Name: Hiyerarşik olarak gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinde oksijen dağıtımı uygulamaları için sentez, hemoglobin kapsülasyonu ve biortogonal PEGilasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-08T13:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Keşfedin, hemoglobin kapsüllenmesi ve biyortogonal PEGilasyon kullanarak hiyerarşik gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinin sentez protokolünü. Bu yöntem, oksijen taşıyıcı sistemler için yüksek verimlilik ve stabilite sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>2-amino-1,4-benzenedikarboksilik asit&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>381071-25G</td><td></td></tr><tr><td>4-(2-Hidroksietil)piperazin-1-etansülfonik asit</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>H3375-100G</td><td></td></tr><tr><td>Aseton (%99)</td><td>VWR International (S&oslash; borg, DK)</td><td>23J244030</td><td></td></tr><tr><td>Bisinkoninik asit protein testi &nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific (Roskilde, DK)</td><td>23235</td><td></td></tr><tr><td>Sığır kanı&nbsp;</td><td>SSI Diagnostica A/S (Hiller&oslash; d, DK)</td><td>77667</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj tüpü</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc (Massachusetts, ABD)</td><td>75009903</td><td>Megafuge ST Plus serisi&nbsp;</td></tr><tr><td>Döteryum oksit</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>151882</td><td></td></tr><tr><td>Dibenzosiskooktin-polietilen glikol</td><td>BroadPharm</td><td>BP-23949</td><td></td></tr><tr><td>Dodekanoik asit&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>L556-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s modifiye kartal' s orta&eksi; yüksek glikoz & nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Etanol (%100)</td><td>VWR International (S&oslash; borg, DK)</td><td>24L044013</td><td></td></tr><tr><td>Fourier dönüşümü kızılötesi spektroskopisi&nbsp;</td><td>Bruker (Billerica, ABD)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hemox analizörü&nbsp;</td><td>TSC Bilimsel Kredi Komisyonu (PA, ABD)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İnsan sitratlı plazması</td><td>TebuBio</td><td>SER-PLP25</td><td></td></tr><tr><td>Hidroklorik asit (%37)</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>320331-500ML</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ yazılımı</td><td>Ulusal Sağlık Enstitüleri (ABD)</td><td></td><td>Sürüm 1.47t</td></tr><tr><td>Dantelli-karbon Cu ızgarası (300 ağ)</td><td>Agar Scientific Ltd., (Stansted Essex, Birleşik Krallık)</td><td>AGS166-3H</td><td></td></tr><tr><td>Manyetik karıştırıcı</td><td>IKA-Werke GmbH & Şirket KG (,DE)</td><td>Tanım. Hayır: 0010011496</td><td></td></tr><tr><td>MestReNova sofeware</td><td>Mestrelab Araştırmaları (İspanya)</td><td></td><td>Sürüm 12</td></tr><tr><td>Micromeritics Tristar yüzey alanı analizörü</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc</td><td>ASAP 2020 Plus</td><td></td></tr><tr><td>Mini santrifüj</td><td>Eppendorf Nordic (H&oslash; rsholm, DK)</td><td>Katalog No.&nbsp; 5452000010</td><td></td></tr><tr><td>Fare serumu</td><td>Yenilikçi Araştırma (Novi, MI, ABD)</td><td>IGMSCD1SER10ML</td><td></td></tr><tr><td>Muffle furnace&nbsp;</td><td>Nabertherm GmbH (Bremen, DE)</td><td>Muffle fırını LE 6/11</td><td></td></tr><tr><td>N,N&prime;-dimetilformamid (%99,9)</td><td>VWR International (S&oslash; borg, DK)</td><td>250131a008</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop 2000c ekipman & nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nükleer manyetik rezonans&nbsp;</td><td>Bruker (Billerica, ABD)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>O2 meter&nbsp;</td><td>PreSens (Regensburg, Almanya)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Origin 2022 yazılımı</td><td>OriginLab Corporation (MA, ABD)</td><td></td><td>Sürüm 2022&nbsp;</td></tr><tr><td>Oksijen sensörü</td><td>PreSens (Regensburg, DE)</td><td>OXY-1 ST izi</td><td></td></tr><tr><td>Fosfatla tamponlanmış tuzlu sıvı&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>P4417-50TAB</td><td></td></tr><tr><td>Plaka okuyucu</td><td>Tecan Group Ltd.&nbsp; (M&auml; nnedorf, CH)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Potasyum heksasiyanoferat</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>60299-100G</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum hidroksit</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>221473-500G</td><td></td></tr><tr><td>Toz X-ışını difraksiyonu&nbsp;</td><td>Malvern Panalytical Ltd., (Malvern, Birleşik Krallık)</td><td></td><td>Model: Malvern Panalytical Aeris Research 600W XRD toz ölçümleri için (2020 yayımlandı)</td></tr><tr><td>Yuvarlak tabanlı basınç kabı&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>SYNP170004-1EA</td><td></td></tr><tr><td>Taramalı elektron mikroskopisi&nbsp;</td><td>FEI Şirketi (Hillsboro, ABD)</td><td>Çift Işınlı FEI Helios Nanolab 600</td><td></td></tr><tr><td>sodyum klorid&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>71376</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum ditionit&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>71699-250G</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum dodesil sülfat&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>L4509-100G</td><td></td></tr><tr><td>Synthware&trade; yuvarlak tabanlı basınç kabı</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>SYNP170003</td><td></td></tr><tr><td>Tert-butil nitrit&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>20370-100ml-F</td><td></td></tr><tr><td>Tetrahidrofuran (%99,7)</td><td>VWR International (S&oslash; borg, DK)</td><td>201022A004</td><td></td></tr><tr><td>Termoshaker</td><td>Grant Instruments (Cambridge) Ltd (Birleşik Krallık)</td><td>PHMT-PSC18 (01012015020119)</td><td></td></tr><tr><td>Geçirim elektron mikroskopisi&nbsp;</td><td>FEI Şirketi (Hillsboro, ABD)</td><td>FEI Tecnai T20</td><td></td></tr><tr><td>Trimetilsilil azid&nbsp;</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>155071-10G</td><td></td></tr><tr><td>TSC HEMOX DAQ Sistemi</td><td>TSC Bilimsel Kredi Komisyonu (PA, ABD)</td><td></td><td>Hemox analizör yazılımı&nbsp;</td></tr><tr><td>Ultrosound sonikator&nbsp;</td><td>Branson Ultrasonics Corporation (Danbury, ABD)</td><td>SKU: 2410240003</td><td></td></tr><tr><td>UV-Vis spektrofotometresi&nbsp;</td><td>Shimadzu (Kyoto, JP)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vakumlu fırın&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc (Massachusetts, ABD)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Nano ZS</td><td>Malvern Panalytical Ltd., (Malvern, Birleşik Krallık)</td><td>Seri NUMARA. MAL1188530</td><td></td></tr><tr><td>Zirkonyum(IV) klorür</td><td>Merck Yaşam Bilimleri A/S (S&oslash; borg, DK)</td><td>357405-100G</td><td></td></tr></tbody></table>

