde korelasyonluydu (Spearman r = 0.937, p = 0.0048; bkz. Şekil 4A-C).
Adacığı hücresi dökülmesi
Tam plaka görüntüleri, arıtmadan 2 saat sonra ve tekrar 1. Günde (D1) alındı; aynı yöntem "Otomatik tam plaka niceliklendirme"de erken adacık stabilizasyonunu ("dökülme") değerlendirmek için kullanıldı. Nesne sayısı %0,9 oranında, IEQ ise %6,11 değişti (bkz. Şekil 4D). D0 ve D1 arasındaki adacığığı çaplarının eşleştirilmiş karşılaştırılması, istatistiksel olarak anlamlı bir medyan azalma olarak 2 μm olduğunu göstermiştir (Wilcoxon işaretli sıralama testi, p = 0.0136, n = 2820). Ancak, bu değişikliğin küçük büyüklüğü biyolojik veya klinik açıdan anlamlı olmayabilir.
<img alt="Şekil 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/70414/70414fig4.jpg" data-altupdatedat="1777957239000" data-alt="Figure 4"> 
Şekil 4: Adacık büyüklüğü dağılımı, korelasyonu ve erken dökülmesinin nicel değerlendirmesi. Manuel ve otomatik analizlerle elde edilen adacık ölçümlerinin grafik özeti. (A) Gün 0 (D0) Standartlaştırılmış adacığığı eşdeğer IEQ boyutlu kutular arasında manuel nicelik verilerine dayalı adacık boyutu dağılımı (B) Aynı standartlaştırılmış IEQ boyut kutularında otomatik görüntü tabanlı ölçümlerle belirlenen 1. Gün (D1) adacık boyutu dağılımı. (C) IEQ boyutlu kutular arasında manuel D0 ile otomatik D1 nicelik ölçme arasındaki sayıların korelasyonu. (D) Aynı plakanın otomatik ölçümleri için D0 ile D1 arasındaki adacığığının dağılımının kutu grafiki. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/70414/70414fig4large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Saflık (endokrin vs. ekzokrin içerik)
Dithizone (DTZ) boyama
D1'de, adacıkların bir aliquotu (n = 451) oda sıcaklığında 30 saniye DTZ ile boyanmış ve hemen parlak alan mikroskopisiyle görüntülenmiştir (4× objektif; 1/20 s. pozlama). Fiji'de, arka plan pikselleri kaldırıldı ve kalan piksel alanı toplam adacığı alanına karşılık gelecekti. DTZ-negatif ekzokrin doku bölgeleri, daha koyu renk kontrastıyla tanımlanarak, lasso aracı kullanılarak manuel olarak seçildi ve ilgi duyulan her bölgenin alanı otomatik olarak piksel cinsinden kaydedildi. Endokrin saflık, DTZ-pozitif piksellerin toplam adacığı piksellerine göre yüzdesi olarak hesaplanmış ve %0,38 ± 98,56 saflık elde edilmiştir (Şekil 5A).
Uygulanabilirlik ve işlevsel performans
Glikozla uyarlanan insülin salgısı (GSIS)
Her zaman noktasında (D1, D3, D7), 15 boyut uyumlu adacığı elle seçilip 24 kuyu tabağının bireysel kuyularına yerleştirildi; bu kuyular dört kez hazırlandı. Adabaşlar, Krebs tamponu içinde 37 °C 5%CO2 oranında düşük-yüksek-düşük glikoz uyarısı protokolü altında inkübe edildi: önce düşük glikozda (2,8 mM, 60 dakika), ardından yüksek glikozda (16,7 mM, 60 dakika, bkz. Tablo 1). Her kuluçka döneminin sonunda atık su fraksiyonları toplandı ve insülin konsantrasyonları fare insülin ELISA testi kullanılarak nicelendirildi. Uyarım indeksleri, yüksek ve düşük glikoz koşullarında insülin salgılanmasının oranı olarak hesaplandı. Uyarılma indeksleri sırasıyla 1., 3. ve 7. günlerde 9.37, 8.34 ve 6.7 idi ve anlamlı fark yoktu (Şekil 5B).
Canlı/Ölü boyama
D1, D3 ve D7 seviyelerinde, üreticinin talimatlarına göre 15 adacık el ile seçilip Live/Dead canlılık kiti ile boyandı. Kısa bir süreliğine, adacıqlar 25 °C'de 30 dakika boyunca Live/Dead boyama çözeltisinde kuluçka edildi, ardından zaman noktaları arasında karşılaştırılabilirliği sağlamak için tutarlı mikroskop ayarlarında görüntülendi (4X nesnel; 1/30 saniye pozlama, Texas Red ve GFP filtreleri). Yaşamlılık, adacığı segmentasyonu ve floresan ölçümü için scikit-image kullanılarak Python betiği kullanılarak nicel olarak belirlendi. Adabaşlar, yeşil ve kırmızı floresans kanallarının birleştirilmesi, Li eşik yöntemi uygulanarak ikili bir maske oluşturulması ve dokunan adacıqları ayırmak için havza segmentasyonu kullanılarak tanımlandı. Nesneler, enkaz ve eserleri dışlamak için alana göre filtrelendi. Her adacığı için, canlı entegre yoğunluğun (yeşil pikseller) toplam entegre yoğunluğuna (yeşil artı kırmızı pikseller) göre yüzdesi olarak canlılık hesaplandı. Sonuçlar, D1'de %68 ± %9, D3'te %98,2 ± %0,6 ve D7'de %100 olarak gösterilmiştir. %70 etanol ile 10 dakika işlenmiş pozitif kontrol örneği 2,7 ± %7,2 canlılık göstermiştir (bkz. Şekil 5C-F).
