Name: Yaşlanmış gözyaşı ve tükürük bezlerinden miyoepitel hücreleri ve fibroblastların tek hücre ayrımı, RNA dizileme ve izolyasyonu protokolü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: Öğrenin yaşlanmış fare gözyaşı bezlerinden tek hücre izolasyonu ve RNA dizileme yöntemini. Bu protokol miyoepitel hücreleri ve fibroblastları ayırarak yüksek hücre canlılığı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+and+aging-related+diseases%3A+from+molecular+mechanisms+to+interventions+and+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Aging and aging-related diseases: from molecular mechanisms to interventions and treatments.</a> Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 391(2022).</li>
<li>Zhang, X., Wang, L., Zheng, Y., Deng, L., Huang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+dry+eye+disease+in+the+elderly%3A+A+protocol+of+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%28Baltimore%29%22%5BJournal%5D)">Prevalence of dry eye disease in the elderly: A protocol of systematic review and meta-analysis.</a> Medicine (Baltimore). 99 (37), e22234(2020).</li>
<li>Donthineni, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aqueous-deficient+dry+eye+disease%3A+Preferred+practice+pattern+guidelines+on+clinical+approach%2C+diagnosis%2C+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Aqueous-deficient dry eye disease: Preferred practice pattern guidelines on clinical approach, diagnosis, and management.</a> Indian J Ophthalmol. 71 (4), 1332-1347 (2023).</li>
<li>Yuksel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+Affects+Lipid+Homeostasis+in+Lacrimal+Glands+by+Upregulating+Lipogenesis+and+Changing+Its+Specificity%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Aging Affects Lipid Homeostasis in Lacrimal Glands by Upregulating Lipogenesis and Changing Its Specificity.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (13), 1(2025).</li>
<li>Galletti, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ectopic+lymphoid+structures+in+the+aged+lacrimal+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Ectopic lymphoid structures in the aged lacrimal glands.</a> Clin Immunol. 248, 109251(2023).</li>
<li>Delcroix, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+Gland+Epithelial+Cells+Shape+Immune+Responses+through+the+Modulation+of+Inflammasomes+and+Lipid+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lacrimal Gland Epithelial Cells Shape Immune Responses through the Modulation of Inflammasomes and Lipid Metabolism.</a> Int J Mol Sci. 24 (5), 4309(2023).</li>
<li>Mauduit, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+transcriptomics+of+the+lacrimal+gland+features+macrophage+activity+and+epithelium+metabolism+as+key+alterations+during+chronic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Spatial transcriptomics of the lacrimal gland features macrophage activity and epithelium metabolism as key alterations during chronic inflammation.</a> Front Immunol. 13, 1011125(2022).</li>
<li>Prasad, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+Independent+and+Combined+Effects+of+Hyperosmolarity+and+Inflammatory+Stress+on+Human+Corneal+Epithelial+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Assessing the Independent and Combined Effects of Hyperosmolarity and Inflammatory Stress on Human Corneal Epithelial Cells.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (13), 47(2025).</li>
<li>Scholand, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterochronic+Parabiosis+Causes+Dacryoadenitis+in+Young+Lacrimal+Glands%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Heterochronic Parabiosis Causes Dacryoadenitis in Young Lacrimal Glands.</a> Int J Mol Sci. 24 (5), 4897(2023).</li>
<li>Molla Desta, G., Birhanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advancements+in+single-cell+RNA+sequencing+and+spatial+transcriptomics%3A+transforming+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochim+Pol%22%5BJournal%5D)">Advancements in single-cell RNA sequencing and spatial transcriptomics: transforming biomedical research.</a> Acta Biochim Pol. 72, 13922(2025).</li>
<li>Jungblut, M., Oeltze, K., Zehnter, I., Hasselmann, D., Bosio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+preparation+of+single-cell+suspensions+from+mouse+lung+tissue+using+the+gentleMACS+Dissociator%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Standardized preparation of single-cell suspensions from mouse lung tissue using the gentleMACS Dissociator.</a> J Vis Exp. (29), e1266(2009).</li>
<li>Jankelow, A., Almeida-Porada, G., Atala, A., Sawyer, S. W., Porada, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advancements+in+tissue+dissociation+techniques+for+cell+manufacturing+single-cell+analysis+and+downstream+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Recent advancements in tissue dissociation techniques for cell manufacturing single-cell analysis and downstream processing.</a> Stem Cells Transl Med. 14 (11), szaf055(2025).</li>
<li>Duong, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Rapid+Human+Lung+Tissue+Dissociation+Protocol+Maximizing+Cell+Yield+and+Minimizing+Cellular+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">A Rapid Human Lung Tissue Dissociation Protocol Maximizing Cell Yield and Minimizing Cellular Stress.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 71 (5), 509-518 (2024).</li>
<li>Koenitzer, J. R., Wu, H., Atkinson, J. J., Brody, S. L., Humphreys, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-Nucleus+RNA-Sequencing+Profiling+of+Mouse+Lung%3A+Reduced+Dissociation+Bias+and+Improved+Rare+Cell-Type+Detection+Compared+with+Single-Cell+RNA+Sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Single-Nucleus RNA-Sequencing Profiling of Mouse Lung: Reduced Dissociation Bias and Improved Rare Cell-Type Detection Compared with Single-Cell RNA Sequencing.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 63 (6), 739-747 (2020).</li>
<li>Ikeuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociation+of+murine+oral+mucosal+tissues+for+single+cell+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Dissociation of murine oral mucosal tissues for single cell applications.</a> J Immunol Methods. 525, 113605(2024).</li>
<li>Denisenko, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+assessment+of+tissue+dissociation+and+storage+biases+in+single-cell+and+single-nucleus+RNA-seq+workflows%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Systematic assessment of tissue dissociation and storage biases in single-cell and single-nucleus RNA-seq workflows.</a> Genome Biol. 21 (1), 130(2020).</li>
<li>Kahwaji, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKahwaji%2C+N+%22Universal+Precautions%22">Universal Precautions</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL. (2024).</li>