hiyerarşik olarak gözenekli uio-66 nanopartiküllerinde oksijen dağıtımı uygulamaları için sentez, hemoglobin kapsülasyonu ve biortogonal pegilasyon

Synthesis, Hemoglobin Encapsulation and Biorthogonal PEGylation in Hierarchically Porous UiO-66 Nanoparticles for Oxygen Delivery Applications

Hiyerarşik olarak gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinde oksijen dağıtımı uygulamaları için sentez, hemoglobin kapsülasyonu ve biortogonal PEGilasyon

Hemoglobin-based oxygen carriers (HBOCs) are an important platform for oxygen delivery to mitigate hypoxia in several biomedical contexts. However, free ...

Bu araştırmanın amacı, hemoglobin kapsülasyonu ve oksijen teslimatı için kararlı bir metal-organik çerçeve, MOF tabanlı nanopartikül tanımlamaktır. Hiyerarşlı gözenekli morf, hemoglobin kapsülasyonu için post boyut sınırlamasını aşabilir ve yüzey popülasyonu fizyolojik ortamlarda parçacık kararlılığını artırabilir. Başlamak için, hazırlanmış hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66'yı 50 miligram hassas şekilde tartarak nanopartikülleri 25 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişeye aminleyin.Şişeye 10 mililitre tetrahidrofuran ekleyin. Sonra karışımı beş dakika ultra sonikle geçirerek parçacıkların tamamen dağıtılması sağlanır ve eşit opak bir süspansiyon elde edilir. Yuvarlak tabanlı şişeyi 400 RPM'ye ayarlanmış manyetik karıştırıcı üzerinde buzlu su banyosuna yerleştirin.Cam şırınga kullanarak, beş dakika boyunca damla 0,4 mililitre tert butil nitrit ekleyin ve sıcaklığı beş derece Celsius'un altında tutun. Aynı soğuk koşullarda hemen 0,35 mililitre trimetil SL azidi damla olarak ekleyin. Hafif bir kabarcık oluşabilir ve bu nitrozasyon ilerlemesini gösterebilir.Sonra buzlu su banyosunu ışıktan korumak için alüminyum folyoya sarın. Reaksiyon karışımını buzlu su banyosunda gece boyunca karıştırmaya devam edin. Ertesi gün, ürünü gösterildiği gibi yıkayıp kurutun.Sonra kimyasal dönüşümü doğrulamak için FTIR spektroskopisi kullanın. Beş miligram hiyerarşik gözenekli UIO 66 azid nanopartiküllerini iki mililitrelik bir santrifüj tüpüne aktarın. 0,5 mililitre HEPES tamponu ekleyin ve iki ila beş dakika sonikasyon yapın.20 miligram/mililitre hemoglobin içeren 0,5 mililitre HEPES tamponu ekleyin ve nanopartikülleri tamamen dağıtmak için tüpü birkaç kez nazikçe ters çevirin. Şimdi tüpü termo çalkalayıcıya koyup oda sıcaklığında 1.000 RPM'de iki saat boyunca çalkalayarak kuluçka yapın. İnkubasyondan sonra, tüpü oda sıcaklığında beş dakika boyunca 13.500 G'de santrifüjlenerek hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66 azid nanopartiküllerini pellet edilir.Sonra süpernatantı dikkatlice toplayarak hapsedilmemiş hemoglobinin niceliğini ölçerin. Pelleti bir mililitre ultrasaf suyla nazikçe üç kez yuplayın; pipetle yukarı aşağı ve gevşek emilmiş hemoglobini çıkarın. Sonra her yıkamanın süpernatanını dikkatlice toplayarak hapsolmuş hemoglobinin miktarını ölçerin.Son peleti 0,5 mililitre ultra saf suya yeniden süsleyip karakterizasyondan önce buzdolabında saklayın. Toplanan süpernatantlarda hapsolmuş hemoglobini belirlemek için sodyum defne sülfat hemoglobin testini kullanın. Her üst panelden 10 mikrolitre pipetle 96 delikli mikroplakaya alın.100 mikrolitre sodyum defne sülfat reaktifi ekleyin ve oda sıcaklığında karanlıkta beş dakika kuluçka yapın. Ultraviyole görünür spektrofotometre