<img alt="Şekil 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/70414/70414fig5.jpg" data-altupdatedat="1777957239000" data-alt="Figure 5"> 
Şekil 5: Adacık saflığı, yaşamlılığı ve fonksiyonel yanıt verme değeri. İzole adacığığının zaman içinde temsil görüntüleri ve nicel özetleri. (A) Dithizon (DTZ) ile boyanmış adacıqların 10× parlak alan görüntüsü, kırmızı boyalı endokrin adacıklar ve lekensiz ekzokrin dokuyu gösteriyor. (B) 1., 3. ve 7. Günler için yüksek glikoz/düşük glikoz (HG/LG) uyarım indeksi için glikozla uyarılan insülin salgılanması (GSIS) değerleri. (C-E) 1. Gün (C), 3. Gün (D) ve 7. Gün (E) adacıklarının canlı/ölü floresans görüntüleri. (F) Etanol ile işlenmiş pozitif kontrol adacıqlarının canlı/ölü floresans görüntüsü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/70414/70414fig5large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(A) Medya Yıkama</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bileşen</td>
			<td>Son yoğunlaşma</td>
			<td>Miktar (mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Sığır Serumu</td>
			<td>10%</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen-Strep (10.000 U/mL)</td>
			<td>1%</td>
			<td>5.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>25 mM</td>
			<td>1M stokundan 12,5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamin</td>
			<td>2 mM</td>
			<td>200 mM stoktan 5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(b) Adacık Kültürü Medyası</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bileşen</td>
			<td>Son yoğunlaşma</td>
			<td>Miktar (mL veya g)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640, Glikoz yok</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Sığır Serumu</td>
			<td>10%</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen-Strep (10.000 U/mL)</td>
			<td>1%</td>
			<td>5.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>20 mM</td>
			<td>1M stoktan 11 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodyum Piruvat</td>
			<td>1 mM</td>
			<td>100 mM stoktan 5,5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glikoz</td>
			<td>5.5 mM</td>
			<td>200 g/L stoktan 2.75 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(C) Penisillin-Streptomisin Durulama Çözeltisi</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bileşen</td>
			<td>Son yoğunlaşma</td>
			<td>Miktar (mL veya g)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tuzlu Çözelti %0,9</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penisilin Streptomisin (10.000 U/mL)</td>
			<td>2%</td>
			<td>10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(D) Söndürme Tamponu</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bileşen</td>
			<td>Son yoğunlaşma</td>
			<td>Miktar (mL veya g)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Sığır Serumu</td>
			<td>20%</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>2.50%</td>
			<td>2.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(E) Krebs Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bileşen</td>
			<td>Son yoğunlaşma</td>
			<td>Miktar (mL veya g)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dH2O</td>
			<td>-</td>
			<td>975 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>115 mM</td>
			<td>6.72 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>24 mM</td>
			<td>2.02 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>5 mM</td>
			<td>0.3728 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>25 mM</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>1 mM</td>
			<td>0.0952 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>0.10%</td>
			<td>1 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2.5 mM</td>
			<td>0.2775 g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: Çözüm listesi. Adacığı izolasyon ve arıtma protokolü boyunca kullanılan tüm çözeltiler için bileşim ve hazırlık detayları. Her alt bölüm bileşenleri, nihai konsantrasyonları, hazırlık hacimlerini ve katalog numaralarını listeler. (A) Yıkama Medyası, sindirim ve arınma sırasında doku durulama ve yıkama için kullanılır. (B) İzolasyon sonrası adacığığının bakımı ve yaşamlılığı için kullanılan Adacık Kültürü Medyası. (C) Penisillin-Streptomisin Durulama Çözeltisi, hasat edilen pankreasları sterilize etmek ve durulamak için kullanılır. (D) Enzimatik sindirimi sonlandırmak ve hücre canlılığını korumak için kullanılan Söndürme Tamponu. (E) Krebs Buffer, glikozla uyarlanan insülin salgılanması (GSIS) testlerinde kullanılır.