<li>Delcroix, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+First+Transcriptomic+Atlas+of+the+Adult+Lacrimal+Gland+Reveals+Epithelial+Complexity+and+Identifies+Novel+Progenitor+Cells+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The First Transcriptomic Atlas of the Adult Lacrimal Gland Reveals Epithelial Complexity and Identifies Novel Progenitor Cells in Mice.</a> Cells. 12 (10), 1435(2023).</li>
<li>Mauduit, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closer+look+into+the+cellular+and+molecular+biology+of+myoepithelial+cells+across+various+exocrine+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">A closer look into the cellular and molecular biology of myoepithelial cells across various exocrine glands.</a> Ocul Surf. 31, 63-80 (2024).</li>
<li>Zyrianova, T., Basova, L. V., Makarenkova, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+Myoepithelial+Cells+from+Adult+Murine+Lacrimal+and+Submandibular+Glands%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of Myoepithelial Cells from Adult Murine Lacrimal and Submandibular Glands.</a> J Vis Exp. (148), e59602(2019).</li>
<li>Montanari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated-Mechanical+Procedure+Compared+to+Gentle+Enzymatic+Tissue+Dissociation+in+Cell+Function+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Automated-Mechanical Procedure Compared to Gentle Enzymatic Tissue Dissociation in Cell Function Studies.</a> Biomolecules. 12 (5), 701(2022).</li>
<li>Liang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociation+of+skeletal+muscle+for+flow+cytometric+characterization+of+immune+cells+in+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Dissociation of skeletal muscle for flow cytometric characterization of immune cells in macaques.</a> J Immunol Methods. 425, 69-78 (2015).</li>
<li>Adam, M., Potter, A. S., Potter, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychrophilic+proteases+dramatically+reduce+single-cell+RNA-seq+artifacts%3A+a+molecular+atlas+of+kidney+development%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Psychrophilic proteases dramatically reduce single-cell RNA-seq artifacts: a molecular atlas of kidney development.</a> Development. 144 (19), 3625-3632 (2017).</li>
<li>Reichard, A., Asosingh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Best+Practices+for+Preparing+a+Single+Cell+Suspension+from+Solid+Tissues+for+Flow+Cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Best Practices for Preparing a Single Cell Suspension from Solid Tissues for Flow Cytometry.</a> Cytometry A. 95 (2), 219-226 (2019).</li>
<li>Volovitz, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-aggressive%2C+highly+efficient%2C+enzymatic+method+for+dissociation+of+human+brain-tumors+and+brain-tissues+to+viable+single-cells%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A non-aggressive, highly efficient, enzymatic method for dissociation of human brain-tumors and brain-tissues to viable single-cells.</a> BMC Neurosci. 17 (1), 30(2016).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+Fas+receptor+and+Fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of Fas receptor and Fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><güçlü>Malzeme</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>BSA&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4919</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 (1&nbsp; M çözümü)</td><td>BioVision</td><td>B1010-100</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenaz IV</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5138</td><td></td></tr><tr><td>Ölü Hücre Temizleme Kiti</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-090-101</td><td></td></tr><tr><td>Ölü Hücre Temizleme Kiti</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-090-101</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Roche</td><td>C756V28</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25-100MG</td><td></td></tr><tr><td>DPBS&nbsp;</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu, ultra düşük IgG</td><td>Gibco</td><td># 16250078</td><td></td></tr><tr><td>Hank'in Dengeli Tuz Çözümü (HBSS)</td><td>Corning (Thermo Fisher Scientific)</td><td>21-022-CV</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (1&nbsp; M çözümü)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0887</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran Çözeltisi</td><td>Covertus</td><td># 11695067772</td><td></td></tr><tr><td>MACS&reg; SmartStrainers (30 yaş ve mikro; m)</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-098-458</td><td></td></tr><tr><td>MACS&reg; SmartStrainers (70 yaş ve mikro; m)</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-110-916</td><td></td></tr><tr><td>Orta/F12 (DMEM/F12)</td><td>Millipore</td><td>DF-042-B</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2 1M</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M1028-100ML</td><td></td></tr><tr><td>MS Sütunları</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>NaCl (5M stok)</td><td>Invitrogen&trade;</td><td>AM9759</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin (PBS) tabletleri</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8920-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Kırmızı Kan Hücresi Lizis Çözeltisi (10 Kez;)</td><td>Miltenyi biyotec</td><td>130-094-183</td><td></td></tr><tr><td>StemPro Accutase&nbsp;</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>A1110501</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, %0,4</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-saf EDTA (0.5M, pH 8.0)</td><td>Invitrogen</td><td>15575020</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>antikorlar</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CD140a (PDGFRA) Monoklonal Antikor (APA5), APC-eFluor&trade; 780, Rat / IgG2a, kappa</td><td>eBioscience</td><td>47-1401-82; RRID:AB_2784706</td><td></td></tr><tr><td>FcBlock (CD16/CD32 Fc bloker)</td><td>BD Biosciences&nbsp;</td><td>553141; RRID:AB_394656</td><td></td></tr><tr><td>FxCycle&trade; Mor Leke</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>F10347</td><td></td></tr><tr><td>Fare CD326 (EpCAM)-APC monoklonal antikor (G8.8), sıçan IgG2a, kappa</td><td>eBioscience</td><td>17-579182; RRID:AB_2716944</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Fare</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acta2GFP&nbsp; </td><td>Dr. Ivo Kalajzic'ten nazik bir hediye</td><td>PMID: 18571490</td><td></td></tr><tr><td>PdgfraEGFP&nbsp; - B6.129S4-Pdgfratm11(EGFP)Sor/J</td><td>Jackson laboratuvarı</td><td>RRID:IMSR_JAX:007669</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Ekipman</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Invitrogen&trade; &nbsp; Kontes&ticaret; 3 Otomatik Hücre Sayacı</td><td>Fisher Scientific</td><td>A49862; RRID:SCR_026963</td><td></td></tr></tbody></table>

