Name: Escherichia coliden hidrofobin SC16nın Rekombinant Üretimi ve Arındırılması ile floresan testleriyle kendi kendine montajının izlenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 33 s
Description: Öğrenin, Escherichia coli'de SC16 hidrofobinin rekombinant üretimi ve arındırılması ile tiyoﬂavin T bazlı ﬂoresans testleriyle kendi kendine montajının nasıl izleneceğini.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid (MES)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>145224-94-8</td><td>Kendiliğinden birleşim testleri için tampon bileşeni</td></tr><tr><td>5 mL yuvarlak tabanlı polistiren tüp</td><td>Falcon</td><td>352054</td><td>Düşük verimli kendiliğinden birleşim testlerinde kullanılır</td></tr><tr><td>96 kuyuluk siyah polistiren mikroplate</td><td>Grenier</td><td>655076</td><td>Mikroplate okuyucuda floresan ölçümlerinde kullanılır</td></tr><tr><td>Akrilamid/Bis-akrilamid (29:1) çözeltisi (40%)</td><td>BioShop</td><td>ACR004.500</td><td>SDS-PAGE jelleri hazırlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Agar</td><td>BioShop</td><td>AGR002.1</td><td>Ampisilin dirençli LB plakaları yapmak için kullanılan agar</td></tr><tr><td>Ampisilin</td><td>IBI Scientific</td><td>IB02040</td><td>LB-agar plakalarında kullanılan antibiyotik</td></tr><tr><td>Kargaşalı 2.8 L Fernbach şişeleri</td><td>Fisher Scientific</td><td>955239</td><td>Büyük hacimli bakteri kültürü büyümesi için kullanılır</td></tr><tr><td>&beta;-merkaptoetanol</td><td>TCI Chemicals</td><td>60-24-2</td><td>SDS-PAGE örnek hazırlamasında kullanılan indirgeyici ajan</td></tr><tr><td>Kolon (1.5 cm çaplı yerçekimi kolon)</td><td>Bio-Rad</td><td>7371522</td><td>Nikel afinite arıtması için kullanılır</td></tr><tr><td>Diyaliz tüpü (3500 kDa MWCO)</td><td>BioDesign</td><td>D302</td><td>Arıtma sırasında tampon değişimi için kullanılır</td></tr><tr><td>Emiş filtresi</td><td>Edmund Optics</td><td>84080</td><td>ThT testleri için kullanılır (494 nm, 20 nm bant geçişi)</td></tr><tr><td>Uyarım filtresi</td><td>Edmund Optics</td><td>67012</td><td>ThT testleri için kullanılır (438 nm, 24 nm bant geçişi)</td></tr><tr><td>Floresan mikroplate okuyucu</td><td>Tecan</td><td>Infinite F200 Pro</td><td>ThT floresan yoğunluğunu ölçmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Sıcak plaka</td><td>Lab Fish</td><td>HS5C</td><td>Sıcaklık izlemeli su banyosu kurulumu için kullanılır</td></tr><tr><td>Hydroklorik asit (HCl)</td><td>Fisher Chemical</td><td>A144-212</td><td>Tamponların pH ayarında kullanılır</td></tr><tr><td>İmidazol</td><td>TCI Chemicals</td><td>288-32-4</td><td>IMAC arıtmasında kullanılır (yıkama ve elüsyon tamponları)</td></tr><tr><td>Izopropil &beta;-D-1-tiyogalaktopiranozid (IPTG)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>367-93-1</td><td>E. coli'de protein ekspresyonunu uyarır</td></tr><tr><td>LB besi maddesi (Lennox)</td><td>BioShop</td><td>LBL405.5</td><td>Bakteryal kültür için büyüme ortamı</td></tr><tr><td>Düşük hızlı soğutmalı santrifüj</td><td>Beckman Coulter</td><td>360291</td><td>Depolama öncesi hücreleri peletlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Nikel NTA agaroz boncukları</td><td>GoldBio</td><td>H-350-50</td><td>His-etiketli proteinlerin afinite arıtımında kullanılan reçine</td></tr><tr><td>SC16 plazmiti</td><td>BioBasic</td><td>N/A</td><td>H-GB1-SC16 füzyon proteinini kodlayan özel DNA yapısı</td></tr><tr><td>SHuffle T7 Express kompetent E. coli</td><td>New England Biolabs</td><td>C3029J</td><td>Rekombinant protein ekspresyonu için kullanılan ana suş</td></tr><tr><td>Sodyum klorür (NaCl)</td><td>BioShop</td><td>SOD001.5</td><td>Tampon bileşeni ve iyonik kuvvet düzenleyici</td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit (NaOH)</td><td>Fisher Chemical</td><td>SS255-1</td><td>Tamponların pH ayarında kullanılır</td></tr><tr><td>Sodyum fosfat</td><td>BioShop</td><td>SPD579.1</td><td>pH'ı korumak için tampon bileşeni</td></tr><tr><td>Spektrofotometre</td><td>Pharmacia Biotech</td><td>5096</td><td>SC16'nın kantitatif analizi için kullanılır</td></tr><tr><td>Tiyoflavin T (ThT)</td><td>Acros Organics</td><td>2390-54-7</td><td>Protein kendiliğinden birleşimini izlemek için kullanılan floresan boya</td></tr><tr><td>Trombin proteaz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>04-04-9002</td><td>H-GB1-SC16 füzyon proteininin parçalanması için kullanılır</td></tr><tr><td>Tris(hidroksimetil)aminometan (Tris)</td><td>BioShop</td><td>TRS001.5</td><td>Arıtma ve analiz çözeltilerinde kullanılan tampon</td></tr><tr><td>Yüksek hızlı soğutmalı santrifüj</td><td>Sorvall</td><td>46915</td><td>Hücre lizisinden sonra lizatı temizlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>SDS-PAGE kurulumu</td><td>Bio-Rad</td><td>1658000EDU</td><td>SDS-PAGE jellerini hazırlamak ve çalıştırmak için kullanılır</td></tr></tbody></table>