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pankreas sayısı</td>
			<td>Kollagenaz (15,38 mg/mL)</td>
			<td>Termolizin (1 mg/mL)</td>
			<td>DNAse (100 mg/mL)</td>
			<td>Çalışma tamponu</td>
			<td>600 mL Beaker'ler kullanılacak</td>
			<td>Hacim/Beaker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30</td>
			<td>4.5 mL</td>
			<td>2.25 mL</td>
			<td>450 μL</td>
			<td>450 mL</td>
			<td>5</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24</td>
			<td>3.6 mL</td>
			<td>1.8 mL</td>
			<td>360 μL</td>
			<td>360 mL</td>
			<td>4</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20</td>
			<td>3 mL</td>
			<td>1.5 mL</td>
			<td>300 μL</td>
			<td>300 mL</td>
			<td>3</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16</td>
			<td>2.4 mL</td>
			<td>1.2 mL</td>
			<td>240 μL</td>
			<td>240 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12</td>
			<td>1.8 mL</td>
			<td>0.9 mL</td>
			<td>180 μL</td>
			<td>180 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10</td>
			<td>1.5 mL</td>
			<td>0.75 mL</td>
			<td>150 μL</td>
			<td>150 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Son sonuç.</td>
			<td>0.15 mg/mL</td>
			<td>5 mg/mL</td>
			<td>0.1 mg/mL</td>
			<td colspan="3"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 2: Pankreas miktarına göre sindirim enzimi çözeltisi. Farklı sayıda fare pankreası için Çalışan Dissosiyasyon Ortamı (WDM) hazırlamak için kollagenaz, termolizin ve DNaz I hacimleri gerekti. Her enzimin nihai konsantrasyonları tablonun en altında listelenmiştir.
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pankreas sayısı</td>
			<td>50 mL numaralı tüpler</td>
			<td>Hacim/şırınga</td>
			<td>1.096 şırınga sayısı</td>
			<td>1.068 şırınga sayısı</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30</td>
			<td>10 tüp</td>
			<td>50 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24</td>
			<td>8 tüp</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20</td>
			<td>6 tüp</td>
			<td>30 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16</td>
			<td>4 tüp</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12</td>
			<td>4 tüp</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10</td>
			<td>2 tüp</td>
			<td>20 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 3: Pankreas miktarına göre gradyen yükleme. İşlenen pankreas sayısına göre adacığı arıtması için gereken 50 mL konik tüp sayısı ve buna karşılık gelen gradyan hacmleri.
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adacık Çapı Aralığı (μm)</td>
			<td>Adacık Parçacık Sayısı (AI)</td>
			<td>IEQ Dönüşüm Faktörü</td>
			<td>IEQ Aralık Başına</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50-100</td>
			<td>a</td>
			<td>* 0.167</td>
			<td>a * 0.167</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>101-150</td>
			<td>b</td>
			<td>* 0.648</td>
			<td>b * 0.648</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>151-200</td>
			<td>c</td>
			<td>* 1.685</td>
			<td>c * 1.685</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>201-250</td>
			<td>d</td>
			<td>* 3.500</td>
			<td>d * 3.500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>251-300</td>
			<td>e</td>
			<td>* 6.315</td>
			<td>e * 6.315</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>301-350</td>
			<td>f</td>
			<td>* 10.352</td>
			<td>f * 10.352</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&gt; 350</td>
			<td>g</td>
			<td>* 15.833</td>
			<td>g * 15.833</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 4: Adacığı eşdeğerlik dönüşümü. Adacık çapı aralıklarının standartlaştırılmış adacığı eşdeğerlerine (IEQ) dönüştürülmesi. Tablo, gözlemlenen adacığı çaplı kutuları, aralık başına adacık parçacık sayısını, her boyut aralığı için karşılık gelen IEQ dönüşüm faktörünü ve her aralık başına elde edilen IEQ katkısını listeler.