yaşlanmış gözyaşı ve tükürük bezlerinden miyoepitel hücreleri ve fibroblastların tek hücre ayrımı, rna dizileme ve izolyasyonu protokolü

Protocol for Single-Cell Dissociation, RNA Sequencing, and Isolation of Myoepithelial Cells and Fibroblasts from the Aged Lacrimal and Salivary Glands

Yaşlanmış gözyaşı ve tükürük bezlerinden miyoepitel hücreleri ve fibroblastların tek hücre ayrımı, RNA dizileme ve izolyasyonu protokolü

Aging of the lacrimal gland (LG) is associated with reduced tear secretion and chronic inflammation, contributing to dry eye disease. Age-related LG ...

protocol-for-single-cell-dissociation-rna-sequencing-isolation

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Organa özgü duyusal nöronların tanımlanması zordur. Hızlı Mavi izleme, hücre sıralaması için hava yollarını innerve eden nodoz nöronlarını tanımlamak için kullanılır. Sıralanmış nodoz nöronları, dizileme için yüksek kaliteli ribonükleik asidi (RNA) çıkarmak için kullanılır. Bu protokol kullanılarak, hava yoluna özgü nöronların gen ekspresyonu belirlenir.

Bir Yöntem Hedef ve Fare İzole Havayolu-innerve Duyu Nöronlar için

Bu iletişim kuralı, enterik gangliyon lazer yakalama mikrodiseksiyon (LCM) kullanarak sabitlenmemiş, taze rezeke insan bağırsak dokusundan izole yüksek bütünlük RNA örnekleri almak için hedeftir. Bu protokol flaş donmuş örnekleri insan bağırsak dokusu, cryosectioning, ethanolic boyama ve dehidratasyon, LCM, hazırlanıyor içerir ve RNA çıkarma.