escherichia coli'den hidrofobin sc16'nın rekombinant Üretimi ve arındırılması ile floresan testleriyle kendi kendine montajının izlenmesi

Recombinant Production And Purification of Hydrophobin SC16 From Escherichia coli And Monitoring of Its Self-Assembly Using Fluorescence Assays

Escherichia coli'den hidrofobin SC16'nın Rekombinant Üretimi ve Arındırılması ile floresan testleriyle kendi kendine montajının izlenmesi

Hydrophobins are small amphipathic proteins that self-assemble at hydrophobic&#8211;hydrophilic interfaces to form stable waterproof coatings over fungal ...

recombinant-production-purification-hydrophobin-sc16-from-escherichia

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Post-insan genomik dönemde, yerli konformasyonlar rekombinant protein durumu, yapısal, işlevsel ve tedavi araştırma ve geliştirme için çok önemlidir. Burada, bir test-ve rekombinant proteinlerin çeşitli üretmek için kullanılan insan embriyonik böbrek hücreleri 293T büyük ölçekli proteini ifade sistemi açıklamaktadır.

İnsan Hücrelerden salgılanan Proteinlerin Üretimi için Kullanışlı ve Genel Anlatım Platformu

Tarama kantitatif, yüksek miktarda ifade ve küçük ölçekli Escherichia coli kültürlerinden füzyon proteinlerinin saflaştırılması için analitik bir protokol tarif disülfid zengin hayvansal protein zehir hedeflerin ekspresyonu uygulanır.

Üretilen Rekombinant Disülfid zengin Venom Proteinler Uygulanan Yüksek Randımanlı Sayısal Anlatım Tarama ve Arıtma<em&gt; E. coli</em

Elastin benzeri polipeptitler, yeniden birleştirici protein arıtma için ilaç teslim çeşitli uygulamalar ile uyarıcı yanıt biyo-polimerler vardır. Bu protokol, kromatografi için basit bir alternatif olarak bunların düşük kritik çözelti, sıcaklık faz geçiş davranışları kullanılarak Escherichia coli'den elastin gibi polipeptidler ve bunların peptid veya protein füzyonlarının saflaştırılmasına ve karakterizasyonunu tarif etmektedir.