Lewis Farelerinden Pankreas Adacığı İzolyasyonu ve Arındırma, Enzimatik Sindirim ve Yoğunluk-Gradient Ayrımı Kullanılarak

Pancreatic islets are essential for both clinical islet transplantation and preclinical studies aimed at understanding the mechanisms and progression of ...

pancreatic-islet-isolation-purification-from-lewis-rats-using

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

, Yüksek kalite ve insan adacıklar uygun miktarda sağlamak başarılı bir adacık nakli için önemli önkoşullar biridir. Bu video, adım adım tarif insan pankreas adacık izolasyonu için prosedürler: değiştirilmiş bir otomatik yöntemi kullanılarak (bölüm I sindirim ve pankreas dokusu toplanması).

İnsan Pankreas Adacık İzolasyonu: Bölüm I: Sindirim ve Pankreas Doku Koleksiyon

, Yüksek kalite ve insan adacıklar uygun miktarda sağlamak başarılı bir adacık nakli için önemli önkoşullar biridir. Bu video, adım adım tarif insan pankreas adacık izolasyonu (Bölüm II: insan adacıklar arıtma ve kültür) için prosedürleri değiştirilmiş bir otomatik yöntemi kullanarak.

İnsan Pankreas Adacık İzolasyonu: Bölüm II: İnsan Islets saflaştırılması ve Kültür

Izole adacık transplantasyonu tip 1 şeker hastalığı için potansiyel bir tedavi olarak öne sürülmüştür. Burada, fare pancreata adacıkları izole, ve böbrek subkapsüler alan nakli için bir yöntem açıklanmaktadır.

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Araştırma için tip 2 diyabetik adacık kaynağı yetersiz. Burada kısmi pankreatektomi geçiren hastalardan izole adacıklar için protokol paylaşın. Bu yaklaşım, tip 2 diyabetik adacıklar elde etmek için eşsiz bir mekan temsil eder ve temel ve klinik çalışmalar için yeterli sayıda non-diyabetik hastalarda klinik olarak uyumlu.

