Name: Meningeal Lenfatiklerin Değerlendirilmesi İçin Entegre Protokol: Cisterna Magna enjeksiyonu, Lenf Düğümleri Görüntüleme, Meningeal Diseksiyon ve Bütün-Montaj Boyama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-29T14:05:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: Öğrenin, farelerde meningeal lenfatik damarların işlev ve morfolojisini değerlendirmek için cisterna magna enjeksiyonu, lenf düğümleri görüntüleme ve bütün-montaj boyama yöntemlerini. Bu entegre protokol, santral sinir sistemi homeostazı ve nörolojik hastalık araştırmaları için kapsamlı analiz sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Louveau, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+features+of+central+nervous+system+lymphatic+vessels.">Structural and functional features of central nervous system lymphatic vessels.</a> Nature. 523, 337-341 (2015).</li><li>Aspelund, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dural+lymphatic+vascular+system+that+drains+brain+interstitial+fluid+and+macromolecules.">A dural lymphatic vascular system that drains brain interstitial fluid and macromolecules.</a> J Exp Med. 212, 991-999 (2015).</li><li>Sandrone, S., Moreno-Zambrano, D., Kipnis, J., Van Gijn, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+(delayed)+history+of+the+brain+lymphatic+system.">A (delayed) history of the brain lymphatic system.</a> Nat Med. 25, 538-540 (2019).</li><li>Da Mesquita, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+aspects+of+meningeal+lymphatics+in+ageing+and+alzheimer's+disease.">Functional aspects of meningeal lymphatics in ageing and alzheimer's disease.</a> Nature. 560, 185-191 (2018).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meningeal+lymphatic+vessels+regulate+brain+tumor+drainage+and+immunity.">Meningeal lymphatic vessels regulate brain tumor drainage and immunity.</a> Cell Res. 30, 229-243 (2020).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meningeal+lymphatic+vessels+mediate+neurotropic+viral+drainage+from+the+central+nervous+system.">Meningeal lymphatic vessels mediate neurotropic viral drainage from the central nervous system.</a> Nat Neurosci. 25, 577-587 (2022).</li><li>Rustenhoven, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+alterations+in+meningeal+immunity+drive+impaired+cns+lymphatic+drainage.">Age-related alterations in meningeal immunity drive impaired cns lymphatic drainage.</a> J Exp Med. 220, (2023).</li><li>Kodama, T., Hatakeyama, Y., Kato, S., Mori, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+fluid+drainage+pathways+in+lymphatic+vessels+and+lymph+nodes+using+a+mouse+model+to+test+a+lymphatic+drug+delivery+system.">Visualization of fluid drainage pathways in lymphatic vessels and lymph nodes using a mouse model to test a lymphatic drug delivery system.</a> Biomed Opt Express. 6, 124-134 (2015).</li><li>Banerjee, R., Knauer, L. A., Yang, Y. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+in+vivo+and+in+vitro+study+of+lymphatic+valve+formation+driven+by+shear+stress+signaling+pathway.">Protocol for in vivo and in vitro study of lymphatic valve formation driven by shear stress signaling pathway.</a> STAR Protoc. 4, 102141 (2023).</li><li>Akwii, R. G., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+dermal+lymphatic+endothelial+cell+isolation.">Murine dermal lymphatic endothelial cell isolation.</a> J Vis Exp. (197), e65393 (2023).</li><li>Xavier, A. L. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannula+implantation+into+the+cisterna+magna+of+rodents.">Cannula implantation into the cisterna magna of rodents.</a> J Vis Exp. (135), e57378 (2018).</li><li>Hsieh, Y. T., Chen, S. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+and+analysis+of+neuromuscular+junctions+using+immunofluorescence.">Visualization and analysis of neuromuscular junctions using immunofluorescence.</a> Bio Protoc. 14, e5076 (2024).</li><li>Banerji, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lyve-1,+a+new+homologue+of+the+cd44+glycoprotein,+is+a+lymph-specific+receptor+for+hyaluronan.">Lyve-1, a new homologue of the cd44 glycoprotein, is a lymph-specific receptor for hyaluronan.