Lazer-yakalama mikrodiseksiyon optimizasyonu gelen insan dokusu taze donmuş enterik gangliyon yalıtım için

Lakrimal bezi (LG), α-pürüzsüz Kas aksini (αSMA) ifade eden iki hücre türüne sahiptir: miyoepitelyal hücreler (MECs) ve perikayt. MECS ektodermal orijinli, birçok glandüler dokularda bulunan, perikayt endodermal kökeni vasküler pürüzsüz Kas hücreleri iken. Bu protokol, murine LGs 'den MECs ve perikaytları yalıtır.

Yetişkin Murine lacrimal ve submandibular bezlerden Myoepitelyal hücrelerin izolasyonu

Birincil insan tükürük bezi türevi epitelyal hücreleri izole etmek ve yetiştirmek için bir yöntem sunuyoruz. Bu hücreler onları tükürük epitelyal orijinli olmak ile tutarlı gen ifade desenleri sergiler ve Engelbreth-Holm-Swarm tümör hücrelerinden türetilen Bodrum membran matrisleri üzerinde salispheres olarak veya tedavi kültür yemekleri monolayers olarak yetişebilir.

Salispheres veya Monolayers olarak In vitro büyüme için ınsan tükürük bezlerinden tükürük epitelyal hücrelerin yalıtım

Bu protokol, fare embriyosu taze dondurulmuş bölümlerinden kıkırdak ve kemik izolasyonu için lazer yakalama mikrodizeksiyon açıklar. Kıkırdak ve kemik hızla cresyl menekşe boyama ile görselleştirilmiş ve transkripsiyonanalizi için yüksek kaliteli RNA verim hassas toplanabilir.

Gen Ekspresyonu Analizi için Fare Embriyonik Kıkırdağı ve Kemiğinin Lazer Yakalama Mikrodizmesi

Fibroblastların saf bir popülasyon elde yara onarımı ve fibrozis rollerini incelemek için çok önemlidir. Burada açıklanan yaralanmamış ve yaralı fare kalplerinden fibroblastlar ve miyofibroblastlar izole etmek için ayrıntılı bir yöntem immünofloresan, RTPCR, floresan destekli hücre sıralama ve saflık ve işlevsellik karakterizasyonu takip kollajen jel kontraksiyonu.

Erişkin Kardiyak Fibroblastlar ve Miyofibroblastların İzolasyon ve Karakterizasyonu

Mevcut protokol, sürekli büyüyen bir fare kesici dişinden, fare azı dişinden ve insan dişlerinden tek hücreli RNA-seq analizine uygun tek hücreleri izole etmek için hızlı, verimli ve nazik bir yöntem sunar.

Fare ve İnsan Dişlerinden Tek Hücrelerin Hızlı İzolasyonu

RNA bütünlüğünü korurken tek tek segmentlerin toplanmasına izin veren fare yumurta kanalının mikro dezenfeksiyonu için bir yöntem sunulmuştur. Ayrıca enzymatik olmayan ovidüktal hücre ayrışması prosedürü açıklanmıştır. Yöntemler fonksiyonel olarak farklı ovidüktal segmentlerin ve ayrışmış ovidüktal hücrelerin sonraki gen ve protein analizi için uygundur.

Murine Oviduct'un Mikroseksiyonu ve Ayrışması: Bireysel Segment Tanımlama ve Tek Hücre İzolasyonu

Bu makale, tek çekirdekli RNA dizilimi amacıyla murin koku alma epitelinin diseksiyonu ve dissosiyasyonu için kolaylaştırılmış bir protokol sağlar.

Tek çekirdekli süspansiyonlar için fare koku alma epitelinin hızlı diseksiyonu ve ayrışması

Bu protokol, fare oküler lens epiteli ile fiber hücre yığın kütlesinin ayrılmasını, ardından RNA izolasyonunu ve qPCR analizini detaylandırır. Bu yöntem, epitel hücrelerinde ve farklılaşmış lif hücrelerinde transkriptom ve biyolojik süreçlerin daha ayrıntılı bir analizi için lens hücresi bölmelerinin ayrılmasına izin verir.

Fare Oküler Lens Epitelinden ve Fiber Hücre Yığın Kitlelerinden RNA İzolasyonu

Öğrenin yaşlanmış fare gözyaşı bezlerinden tek hücre izolasyonu ve RNA dizileme yöntemini. Bu protokol miyoepitel hücreleri ve fibroblastları ayırarak yüksek hücre canlılığı sağlar.

Yaşlanmış gözyaşı ve tükürük bezlerinden miyoepitel hücreleri ve fibroblastların tek hücre ayrımı, RNA dizileme ve izolyasyonu protokolü (Video) | JoVE Journal

Yaşlanmış gözyaşı ve tükürük bezlerinden miyoepitel hücreleri ve fibroblastların tek hücre ayrımı, RNA dizileme ve izolyasyonu protokolü

Daha fazla video keşfet