Kısmen Pancreatectomized hastalar İnsan Islets izolasyonu

Langerhans Adacıkları olarak da adlandırılan pankreas adacıkları, glikoz regülasyonu ve diğer önemli biyolojik işlevler için hormonlar üreten bir endokrin hücre kümesidir. Bu protokol, ekzokrin pankreas dokusunu sindirmek için önce Ampulla of Vater yoluyla kollajenaz perfüze ederek pankreas adacıklarını izole etmek için bir yöntemi ve adacıkları farelerden saflaştırmak için basitleştirilmiş bir yoğunluk gradyan santrifüjünü açıklar.

Kollajenaz Perfüzyonu ile Pankreas Adacıkları İzolasyonu: Pankreas Adacığı Hücrelerini İzole Etmek İçin Enzimatik Bir Yöntem

diyabet araştırma alanı için kritik zorluklar adacık β-hücre çoğalmasını düzenleyen ve β-hücre yenilenmesini teşvik etmek için yöntemler geliştirmek moleküler mekanizmalarını anlamak için vardır. Burada yüksek içeriği tarama yöntemi belirlemek ve küçük moleküllerin β-hücresi replikasyon teşvik aktivitesi sunulmuştur değerlendirmek.

Bir Yüksek içerik<em&gt; İn Vitro</em&gt; Pankreas Adacık β-hücre çoğaltma Keşif Platformu

Neonatal farelerden sağlam adacıklar izole edilmesi için bu tarifnamede, bir protokol açıklar. Pancreata kısmen yıkama ve elle toplama ile, ardından kollajenaz ile sindirilir. 20-80 adacık kümeleri birkaç adacık çalışmalar için uygun yeni doğan farelerin, gelen pankreas başına elde edilebilir.

Yenidoğan Fare Pankreas gelen Fonksiyonel Adacık etkili İzolasyonu

Bu adacık izolasyon protokolü ekroz dokuyu sindirmek için kollajenaz enjeksiyonunun yeni bir rotasını ve adacıkları farelerden arındırmak için basitleştirilmiş bir degrade prosedürünü tanımlamıştır. Enzimatik sindirim, degrade ayırma/arıtma ve adacık el toplama içerir. Başarılı yalıtım fare başına 250-350 yüksek kaliteli ve tam işlevsel adacıklar verebilir.

Farelerden Pankreas Adacık İzolasyon için Basit Bir Yüksek Verimlilik Protokolü

Bu protokol, adacık izolasyonu ve saflaştırılması için bir domuz pankreasının satın alınması için adım adım bir kılavuz sağlar.

Adacık izolasyonu için domuz pankreasının cerrahi perfüzyonu ve izolasyonu

Bu çalışma, fare pankreasındaki fonksiyonel birincil adacıqları ve asinar hücreleri verimli bir şekilde çıkaran basitleştirilmiş bir yöntem geliştirdi ve Akut Pankreatit Kaynaklı Diyabetin patogenezinde hücrelerarası iletişimi incelemek için değerli bir araç sağladı.

Farelerden Birincil Adaçik Ve Birincil Pankreas Asinar Hücrelerinin Eşzamanlı İzolasyonu İçin Basit ve Hızlı Bir Yöntem

Keşfedin Lewis farelerinden enzimatik sindirim ve yoğunluk-gradient ayrımı kullanarak yüksek saflıkta pankreas adacığı izolasyonu. Bu yöntem diyabet araştırmaları ve transplantasyon çalışmaları için üstün verim ve canlılık sağlar.

Lewis Farelerinden Pankreas Adacığı İzolyasyonu ve Arındırma, Enzimatik Sindirim ve Yoğunluk-Gradient Ayrımı Kullanılarak

Daha fazla video keşfet