ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Li, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global%2C+regional%2C+and+national+burden+of+ischemic+stroke%2C+1990%E2%80%932021%3A+an+analysis+of+data+from+the+global+burden+of+disease+study+2021%5BTitle%5D)+AND+%22EClinicalMedicine%22%5BJournal%5D)">Global, regional, and national burden of ischemic stroke, 1990–2021: an analysis of data from the global burden of disease study 2021.</a> EClinicalMedicine. , (2024).</li>
<li>Zaki, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-competitive+AMPA+receptor+antagonist+perampanel+inhibits+ischemia-induced+neurodegeneration+and+behavioral+deficits+in+focal+cortical+pial+vessel+disruption+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Non-competitive AMPA receptor antagonist perampanel inhibits ischemia-induced neurodegeneration and behavioral deficits in focal cortical pial vessel disruption stroke model.</a> Cells. , (2025).</li>
<li>Pu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projected+global+trends+in+ischemic+stroke+incidence%2C+deaths+and+disability-adjusted+life+years+from+2020+to+2030%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Projected global trends in ischemic stroke incidence, deaths and disability-adjusted life years from 2020 to 2030.</a> Stroke. , (2023).</li>
<li>Khan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+risk+of+stroke+after+transient+ischemic+attack+or+minor+stroke%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Long-term risk of stroke after transient ischemic attack or minor stroke: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. , (2025).</li>
<li>Capirossi, C., Laiso, A., Renieri, L., Capasso, F., Limbucci, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology%2C+organization%2C+diagnosis+and+treatment+of+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol+Open%22%5BJournal%5D)">Epidemiology, organization, diagnosis and treatment of acute ischemic stroke.</a> Eur J Radiol Open. , (2023).</li>
<li>Kumar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addressing+systemic+complications+of+acute+stroke%3A+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Addressing systemic complications of acute stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. , (2025).</li>
<li>Khakh, B. S., Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diversity+of+astrocyte+functions+and+phenotypes+in+neural+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Diversity of astrocyte functions and phenotypes in neural circuits.</a> Nat Neurosci. , (2015).</li>
<li>Verkhratsky, A., Parpura, V., Vardjan, N., Zorec, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+astroglia%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Physiology of astroglia.</a> Adv Exp Med Biol. , (2019).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+astrocyte+metabolic+reprogramming+in+ischemic+stroke+%28review%29%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">The role of astrocyte metabolic reprogramming in ischemic stroke (review).</a> Int J Mol Med. , (2025).</li>
<li>Collyer, E., Blanco-Suarez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+in+stroke-induced+neurodegeneration%3A+a+timeline%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Astrocytes in stroke-induced neurodegeneration: a timeline.</a> Front Mol Med. , (2023).</li>
<li>Wang, Y., Wang, D., Li, D., Ma, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+astrocytes+in+ischemic+stroke+%E2%80%94+mechanisms%2C+functions+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The role of astrocytes in ischemic stroke — mechanisms, functions and treatment.</a> Front Cell Dev Biol. , (2025).</li>
<li>Deng, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+insights+into+acute+ischemic+stroke+from+the+perspective+of+spatial+omics%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">New insights into acute ischemic stroke from the perspective of spatial omics.</a> Theranostics. , (2025).</li>
<li>Zhou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+associated+RNA-containing+vesicles+regulate+cortical+astrocytic+microdomain+calcium+transients+in+awake+ischemic+stroke+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Membrane associated RNA-containing vesicles regulate cortical astrocytic microdomain calcium transients in awake ischemic stroke mice.</a> Adv Sci (Weinh). , (2024).</li>
