Name: Boyut Dışlama Kromatografisi ile Küçük Ekstrasellüler Veziküllerin Fare, İskelet Kası ve Kemik Iliğinden İzole Edilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-23T12:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: Öğrenin, fare iskelet kası ve kemik iliğinden boyut dışlama kromatografisi ile küçük ekstrasellüler vezikül izolasyonunu. Bu yöntem, yüksek saflıkta sEV elde ederek moleküler ve fonksiyonel analizleri destekler.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Whitham, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+provide+a+means+for+tissue+crosstalk+during+exercise.">Extracellular vesicles provide a means for tissue crosstalk during exercise.</a> Cell Metab. 27 (1), 237-251.e4 (2018).</li><li>Kumar, M. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+as+tools+and+targets+in+therapy+for+diseases.">Extracellular vesicles as tools and targets in therapy for diseases.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 27 (2024).</li><li>Fonseka, P., Mathivanan, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles+biogenesis,+cargo+sorting+and+implications+in+disease+conditions.">Extracellular vesicles biogenesis, cargo sorting and implications in disease conditions.</a> Cells. 12 (2), (2023).</li><li>Taraboletti, G., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioavailability+of+VEGF+in+tumor-shed+vesicles+depends+on+vesicle+burst+induced+by+acidic+pH.">Bioavailability of VEGF in tumor-shed vesicles depends on vesicle burst induced by acidic pH.</a> Neoplasia. 8 (2), 96-103 (2006).</li><li>Dakup, P. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+and+opportunities+in+state-of-the-art+proteomics+analysis+for+biomarker+development+from+plasma+extracellular+vesicles.">Challenges and opportunities in state-of-the-art proteomics analysis for biomarker development from plasma extracellular vesicles.</a> Proteomics. , (2025).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EV-origin:+Enumerating+the+tissue-cellular+origin+of+circulating+extracellular+vesicles+using+exLR+profile.">EV-origin: Enumerating the tissue-cellular origin of circulating extracellular vesicles using exLR profile.</a> Comput Struct Biotechnol J. 18, 2851-2859 (2020).</li><li>Shero, J. A., Lindholm, M. E., Sandri, M., Stanford, K. I. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+as+a+mediator+of+interorgan+crosstalk+during+exercise:+Implications+for+aging+and+obesity.">Skeletal muscle as a mediator of interorgan crosstalk during exercise: Implications for aging and obesity.</a> Circ Res. 136 (11), 1407-1432 (2025).</li><li>Vanhie, J. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+exercise-+and+high-fat+diet-induced+bone+marrow+extracellular+vesicles+in+stress+hematopoiesis.">The role of exercise- and high-fat diet-induced bone marrow extracellular vesicles in stress hematopoiesis.</a> Front Physiol. 13, 1054463 (2022).</li><li>Pinto, A. C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploiting+the+therapeutic+potential+of+contracting+skeletal+muscle-released+extracellular+vesicles+in+cancer:+Current+insights+and+future+directions.">Exploiting the therapeutic potential of contracting skeletal muscle-released extracellular vesicles in cancer: Current insights and future directions.</a> J Mol Med (Berl). 102 (5), 617-628 (2024).</li><li>Welsh, J. A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+information+for+studies+of+extracellular+vesicles+(MISEV2023):+From+basic+to+advanced+approaches.">Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV2023): From basic to advanced approaches.</a> J Extracell Vesicles. 13 (2), e12404 (2024).</li><li>De Sousa, K. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+extracellular+vesicles+and+future+directions+in+diagnosis+and+therapy.">Isolation and characterization of extracellular vesicles and future directions in diagnosis and therapy.</a> Wiley Interdiscip Rev Nanomed Nanobiotechnol. 15 (1), e1835 (2023).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+simplified+dichotomic+size-exclusion+chromatography+for+isolating+extracellular+vesicles+toward+clinical+applications.">Establishment of a simplified dichotomic size-exclusion chromatography for isolating extracellular vesicles toward clinical applications.</a> J Extracell Vesicles. 10 (11), e12145 (2021).