kullanarak, 412 nanometrede absorbansı ölçün. Daha sonra, HEPES tamponunda hemoglobin stokunun seri seyreltmesini hazırlayarak standart bir eğri oluşturulur.Hazırlanan seyreltmeleri hazırlanmış 96 kuyu plakaya aktararak absorbans okumalarını hemoglobin konsantrasyonlarına dönüştürmek için standart bir eğri oluşturulur. Hiyerarşik olarak gözenekli olan hemoglobinin 10 miligramını, UIO 66 azid nanopartiküllerini, 0,5 mililitre ultrasaf su içeren iki mililitrelik santrifüj tüpüne aktarın ve iki ila beş dakika boyunca sonikat yapın. Polietilen glikol ile değiştirilerek polietilen glikol ile birlikte 20 miligram dibenzosiklooktan ekleyin; böylece polietilen glikol ile nanopartiküllerin eşit bir oranı elde edilir.Karışım homojenleşene kadar tüpü nazikçe vortex yapın. Tüpü termo sallayıcıya koyun ve oda sıcaklığında, 1.000 RPM'de bir saat boyunca sallayarak kuluçka yapın. Sonra tüpü dört derece Celsius sıcaklığında tutulan bir buzdolabına aktararak gece boyunca reaksiyon veriyor.Tüpü oda sıcaklığında 12.000 G'de beş dakika boyunca santrifüjlenerek polietilen glikol modifiyeli, hemoglobin yüklenmiş, hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66 nanopartiküllerini pelet et. Sonra, reaktif olmayan polietilen glikol içeren süpernatantı atabilirsiniz. Peleti iki mililitre ultrasaf suyla üç kez yıkayarak yukarı aşağı pipet ve santrifüj yaparak daha önce gösterilen koşullarda santrifüj yapın.Arıtılmış pegile hemoglobin yüklü, hiyerarşik olarak gözenekli, UIO 66 polietilen glikol nanopartiküllerini iki mililitre ultra saf suya yeniden askıya alın. Süspansiyonu dört derece Celsius'ta sakla. Ortaya çıkan kolloid homojen ve hafif opalesans görünür, bu da iyi bir dispersyon stabilitesini gösterir.Daha sonra dinamik ışık saçılması (DLS) ile başarılı pesilasyonu doğrulayın. Yüzey amino grupları başarıyla azidlere dönüştürüldü. Bu, hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66 azid nanopartiküllerinin FTIR spektrumunda 2.122 ters santimetre olan karakteristik asimetrik azid, uzanma bandının ortaya çıkmasıyla gösterilmiştir.Bu bant, hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66 amin nanopartiküllerinde yoktu. Hemoglobin kapsülasyonu, belirgin sarıdan kırmızıya renk değişimiyle görsel olarak gösterildi. Hemoglobin yüklendikten sonra azot alımı azalmış, bu da mezoporların hemoglobin molekülleri tarafından işgal edildiğini gösterir.Hiyerarşik olarak gözenekli UIO 66 azid nanopartiküllerinin zeta potansiyeli, hemoglobin kapsüllenmesinden sonra 42,9 milivolttan 20,4 milivolt'a düştü. Başarılı polietilen glikol konjugasyonu, azidlerin 2.122 ters santimetre geride titreşiminin kaybolması ve FTIR spektrumunda polietilen glikol ilişkili sinyallerin ortaya çıkmasıyla doğrulandı. DLS analizi, pegilasyondan sonra hidrodinamik çapın yaklaşık 114,9'dan 140,8 nanometreye yükseldiğini ve düşük PDI korunduğunu gösterdi.Bu parçacık, hiyerarşik olarak gözenekli morf nanopartiküllerinin sentezini, hemoglobin kapsülasyonunu, yüzey pekülasyonunu ve oksijen salınım fonksiyonelliğinin değerlendirilmesini sağlar. Bu protokol kullanılarak, in vitro oksijen salınımı ve nanopartikül biyouyumluluk analizi dahil olmak üzere ek fiziksel kimyasal karakterizasyon ve fonksiyonel çalışma yapılabilir. Gelecekteki çalışmalar, bileşenlerin madde bozunmasını önlemek gibi nedenlerle hemoglobin işlevselliğini daha uzun süreli korumaya odaklanabilir.