<li>Mohseni Ahooyi, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+analysis+of+hippocampal+neurons+by+microelectrode+array+in+the+presence+of+HIV-1+Tat+and+cocaine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Network analysis of hippocampal neurons by microelectrode array in the presence of HIV-1 Tat and cocaine.</a> J Cell Physiol. , (2018).</li>
<li>Ghouse, M., Li, M., Long, C., Jiang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multichannel+extracellular+recording+in+freely+moving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Multichannel extracellular recording in freely moving mice.</a> J Vis Exp. , (2023).</li>
<li>Montoya, B., Thompson, R. J., Boyce, A. K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+photothrombosis+and+fiber+photometry+to+induce+and+monitor+ischemic+stroke+in+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous photothrombosis and fiber photometry to induce and monitor ischemic stroke in behaving mice.</a> J Vis Exp. (225), e69418(2025).</li>
<li>Labat-gest, V., Tomasi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photothrombotic+ischemia%3A+a+minimally+invasive+and+reproducible+photochemical+cortical+lesion+model+for+mouse+stroke+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Photothrombotic ischemia: a minimally invasive and reproducible photochemical cortical lesion model for mouse stroke studies.</a> J Vis Exp. (76), e50370(2013).</li>
<li>Llovera, G., Pinkham, K., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice%3A+focal+cortical+lesions+by+photothrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice: focal cortical lesions by photothrombosis.</a> J Vis Exp. (171), e62536(2021).</li>
<li>Talley Watts, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rose+Bengal+photothrombosis+by+confocal+optical+imaging+in+vivo%3A+a+model+of+single+vessel+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rose Bengal photothrombosis by confocal optical imaging in vivo: a model of single vessel stroke.</a> J Vis Exp. (100), e52794(2015).</li>
<li>Seong, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target+ischemic+stroke+model+creation+method+using+photoacoustic+microscopy+with+simultaneous+vessel+monitoring+and+dynamic+photothrombosis+induction%5BTitle%5D)+AND+%22Photoacoustics%22%5BJournal%5D)">Target ischemic stroke model creation method using photoacoustic microscopy with simultaneous vessel monitoring and dynamic photothrombosis induction.</a> Photoacoustics. , (2022).</li>
<li>Pochechuev, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+fiber-optic+recording+of+acute+ischemic+stroke+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Real-time fiber-optic recording of acute ischemic stroke signatures.</a> J Biophotonics. , (2022).</li>
<li>Gao, Y. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+disruption+to+remodeling%3A+the+evolution+and+therapeutic+prospects+of+neuroimmune+regulatory+circuitry+after+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">From disruption to remodeling: the evolution and therapeutic prospects of neuroimmune regulatory circuitry after ischemic stroke.</a> Front Immunol. , (2026).</li>
<li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optrode+array+for+simultaneous+optogenetic+modulation+and+electrical+neural+recording%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optrode array for simultaneous optogenetic modulation and electrical neural recording.</a> J Vis Exp. (187), e63460(2022).</li>
<li>Wang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+machine+learning-based+classification+of+neuronal+cell+types+from+spike+waveforms%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for machine learning-based classification of neuronal cell types from spike waveforms.</a> STAR Protoc. , (2025).</li>
<li>Tian, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neural+activity+in+worms%2C+flies+and+mice+with+improved+GCaMP+calcium+indicators%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging neural activity in worms, flies and mice with improved GCaMP calcium indicators.</a> Nat Methods. , (2009).</li>
<li>Boyce, A. K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contralesional+hippocampal+spreading+depolarization+promotes+functional+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Contralesional hippocampal spreading depolarization promotes functional recovery after stroke.</a> Nat Commun. , (2025).</li>