</li><li>Ahmadian, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+storage+and+freezing+protocols+for+extracellular+vesicles:+A+systematic+review.">Different storage and freezing protocols for extracellular vesicles: A systematic review.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 453 (2024).</li><li>Watanabe, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+releases+extracellular+vesicles+with+distinct+protein+and+microRNA+signatures+that+function+in+the+muscle+microenvironment.">Skeletal muscle releases extracellular vesicles with distinct protein and microRNA signatures that function in the muscle microenvironment.</a> PNAS Nexus. 1 (4), pgac173 (2022).</li><li>Magalhaes-Gama, F., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+cell-derived+extracellular+vesicles+in+peripheral+blood+and+bone+marrow+of+B-cell+acute+lymphoblastic+leukemia+pediatric+patients:+Proof-of-concept+study.">Exploring cell-derived extracellular vesicles in peripheral blood and bone marrow of B-cell acute lymphoblastic leukemia pediatric patients: Proof-of-concept study.</a> Front Immunol. 15, 1421036 (2024).</li><li>Potter, D. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell-derived+extracellular+vesicles+attenuate+pulmonary+vascular+permeability+and+lung+injury+induced+by+hemorrhagic+shock+and+trauma.">Mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles attenuate pulmonary vascular permeability and lung injury induced by hemorrhagic shock and trauma.</a> J Trauma Acute Care Surg. 84 (2), 245-256 (2018).</li><li>Osteikoetxea, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+detergent+sensitivity+of+extracellular+vesicle+subpopulations.">Differential detergent sensitivity of extracellular vesicle subpopulations.</a> Org Biomol Chem. 13 (38), 9775-9782 (2015).</li><li>Kim, T., Hong, J. W., Lee, L. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+methods+of+isolation+and+purification+of+extracellular+vesicles.">Efficient methods of isolation and purification of extracellular vesicles.</a> Nano Converg. 12 (1), 45 (2025).</li><li>Bracht, J. W. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+of+size-exclusion+chromatography+column+affects+recovery,+purity,+and+miRNA+cargo+analysis+of+extracellular+vesicles+from+human+plasma.">Choice of size-exclusion chromatography column affects recovery, purity, and miRNA cargo analysis of extracellular vesicles from human plasma.</a> Extracell Vesicles Circ Nucl Acids. 5 (3), 497-508 (2024).</li><li>Mo, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicle-mediated+bidirectional+communication+between+the+liver+and+other+organs:+Mechanistic+exploration+and+prospects+for+clinical+applications.">Extracellular vesicle-mediated bidirectional communication between the liver and other organs: Mechanistic exploration and prospects for clinical applications.</a> J Nanobiotechnology. 23 (1), 190 (2025).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL santrifüj tüpü</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.300</td><td>Protokol boyunca kullanılan genel mikrosantrifüj tüpü</td></tr><tr><td>1.5 mL düşük protein bağlanma tüpü</td><td>Sarstedt</td><td>72.706.600</td><td>EV işleme, SEC fraksiyon toplama ve depolama için kullanılır</td></tr><tr><td>0.2 mL PCR tüpü</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-222-262</td><td>Delinmiş tüp kemik iliği ekstraksiyon kurulumu için kullanılır</td></tr><tr><td>16 G iğne</td><td>BD</td><td>305197</td><td>0.2 mL PCR tüpünü delmek için kullanılır</td></tr><tr><td>30 &mikron hücre süzgeci</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-098-458</td><td>İskelet kası örnek filtrasyonu için kullanılır</td></tr><tr><td>70% etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1.11727</td><td>Cımbızları sterilize etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Biyolojik güvenlik kabini</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Steril doku işleme için kullanılır</td></tr><tr><td>Kemik kesme aleti</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-001-976</td><td>Femuru ve tibiayı ayırmak ve iliği açığa çıkarmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Boğa serum albümini (BSA)</td><td>BioShop</td><td>ALB001</td><td>Western blot blokajı ve antikor seyreltme için kullanılır</td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür dihidrat (CaCl2&middot;2H2O)</td><td>BioShop</td><td>CCL302</td><td>HEPES tamponu hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Karbon kaplı bakır ızgara, 