Peptidler ve proteinler ile rekombinant Elastin gibi Polipeptitlerin ve Fusions olmayan kromatografik saflaştırma<em&gt; Escherichia coli</em

Memeli sistemleri tarafından rekombinant proteinlerin ekspresyonu, yapısal biyoloji için protein kompleksleri üretmek için çekici bir yöntem haline geliyor. Burada, yapısal çalışmalar için protein komplekslerini saflaştırmak için süspansiyonda yetiştirilen memeli hücrelerini kullanan basit ama oldukça verimli bir ekspresyon sistemi sunuyoruz.

Bir Roman ve Erişilebilir Yaklaşım: Yapısal HEK 293F Askı Hücreleri Biyoloji Rekombinant Protein

Yeşil floresan proteini füzyon göre, Escherichia coli içinde rekombinant zar proteinlerinin ifadesi için tarama için bir aerodinamik bir yaklaşım sunulmuştur.

Membran proteinlerinin Yeşil floresan proteini temelli Ekspresyon elemesinde<em&gt; Escherichia coli</em

Hücre içi protein katlanması için doğal bir kalite kontrol mekanizmasına sahip olan Escherichia coli ikiz-arginin translokasyon yolunu kullanarak, bağlanma afinitesi ve sitoplazmik çözünürlük için bir antikor fragmanları kitaplığını aynı anda taramak için bir yöntem sunuyoruz, antikor fragmanlarını iç zarda görüntülemek için.

Antikor parçalarının bir kütüphanenin taranması için bakteriyel iç zar görüntü

Bu iletişim kuralı adımları, maliyetleri ve ekipman E. colioluşturmak için gerekli ayrıntıları-hücre özleri dayalı ve 4 gün içinde veya daha az vitro protein sentez reaksiyonları uygulamak. Bu platformun geniş uygulamalar için esnek yapısı kullanabilmeniz için biz uyarlanmış ve en iyi duruma getirilmiş reaksiyon koşulları tartışıyorlar.

Escherichia coli-boş hücre Protein sentezi dayalı: sağlam, esnek ve erişilebilir platform teknolojisi için iletişim kuralları

Bu makalede, her iki S. cerevisiae ve HEK293T hücrelerinde protein kendinden montajı ölçmek için fret tabanlı akış sitometri Protokolü açıklanır.

Algılama ve ölçme protein Self-montaj In vivo tarafından akış sitometri

Aşı geliştirmede kullanılmak üzere kendi kendine biraraya gelen protein nano taneciklerinin (SAPN' ler) saflaştırılmasını, yeniden katlanması ve karakterizasyonu nun tanımlanmasını açıklayan ayrıntılı bir yöntem burada verilmiştir.

Trimerik Epitop Sunumu Gerektiren Aşılar için E. coli-expressed Self-Assembling Protein Nano tanecikleri Üretimi

Organik ve sulu çözücülerin arayüzünde, özel ampifilik elastin benzeri proteinler veziküller, lifler ve çevresel parametrelertarafından tetiklenen koaksivatlar gibi karmaşık supramoleküler yapılarda bir araya getirilir. Açıklanan montaj protokolleri, çeşitli kargoların kapsüllemesini sağlayan, tunable özelliklere sahip Protein Membran Tabanlı Bölmeler (PMBCs) verir.

Elastin benzeri Proteinlerin tanımlanmış Supramoleküler Yapılara Yönlendirilmiş Montajı ve Tüp Bebek Tespülasyonu

Bu protokol, rekombinant insan SLFN14 ribonükleazının üretimini ve kütle fotometrisiyle stoikiyometrik analizini tanımlar.<br...

Rekombinant İnsan SLFN14 ribonükleazının hızlı üretimi ve kütle fotometrisi ile stoikiyometrik analiz

Öğrenin, Escherichia coli'de SC16 hidrofobinin rekombinant üretimi ve arındırılması ile tiyoﬂavin T bazlı ﬂoresans testleriyle kendi kendine montajının nasıl izleneceğini.

Escherichia coliden hidrofobin SC16nın Rekombinant Üretimi ve Arındırılması ile floresan testleriyle kendi kendine montajının izlenmesi (Video) | JoVE Journal

Escherichia coli'den hidrofobin SC16'nın Rekombinant Üretimi ve Arındırılması ile floresan testleriyle kendi kendine montajının izlenmesi

Daha fazla video keşfet