<li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Des+Devel+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Des Devel Ther. , (2015).</li>
<li>Liu, F., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle+cerebral+artery+occlusion+model+in+rodents%3A+methods+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Middle cerebral artery occlusion model in rodents: methods and potential pitfalls.</a> J Biomed Biotechnol. , (2011).</li>
<li>Shvedova, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+middle+cerebral+artery+occlusion+model+provides+detailed+intraoperative+cerebral+blood+flow+registration+and+improves+neurobehavioral+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Modified middle cerebral artery occlusion model provides detailed intraoperative cerebral blood flow registration and improves neurobehavioral evaluation.</a> J Neurosci Methods. , (2021).</li>
<li>Bacigaluppi, M., Comi, G., Hermann, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke.+Part+two%3A+modeling+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Neurol+J%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke. Part two: modeling cerebral ischemia.</a> Open Neurol J. , (2010).</li>
<li>Jiang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+photothrombotic+%E2%80%9Cring%E2%80%9D+stroke+model+in+adult+mice+with+late+spontaneous+reperfusion%3A+quantitative+measurements+of+cerebral+blood+flow+and+cerebral+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Establishing a photothrombotic “ring” stroke model in adult mice with late spontaneous reperfusion: quantitative measurements of cerebral blood flow and cerebral protein synthesis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2006).</li>
<li>Knezic, A., Broughton, B. R. S., Widdop, R. E., McCarthy, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+the+photothrombotic+model+of+stroke+in+the+C57BL%2F6+and+FVB%2FN+strains+of+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Optimising the photothrombotic model of stroke in the C57BL/6 and FVB/N strains of mouse.</a> Sci Rep. , (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2% TTC Staining Solution</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Agorose</td><td>Biosharp</td><td>BS081</td><td></td></tr><tr><td>Body Temperature Maintenance System / Homeothermic Monitor</td><td>RWD life Science</td><td>69002</td><td></td></tr><tr><td>Cranial Screws</td><td>Zhongke Huida</td><td>23092007</td><td></td></tr><tr><td>Data Acquisition and Analysis Software(Fiber photometry)</td><td>RWD life Science</td><td>ORFs</td><td></td></tr><tr><td>Data Acquisition and Analysis Software(Multi-channel electrophysiology)</td><td>Plexon</td><td>PlexControl, Offline Sorter, Neuroexplorer&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Digital laboratory stereotactic frame</td><td>RWD life Science</td><td>68804</td><td></td></tr><tr><td>Forcep</td><td>FST</td><td>11252-00</td><td>Forcep çapı 0,005 mm &acute; 0,025 mm</td></tr><tr><td>Laser power meter</td><td>Sanwa</td><td>LP10</td><td></td></tr><tr><td>Laser Speckle Blood Flow Imaging System</td><td>Pericam AB</td><td>Pericam PSI NR</td><td></td></tr><tr><td>Mice</td><td>Risemice</td><td>C57BL/6J</td><td></td></tr><tr><td>Miniature handheld cranial drill</td><td>RWD life Science</td><td>78001</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Viral Micro-injector</td><td>RWD life Science</td><td>68025</td><td></td></tr><tr><td>Optrode</td><td>Özelleştirilmiş</td><td>Kedou</td><td>1 optik fiberi çevreleyen 16 tungsten elektrot ile özelleştirilmiştir</td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad</td><td>5.01 sürüm</td><td></td></tr><tr><td>R studio</td><td>Posit</td><td>sürüm 4.4.1</td><td></td></tr><tr><td>rAAV-GfaABC1D-GCaMP6s</td><td>BrainVTA</td><td>PT-2560</td><td>Astrosit özgü kalsiyum göstergesi</td></tr><tr><td>rAAV-GfaABC1D-opto-vTrap</td><td>BrainCase</td><td>BC-2446</td><td>Astrosit özgü optik genetik viral vektör</td></tr><tr><td>Rose Bengal Boyası</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>198250</td><td>Tromboz indüksiyonu için fotoduyarlı boya/Sigma-Aldrich</td></tr><tr><td>Trolley-mounted anesthesia workstation</td><td>RWD life Science</td><td>R520</td><td>Mice için kontrol edilebilir inhalasyon anestezi için anestezi makinesi</td></tr></tbody></table>