200-mesh</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>930342</td><td>TEM örnek hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Santrifüj filtresi, 100 kDa MWCO</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC810096</td><td>EV konsantrasyonu için kullanılır</td></tr><tr><td>Kollajenaz D</td><td>Roche</td><td>11088858001</td><td>İskelet kası enzimatik sindirimi için kullanılır</td></tr><tr><td>Cryovial</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.300</td><td>Dokunun ve kemiğin depolanması için kullanılır</td></tr><tr><td>Deiyonizasyonlu su (ultra saf)</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Tampon hazırlığı ve TEM yıkama adımları için kullanılır</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Roche</td><td>11284932001</td><td>İskelet kası enzimatik sindirimi için kullanılır</td></tr><tr><td>Kuru buz</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Örnek soğutma ve taşıma için kullanılır</td></tr><tr><td>Gelişmiş kimilüminesans substratı</td><td>Biorad</td><td>1705061</td><td>Western blot tespiti için kullanılır</td></tr><tr><td>Filtre ünitesi, 0.22 &mikron</td><td>Sarstedt</td><td>83.3941.501</td><td>Uygulanabilir olduğunda PBS'yi filtrelemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Forseps / cımbız</td><td>MilliporeSigma</td><td>F3892</td><td>Doku işleme için kullanılır</td></tr><tr><td>Glütaraldehit</td><td>NA</td><td>NA</td><td>TEM fiksasyonu için kullanılır</td></tr><tr><td>Glisin</td><td>NA</td><td>NA</td><td>TEM ızgara yıkama adımlarında kullanılır</td></tr><tr><td>Hank'in Dengeli Tuz Çözeltisi (HBSS)</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td>DNase I stok hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>BioShop</td><td>HEP001.500</td><td>HEPES-NaOH tamponu hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>At kestanesi peroksidaz-konjuge streptavidin</td><td>Thermo Fisher</td><td>S911</td><td>Western blot tespiti için kullanılır</td></tr><tr><td>Kimilüminesans için görüntüleme sistemi</td><td>Biorad</td><td>12003153</td><td>Western blot membranlarını görüntülemek için kullanılır</td></tr><tr><td>KCl</td><td>BioShop</td><td>POC308</td><td>HEPES tamponu hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Magnezyum klorür (MgCl2)</td><td>BioShop</td><td>MAG510.500</td><td>HEPES tamponu hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>2-Metilbütan</td><td>Thermo Fisher</td><td>78-78-4</td><td>İskelet kası ani dondurma için kullanılır</td></tr><tr><td>Mikrogram denge</td><td>MilliporeSigma</td><td>Z741359</td><td>Dokunun ve iliğin tartılması için kullanılır</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>BioShop</td><td>SOD004.1</td><td>HEPES tamponu hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Nano-parçacık izleme analizi cihazı</td><td>Malvern Panalytical</td><td>NanoSight NS300</td><td>NanoSight NS300, parçacık boyutlandırma ve sayma için kullanılır</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>BioShop</td><td>SHY500.500</td><td>pH ayarlaması için kullanılır</td></tr><tr><td>Nitroselüloz membran</td><td>BioRad</td><td>1704271</td><td>Western blot transferi için kullanılır</td></tr><tr><td>Salınımlı karıştırıcı</td><td>Labnet</td><td>S0500</td><td>Enzimatik sindirim sırasında kullanılır</td></tr><tr><td>P1000 pipet</td><td>MilliporeSigma</td><td>FA10006M-1EA</td><td>Doku transferi için kullanılır</td></tr><tr><td>Pipet ucu, 1 mL</td><td>Sarstedt</td><td>70.3050.275</td><td>Dokunun ve doku parçacıklarının transferi için ucun açılması genişletilmiştir</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin (PBS)</td><td>Wisent</td><td>INC 811.012-FL</td><td>Protokol boyunca kullanılır; ayrıca SEC eşikleme ve elüsyon için kullanılır</td></tr><tr><td>Fosfataz inhibitörü</td><td>MilliporeSigma</td><td>4906845001</td><td>Western blot lizası hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Petri kabı</td><td>MilliporeSigma</td><td>CLS351146</td><td>Kemik iliği hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>Poliakrilamid jel, 4-20% gradyan lekesiz</td><td>BioRad</td><td>4561094</td><td>Western blot ayrımı için kullanılır</td></tr><tr><td>Proteaz inhibitörü</td><td>MilliporeSigma</td><td>11697498001</td><td>Western blot lizası hazırlığı için kullanılır</td></tr><tr><td>RPMI-1640 ortamı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7388-500ML</td><td>Takviye edilmemiş; FBS veya antibiyotik içermez</td></tr><tr><td>RIPA tampon