synthesis-hemoglobin-encapsulation-biorthogonal-pegylation

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Biz fosforesans giderici ve biyolojik sistemlerde oksijen görüntüleme için porfirin-tabanlı dendritik nanosensors gözden tasarım ilkeleri oksijen ölçümleri sunuyoruz.

Biyolojik Sistemleri Oksijen Görüntüleme Fosforlu Nanoprobes sentezi ve Kalibrasyon

Bu prosedür bioaerogels oluşturulması için (SiO2), sol-jel, işlemi, bu jelleri silis sitokrom c (cyt. C) kapsül haline getirilmesi ve hızlı bir şekilde bir gaz-fazlı reaksiyon ile nitrik oksit (NO) tanımak için bu bioaerogels kullanımı açıklamaktadır. protokol Bu tip biyosensörlerde veya diğer biyoanalitik cihazlar gelecekteki gelişimi yardımcı olabilir.

Sitokrom Kapsüllenen<em&gt; C</em&gt; Metal Nanopartiküller olmadan Silika Aerojel Nanoarchitectures Gaz faz biyoaktivitesinin İstinat ederken

Metal organik çerçeveler gaz depolama ve heterojen kataliz, ama tipik sentez yöntemleri sonuç akıllı malzeme dahil etmek zordur gevşek tozlar içinde etkilidir. Biz bir yöntem solvothermal sentezi sırasında MOF Açıkorur filmleri kumaşlar üzerine sonuçlanan ilk kaplama kumaş ALD metal oksitler ile göstermek.

Solvothermal sentez MIL-96 ve UIO-66-NH2 atom katman üzerinde Metal oksit kaplama Fiber paspaslar üzerine yatırılır.

Burada, tasarım ve parçalanabilir taşıyıcıları için sinir büyüme faktörü (NGF) olarak nanostructured gözenekli silisyum (PSI) filmleri imal için bir protokol mevcut. Nöronal farklılaşma ve PC12 hücreleri ve fareler dorsal kök gangliyon (DRG) nöronlar akıbet üzerine tedavi NGF yüklü PSi taşıyıcıları ile karakterizedir.