fototrombotik İnme modelleme ve davranış eden farelerde nöronal ve astrositik aktivitenin in vivo optrode kaydı İçin entegre bir yöntem

An Integrated Method for Photothrombotic Stroke Modeling and In Vivo Optrode Recording of Neuronal and Astrocytic Activity in Behaving Mice

Fototrombotik İnme Modelleme ve Davranış Eden Farelerde Nöronal ve Astrositik Aktivitenin In Vivo Optrode Kaydı İçin Entegre Bir Yöntem

Investigating astrocyte-neuron dynamics following ischemic stroke is essential for understanding post-stroke recovery mechanisms. However, current ...

Araştırmamız, davranış sergileyen farelerde iskemik inme sırasında astrosit ve nöron aktivitesini eş zamanlı olarak kaydetmek için entegre bir yöntem geliştirmektedir. Önceki yöntemler nöronları veya astrositleri ayrı ayrı kaydetmekteydi. Protokolümüz, inme başlangıcının ilk anlarından itibaren astrosit ve nöron sinyallerini eş zamanlı olarak yakalar.Başlamak için, derin anestezi altındaki bir C57BL/6J faresini anestezi maskesiyle donatılmış stereotaksik çerçeveye aktarın. Geri bildirim kontrollü bir ısıtıcı ped ile fare vücut sıcaklığını 36 ile 37.5 °C arasında tutarken, her 10 dakikada bir anestezinin derinliğini izleyin. Gözlere oftalmik pomad uyguladıktan sonra fareyi kulak barları ve ağız barı ile stereotaksik çerçeveye sabitleyin.Baş simetrik olarak sabitlendikten sonra, nazikçe yoklayarak baş immobilizasyonunu doğrulayın. Tüylerin temizlenmesi ve septik cilt hazırlığının ardından, orta hat boyunca bir insizyon yapmak için cerrahi makas kullanın. Bregma ve lambdayı ortaya çıkarmak için periostu salin ve pamuklu çubuklarla temizleyin.Cam mikropipeti sırasıyla bregma ve lambda noktalarına değecek şekilde indirin. Dijital kumpas üzerindeki Z koordinatını not ettikten sonra, fark 0,04 milimetreden az olana kadar ağız çubuğunu ayarlayın. Cam mikropipeti bregma noktasına değecek şekilde indirin ve dijital kumpası sıfırlayın.Mikropipeti sırasıyla bregmanın 2,3 milimetre soluna ve sağına hareket ettirin. Z koordinatını not ettikten sonra, bilateral farklar 0,04 milimetrenin altına düşene kadar kulak barlarını ayarlayın. Dijital kumpası bregmada sıfırladıktan sonra, motor korteks ön kol bölgesini anterior posterior artı 1,5 milimetre ve medial lateral artı 0,74 milimetre olarak işaretleyin.İşaretlenen konuma yaklaşık 0.5 milimetre çapında küçük bir delik açmak için mikro matkap ve 0.5 milimetrelik yuvarlak uçlu matkap uçları kullanın. Yüklemeden önce, iki adeno-associated viral vektörü eşit hacimlerde karıştırın ve örneği kısa süreliğine santrifüjleyin. Mikroinfüzyon pompasına bağlı cam mikropipeti, beyin yüzeyinden eksi 0.94 milimetrelik bir dorsal-ventral derinlikte hedef bölgeye indirin.Her bir vektörden 200 nanolitre içeren viral karışımın 400 nanolitresini dakikada 50 nanolitre hızla infüze edin. İnfüzyon tamamlandıktan 10 dakika sonra pipeti yavaşça geri çekin. Kafa derisini 4-0 20 milimetrelik, 3/8 daire şeklinde sütürle dikin ve fareyi tam iyileşme sağlanana kadar bir ısıtma pedinin üzerine yerleştirin.Viral enjeksiyondan üç ila dört hafta sonra, kafa derisi insizyonuna kadar olan kısmı önceden gösterilen prosedürü takip ederek uygulayın. Kafa derisi insizyonu sırasında, gözlerin çevresinde yeterli deri bırakarak 1,5 santimetre x 1,5 santimetre boyutunda kafa derisini çıkarın. Kafatasını hidrojen peroksit ve %0,9'luk salin ile temizleyin.Bregma belirlendikten sonra, dijital kumpası sıfırlayın. Kafatası yüzeyini hafifçe pürüzlendirmek için 0,8 milimetrelik yuvarlak uçlu bir matkap kullanın. Motor korteksin ön kol bölgesini işaretleyin.Anterior posterior eksende 1,5 milimetre ve medial lateral eksende 0,74 milimetre işaretleyin. Bu işareti merkez noktası olarak kullanarak beş milimetreye beş milimetre boyutunda bir kare çizin. Kareyi takip etmek için yaklaşık 10.000 devir/dakika hızında bir mikro matkap kullanın.Matkap yoluna sürekli olarak buz gibi soğuk salin uygulayın ve kemik flebi gevşerse işlemi derhal durdurun. Kontralateral hemisfer ve serebellum üzerine 0,5 milimetre çapında üç küçük delik açın. Deliklere kraniyoplasti vidalarını yerleştirin.Beyin dokusunun zarar görmesini önlemek için her bir vidanın dura mater'e ulaştığından ancak daha derinlemesine nüfuz etmediğinden emin olun. Gevşetilen kemik