boyut dışlama kromatografisi ile küçük ekstrasellüler veziküllerin fare, İskelet kası ve kemik iliğinden İzole edilmesi

Isolation of Small Extracellular Vesicles from Murine Skeletal Muscle and Bone Marrow by Size-Exclusion Chromatography

Boyut Dışlama Kromatografisi ile Küçük Ekstrasellüler Veziküllerin Fare, İskelet Kası ve Kemik Iliğinden İzole Edilmesi

Small extracellular vesicles (sEVs) are nanosized, lipid-bound particles that mediate intercellular communication through the transfer of proteins, ...

isolation-small-extracellular-vesicles-from-murine-skeletal-muscle

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kaynak: Watson, D.C., ve diğerleri. Escherichia coli ve Diğer Bakterilerden Hücre Dışı Veziküllerin Ölçeklenebilir İzolasyonu ve Saflaştırılması. J. Vis. Uzm. (2021)Bu video, bakteriyel hücre dışı vezikülleri (EV'ler) bir bakteri kültürü filtratından izole etmek için gözenekli reçine boncukları ile boyut dışlama kromatografisinin kullanımını göstermektedir. Daha büyük EV'ler reçine gözeneklerini atlayarak erken ayrışırken, daha küçük proteinler gözeneklere girer ve daha sonra ayrışır.

Boyut Dışlama Kromatografisi Kullanılarak Bakteriyel Hücre Dışı Veziküllerin İzolasyonu 

Bu videoda, bakterilerden türetilen heterojen bir dış zar vezikülleri veya OMV popülasyonunu ayırmak için bir teknik olan boyut dışlama kromatografisini gösteriyoruz. Bu veziküller nano boyutlu küresel yapılardır ve Boyut Dışlama Kromatografisi ile boyutlarına göre büyük ve küçük alt popülasyonlara ayrılır.

Bakteri hücre dışı veziküllerin boyut dışlama kromatografisine dayalı ayrılması: Gram negatif bakteriyel dış zar veziküllerinin heterojen popülasyonunu boyutlarına göre ayırmak için bir teknik

Bu video, Mycobacterium tuberculosis'in (Mtb) kültür süzüntüsünden bakteriyel hücre dışı vezikülleri (EV'ler) saflaştırmak için boyut dışlama kromatografisi (SEC) tekniğini göstermektedir. Teknik, EV'lerin saflaştırılmış fraksiyonlarını elde etmek için gözenekli reçine dolgulu bir kolon kullanır. Gözenekli parçacıklar seçici olarak daha küçük proteinlerin gözeneklere girmesine izin vererek daha yavaş elüsyona neden olur. Aynı zamanda, EV'lerin daha büyük boyutları nedeniyle gözeneklere girmesi...

Mikobakteriyel hücre dışı vezikülleri saflaştırmak için bir boyut dışlama kromatografisi tekniği

Bu protokol, 1) yetişkin fare gastroknemius kasından primer fibroblastların izolasyonunu ve kültürünü ve ayrıca 2) sükroz yoğunluk gradyanları ile birlikte diferansiyel bir ultrasantrifüj yöntemi kullanılarak eksozomların saflaştırılmasını ve karakterizasyonunu ve ardından western blot analizlerini göstermektedir.