Gözenekli silisyum filmleri sinir büyüme faktörü taşıyıcı olarak tasarlama

Fusogenic gözenekli Silisyum nano tanecikleri etkili tüp bebek ve içinde vivo Oligonükleotid tesliminde sentezi göstermektedir. Gözenekli Silisyum nano tanecikleri tarafından fusogenic lipidler kabuk oluşturmak için ekstrüzyon ile kaplı çekirdek oluşturmak üzere siRNA ile yüklenir. Hedefleme yan functionalization ve parçacık karakterizasyonu yer almaktadır.

Functionalization, malzemelerin ve Fusogenic gözenekli Silisyum nano tanecikleri'Oligonükleotid dır

Protokol, standart bir floresan mikroskobunda oksijenasyonlarının ve hücre ölümlerinin çok parametrik analizini kullanarak biyobaskı için yüksek verimli sferoid üretimini tanımlar. Bu yaklaşım, sferoidlerin yaşayabilirliğini kontrol etmek ve 3D doku, tümör mikroçevresi ve başarılı (mikro) doku biyofabrikasyonunun modellenmesinde önemli olan standardizasyonu gerçekleştirmek için uygulanabilir.

Çok Hücreli Sferoidlerin Uygun Fiyatlı Oksijen Mikroskobu Destekli Biyofabrikasyonu

Bu protokol, tek emülsiyon formülasyonuna dayalı kolay mikroakışkan teknolojisi ile poli(laktik-ko-glikolik asit) bazlı yüksek açık gözenekli mikrosferlerin (HOPM'ler) üretimini açıklamaktadır. Bu mikrosferlerin doku mühendisliği ve ilaç taramasında potansiyel uygulamaları vardır.

Mikroakışkan Teknoloji ile Yüksek Açık Gözenekli Mikrosferlerin ( HOPM'ler ) Üretilmesi

Hiyerarşik ve bimodal gözenek boyutu dağılımına sahip nanogözenekli altın, elektrokimyasal ve kimyasal alaşım gidermeyi birleştirerek üretilebilir. Alaşımın bileşimi, alaşım giderme işlemi ilerledikçe EDS-SEM incelemesi ile izlenebilir. Malzemenin yükleme kapasitesi, malzeme üzerindeki protein adsorpsiyonunu inceleyerek belirlenebilir.

Nanogözenekli Altın'da Hiyerarşik Bir Tasarım Üretmek için Çok Yönlü Teknik

Post-sentetik ligand değişimi (PSE), fonksiyonel grupları metal-organik çerçevelere (MOF'ler) kurmak için çok yönlü ve güçlü bir araçtır. MOF'ların triazol ve tetrazol fonksiyonelleştirilmiş ligandlar içeren çözeltilere maruz bırakılması, bu heterosiklik moietileri PSE süreçleri yoluyla Zr-MOF'lara dahil edebilir.

Post-sentetik ligand değişimi yoluyla triazol ve tetrazol-fonksiyonel Zr-bazlı metal-organik çerçevelerin sentezi

Bu makalede, jelatinin termoters özelliklerinden faydalanan MOF-jelatin hidrojellerinin hazırlanmasını sunuyoruz; bu özellikler koaservasyon yoluyla faz ayrılmasıyla ilişkilidir. Bu hidrojel kompozitler, yüksek MOF yüklemesi, büyük gözeneklilik ve jelatin matrisi içinde MOF parçacıklarının iyi bir mekansal dağılımı sergiler.

Metal-organik çerçeve-jelatin hidrojellerinin koaservasyon yoluyla hazırlanması

Keşfedin, hemoglobin kapsüllenmesi ve biyortogonal PEGilasyon kullanarak hiyerarşik gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinin sentez protokolünü. Bu yöntem, oksijen taşıyıcı sistemler için yüksek verimlilik ve stabilite sağlar.

Hiyerarşik olarak gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinde oksijen dağıtımı uygulamaları için sentez, hemoglobin kapsülasyonu ve biortogonal PEGilasyon (Video) | JoVE Journal

Hiyerarşik olarak gözenekli UiO-66 nanopartiküllerinde oksijen dağıtımı uygulamaları için sentez, hemoglobin kapsülasyonu ve biortogonal PEGilasyon

Daha fazla video keşfet