flebini çıkarmak için pens kullanın. Beyin dokusuyla doğrudan temastan kaçınarak, kranial penceredeki durayı çıkarmak için 0,03 mm x 0,01 mm'den daha küçük ultra ince uca sahip ultra ince pensler kullanın.Optrodu optodeyi stereotaksik çerçevesinin mikromanipülatör koluna sabitleyin ve kraniyal pencerenin üzerine hareket ettirin. Optrodun gümüş şase ve referans tellerini üç kraniyoplasti vidasına güvenli bir şekilde dolayın. Kraniyal pencere yüzeyini steril salin ile temizleyin.Optro'yu, saniyede 1 milimetre hızla, -0,94 milimetre olan istenen dorsal-ventral derinliğe yavaşça indirin. İmplantasyon sonrası kraniyal pencerenin üzerine bir kat agaroz uygulayın. Üç ila dört kat diş dolgu malzemesi uygulayın.Dental siman sertleştikten sonra, üç ila beş gün boyunca analjezi uygulayın ve farenin bir ila iki hafta boyunca iyileşmesini bekleyin. GCaMP6s'i uyarmak için çift veya üç dalga boylu bir fiber fotometri sistemi kullanın. Sinyal kanalını 470 nanometreye, kontrol kanalını ise 410 nanometreye ayarlayın.Örnekleme hızını saniyede 60 kareye ayarlayın. Şimdi, tüm kayıt sistemi bileşenlerini uygun şekilde topraklayın. Kayıt sırasında ortak bir medyan referansı kullanın.Kayıt oturumu boyunca gürültü takibi yaparken, kayıt yazılımında geniş bant ve yerel alan potansiyeli sinyallerinin seçili olduğunu doğrulayın. Fareyi kısa süreliğine anesteziye aldıktan sonra, optro'yu bir adaptör aracılığıyla kayıt hattına bağlayın. Kayıt için fareyi ev kafesine benzer bir ortama yerleştirin.Uyandıktan sonra 10 dakika adaptasyon süresi tanıyın. Beş dakika boyunca dakikada bir çekiş gerektiren kavrama kuvveti testini gerçekleştiren fareyi kaydedin. Davranışsal testleri hem çok kanallı hem de fiber fotometri sistemlerinde hassas bir şekilde zaman damgasıyla işaretleyin.1,5% Rose Bengal boya çözeltisini kilogram başına 10 ila 20 miligram dozunda intraperitonal olarak uygulayın ve beş dakika bekleyin. Derin anestezi sağlandıktan ve korunduktan sonra optrod probunu lazer kaynağına bağlayın. Fokal iskemi oluşturmak için implantlanmış optrod üzerinden 530 nanometre lazer ışınını 15 miliwatt gücünde beş ila sekiz dakika boyunca uygulayın.Optogenetik stimülasyonu gerçekleştirmek için lazer stimülatörünü optroda ile bağlayın. 488 nanometrelik optogenetik lazer stimülatörünü açın ve Opto-vTrap için beş dakika boyunca 10 miliwatt olarak ayarlayın. Son olarak, fareyi toparlanması için ısıtmalı bir pedin üzerine yerleştirin.Bazal değerlerle karşılaştırıldığında, serebral kan akımı fototrombosis sonrası azalmış ve inmeden bir gün ve yedi gün sonra baskılanmış halde kalmıştır. Ön kol kavrama kuvveti, inmeden bir gün sonra oldukça belirgin bir düşüş göstermiş ve yedi gün sonra baskılanmış halde kalmıştır. Fiber fotometri ile kaydedilen astrositik kalsiyum geçişleri ve elektrofizyolojiden elde edilen nöronal spike'lar zaman damgalarına göre hizalanmıştır.Fototrombotik inme sonrası, ön ekstremite kavrama görevi sırasındaki bazal ateşleme ile karşılaştırıldığında, hem piramidal nöronlarda hem de internöronlarda ateşleme hızları önemli ölçüde baskılanmıştır. Bazal seviyede, astrositik kalsiyum geçişleri görev başlangıcından sonraki dört ila altı saniye içinde zirveye ulaşmıştır. Ancak, fototrombotik inme sonrası genlik önemli ölçüde azalmış olup, bu durum zayıflamış kalsiyum aktivitesini yansıtmaktadır.Raster grafikleri ve peri-stimulus zaman histogramları, optik stimülasyon sırasında nöronal aktivitedeki değişimleri göstermiştir. Hem piramidal nöron hem de internöron ateşleme hızları, stimülasyon öncesi bazal seviyeye kıyasla optik stimülasyondan sonra belirgin bir azalma göstermiştir; bu durum, astrosit modülasyonunun lokal devre uyarılabilirliği üzerinde ölçülebilir bir alt akış etkisi olduğunu doğrulamaktadır. Bu protokol, akut başlangıç evresinden kronik evreye kadar olan inme zaman çizelgesi boyunca egzersizin ve nöroaktivitenin kesintisiz olarak kaydedilmesine olanak tanır.Bu protokoldeki başarı, hassas veya koordinatlı hizalamaya bağlıdır. Monoküler optrot implantasyonu ve cerrahiler boyunca yeterli virüs ekspresyon süreleri önemlidir. Gelecekteki çalışmalar, daha geniş beyin bölgelerini izlemek veya çeşitli davranışsal analizlerle farklı hücre tiplerini hedeflemek için birden fazla implant kullanabilir.