İskelet Kası Fibroblastlarından Eksozomların İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Bakteriyel veziküller patogenezde önemli roller oynar ve umut verici biyoteknolojik uygulamalara sahiptir. Veziküllerin heterojenliği analiz ve kullanımı zorlaştırır; bu nedenle, değişen boyutlarda vesikleleri ayırmak için basit, tekrarlanabilir bir yöntem gereklidir. Burada, Aggregatibacter actinomycetemcomitanstarafından üretilen heterojen vezikülleri ayırmak için boyut dışlama kromatografisinin kullanımını gösteriyoruz.

Bakteriyel Dış Zar Vezikül Heterojenliğini Analiz Etmek için Boyut Dışlama Kromatografisi

Buradaki protokol, hücre dışı veziküllerin, boyut dışlama kromatografisi kullanılarak şartlandırılmış hücre kültürü ortamından yeterince ayrılabileceğini göstermektedir.

Hücre Dışı Vezikülleri Şartlandırılmış Hücre Kültürü Ortamından Ayırmak için Boyut Dışlama Kromatografisi

Bu protokol, insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin küçük hücre dışı veziküllerinin (hUC-MSC-sEV'ler) basit bir laboratuvar ölçeğinde tezgah üstü ayar ile nasıl izole edileceğini göstermektedir. İzole hUC-MSC-sEV'lerin boyut dağılımı, protein konsantrasyonu, sEVs belirteçleri ve morfolojisi, sırasıyla nanopartikül izleme analizi, BCA protein testi, batı lekesi ve iletim elektron mikroskobu ile karakterize edilir.

Küçük Hücre Dışı Vezikülleri İnsan Mezenkimal Kök Hücrelerinden İzole Etmek için Basit Bir Tezgah Üstü Filtrasyon Yöntemi

Bu protokol, hava püskürtme nozulunun boyutunu, kılıf sıvısı basıncını, numune akış basıncını, voltajı, kazancı ve tetikleyici eşik parametrelerini optimize ederek küçük hücre dışı veziküller için hızlı ve boyuta özgü bir izolasyon yöntemi sağlar.

Yüksek verimli izolasyon ve küçük hücre dışı veziküllerin saflaştırılması için akış sitometrik sıralama parametrelerinin optimizasyonu

Hücre dışı veziküller biyomedikal uygulamalar için büyük umut vaat etmektedir, ancak mevcut izolasyon yöntemleri zaman alıcıdır ve klinik kullanım için pratik değildir. Bu çalışmada, hücre dışı veziküllerin büyük hacimli biyoakışkanlardan minimum adımlarla sürekli bir şekilde doğrudan izolasyonunu sağlayan bir mikroakışkan cihaz sunuyoruz.

Çatallı A4F Mikroakışkan Cihaz ile Büyük Hacimli Örneklerden Hücre Dışı Veziküllerin Tek Adımlı İzolasyonu

Bu protokol, mekanik dekolman, enzimatik ayrışma, filtrasyon ve diferansiyel ultrasantrifüjleme yoluyla iskelet kası interstisyel hücre dışı veziküllerini (SkM-EV'ler) kemirgen kas dokularından izole etmeyi ve saflaştırmayı amaçlar. Tutarlılık ve güvenilirlik gösterir. İzole edilmiş SkM-EV'ler, tanısal biyobelirteçler veya terapötik araçlar olarak potansiyel uygulamalarla birlikte kas homeostazı ve hastalıkları hakkında bilgi sağlar.

İskelet Kası İnterstisyel Hücre Dışı Veziküllerin Enzimatik İzolasyonu

Öğrenin, fare iskelet kası ve kemik iliğinden boyut dışlama kromatografisi ile küçük ekstrasellüler vezikül izolasyonunu. Bu yöntem, yüksek saflıkta sEV elde ederek moleküler ve fonksiyonel analizleri destekler.

Boyut Dışlama Kromatografisi ile Küçük Ekstrasellüler Veziküllerin Fare, İskelet Kası ve Kemik Iliğinden İzole Edilmesi

Daha fazla video keşfet