an-integrated-method-for-photothrombotic-stroke-modeling-vivo-optrode

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, ışığa duyarlı boya uygulandıktan sonra sağlam bir kafatasının lazerle aydınlatılmasıyla bir fare modelinde fototrombotik vuruş oluşturma prosedürünü göstermektedir.

Fare Modelinde Fototrombotik İnmenin Modellenmesi: Fototrombozu İndüklemek İçin Işığa Duyarlı Boya Uygulamasını Takiben Fare Kafatasından Bir Lazer Aydınlatma Tekniği

Source: Maruoka, H., et. al. uyanık farelerde mikroglial dinamiklerin ve nöronal aktivitenin eşzamanlı görüntülenmesi. J. Vis. Exp. (2022) Bu video, görsel stimülasyon sırasında uyanık bir farede nöronal aktiviteyi ve mikroglial dinamikleri görüntülemek için iki fotonlu bir mikroskopi prosedürünü göstermektedir. kalsiyum geçişleri ve hücresel etkileşimler.

Uyanık Bir Farede Mikroglial Dinamiklerin ve Nöronal Aktivitenin Eş Zamanlı Görüntülenmesi

Fototromboz son derece tekrarlanabilir bir şekilde ilgi alanları küçük ve iyi ayrılmış enfarktüsü uyaran için hızlı, minimal invaziv bir tekniktir. Bu transgenik farelerde beyin plastisitesi oluşturan hücresel ve moleküler okuyan cevapları için özellikle uygundur.

Photothrombotic İskemi: Fare İnme Araştırmalar bir Minimal İnvaziv ve tekrarlanabilir fotokimyasal Kortikal Lezyon Model

Burada, in vivo olarak bir farenin somatosensoriyel korteksinde bir Rose Bengal fototrombotik pıhtısının indüksiyonu için yarı invaziv bir optik mikroskopi yaklaşımını açıklıyoruz.  Görüntüleme prosedürünün teknik yönleri, fototrombotik bir olayın indüksiyonundan uygulama ve veri toplamaya kadar açıklanmaktadır.

Konfokal Optik Görüntüleme ile Rose Bengal Fototromboz<em&gt; In Vivo</em&gt;: Tek Gemi İnme Bir Model

Bu video, Thy1-GFP transgenik hattında in vivo iki foton mikroskobu kullanılarak fare retrosplenial korteksindeki nöronların kronik olarak görüntülenmesine izin veren kraniyotomi prosedürünü göstermektedir. Bu yaklaşım, mCherry eksprese eden adeno ilişkili virüsün dorsal hipokampusa enjeksiyonu ile birleştirilir. Bu teknikler, RSC'de deneyime bağlı yapısal plastisitenin uzun süreli izlenmesine izin verir.

Eşzamanlı İki foton<em&gt; İn Vivo</em&gt; Fare Retrosplenial kortekste sinaptik Girişlerin Görüntüleme ve postsinaptik Hedefler

Bu protokol serebral emboli görselleştirmek için kombine yakın kızılötesi floresan (NIRF) görüntüleme ve mikro-bilgisayarlı tomografi (mikroBT) uygulanmasını açıklar. Bu teknik trombüs yükü ve evrim ölçümü sağlar. MikroBT'lerin tekniği altın nanopartiküller kullanarak canlı hayvan içinde trombüs görüntüler ise NIRF görüntüleme tekniği floresan, eksize beyinde trombüs etiketli görselleştirir.

Doğrudan Serebral emboli görselleştirme için Kombine Yakın kızılötesi Floresan Görüntüleme ve Mikro bilgisayarlı Tomografi

Burada açıklanan fototrombotik inme modeli, bir inmenin, ışığa duyarlı bir boyanın kullanılmasından sonra lazer aydınlatma kullanılarak kalıcı mikrovasküler tıkanıklık indüklenerek sağlam kafatasından üretildiği yerdir.

Farelerde Modelleme İnme: Fototomboz ile Fokal Kortikal Lezyonlar

Burada, uyanık farelerde mikroglial dinamiklerin ve nöronal aktivitenin eşzamanlı görüntülenmesi için adeno ilişkili virüs enjeksiyonunu kraniyal pencere implantasyonu ile birleştiren bir protokolü tanımladık.

Uyanık Farelerde Mikroglial Dinamiğin ve Nöronal Aktivitenin Eşzamanlı Görüntülenmesi

Fare beyninin in vivo transkraniyal manyetik uyarımını sağlamak için milimetre büyüklüğünde bir bobin ile birleştirilmiş düşük maliyetli bir elektroensefalografik kayıt sistemi önerilmektedir. Özel yapım, esnek, çoklu elektrot dizisi substratına sahip geleneksel vidalı elektrotlar kullanılarak, transkraniyal manyetik stimülasyona yanıt olarak fare beyninden çok bölgeli kayıt gerçekleştirilebilir.

Fare Beynini In Vivo'da Transkraniyal Olarak Uyarmak için Milimetre Boyutlu Bir Bobin ile Birleştirilmiş Düşük Maliyetli Elektroensefalografik Kayıt Sistemi

Bu protokol, floresan polistiren mikrosferler kullanılarak in vivo iki foton mikroskopi görüntüleme için optimize edilmiş kronik kraniyal pencere ve mikrovasküler embolizm fare fare modeli için adım adım yaklaşımın ayrıntılı bir açıklamasını içerir.

Floresan Polistiren Mikrosferleri Kullanarak In Vivo İki Foton Mikroskopi İçin Mikrovasküler Embolizm Fare Modeli

Tamamen optik bir yaklaşım kullanılarak, uyanık, davranan bir farenin ortaya çıkan inme çekirdeğinde ortaya çıkan bir floresan biyosensör kullanılarak nöronalCa2+ aktivitesi aynı anda kaydedilirken iskemik inme indüklenir.

Davranan farelerde iskemik inmeyi indüklemek ve izlemek için eşzamanlı fototromboz ve lif fotometrisi

133 Görüntüleme.  Guangzhou University of Chinese Medicine. Araştırmamız, hareket halindeki farelerde iskemik inme sırasında astrositler ve nöron aktivitesini eşzamanlı olarak kaydetmek için entegre bir yöntem geliştirir. Önceki yöntemler, nöronları veya astrositlerin ayrı ayrı kaydını yapar. Bizim protokolümüz, inmenin başlangıç anından astrosit ve nöron sinyallerini eşzamanlı olarak yakalar.Başlamak için, derin anestezi altındaki bir C57BL/6J faresini, anestezi maskesi olan stereotaktik çerçeveye aktarın. Far...

Fototrombotik İnme Modelleme ve Davranış Eden Farelerde Nöronal ve Astrositik Aktivitenin In Vivo Optrode Kaydı İçin Entegre Bir Yöntem

Daha fazla video keşfet