</a> J Cell Biol. 144, 789-801 (1999).</li><li>Da Mesquita, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meningeal+lymphatics+affect+microglia+responses+and+anti-abeta+immunotherapy.">Meningeal lymphatics affect microglia responses and anti-abeta immunotherapy.</a> Nature. 593, 255-260 (2021).</li><li>Betsholtz, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+and+controversies+in+meningeal+biology.">Advances and controversies in meningeal biology.</a> Nat Neurosci. 27, 2056-2072 (2024).</li><li>Ma, Q., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+lymphatic+efflux+limits+cerebrospinal+fluid+flow+to+the+brain.">Rapid lymphatic efflux limits cerebrospinal fluid flow to the brain.</a> Acta Neuropathol. 137, 151-165 (2019).</li><li>Hablitz, L. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+glymphatic+influx+is+correlated+with+high+eeg+delta+power+and+low+heart+rate+in+mice+under+anesthesia.">Increased glymphatic influx is correlated with high eeg delta power and low heart rate in mice under anesthesia.</a> Sci Adv. 5, eaav5447 (2019).</li><li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+body+posture+on+brain+glymphatic+transport.">The effect of body posture on brain glymphatic transport.</a> J Neurosci. 35, 11034-11044 (2015).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>ACSF (Artificial Cerebrospinal Fluid)</td><td>Tocris&nbsp;&nbsp;</td><td>Cat# 3525</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 donkey anti-rat IgG (1:1000 dilution)</td><td>Invitrogen</td><td>Cat# A-21208</td><td></td></tr><tr><td>Antifade Mounting Medium</td><td>Beyotime</td><td>Cat# P0126</td><td></td></tr><tr><td>Blunt-tipped forceps</td><td>RWD Life Science</td><td>Cat# F12011-10</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Beyotime</td><td>Cat# ST023</td><td></td></tr><tr><td>Coverslips</td><td>CITOTEST</td><td>Cat# 80312-3161</td><td></td></tr><tr><td>Curved sharp forceps</td><td>RWD Life Science</td><td>Cat# F11003-11</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat# D9542</td><td></td></tr><tr><td>Depilatory cream</td><td>Veet</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Dish-10 cm</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Cat# 150464</td><td></td></tr><tr><td>Disposable intravenous (IV) infusion needle</td><td>Zhejiang Kindly Medical Devices&nbsp;</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol-75%</td><td>Sinopharm Chemical Reagent&nbsp;</td><td>Cat# 80176961</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Excell</td><td>Cat# FSD500</td><td></td></tr><tr><td>Filter-0.22 &micro;m</td><td>Merck Millipore&nbsp;</td><td>Cat# SLGPR33RB</td><td></td></tr><tr><td>Glass slides</td><td>CITOTEST</td><td>Cat# 80340-3610</td><td></td></tr><tr><td>Isoamyl alcohol</td><td>Sinopharm Chemical Reagent&nbsp;</td><td>Cat# 10003218</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum</td><td>PerkinElmer</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Micro forceps</td><td>Shinva Medical Instrument&nbsp;</td><td>Cat# ZD372RB&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissors</td><td>Shinva Medical Instrument&nbsp;</td><td>Cat# ZO13056R</td><td></td></tr><tr><td>Microinjection needle (25 &micro;L)</td><td>Shanghai Gaoge Industry &amp; Trade&nbsp;</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Microinjection pump</td><td>Voyage Power</td><td>Cat# QHZS-001A</td><td></td></tr><tr><td>Mouse: C57BL/6 wild-type, 8 weeks old, male&nbsp;</td><td>Cavens</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Needle-30G</td><td>Zhejiang Kindly Medical Devices&nbsp;</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Normal Saline</td><td>Beyotime</td><td>Cat# ST341</td><td></td></tr><tr><td>Ovalbumin, Alexa Fluor&trade; 647 Conjugate</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Cat# O34784</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde Fix Solution-4%</td><td>Beyotime</td><td>Cat# P0099</td><td></td></tr><tr><td>PE-10 tubing</td><td>Shanghai Qiujing Biochemical Reagent and Instrument</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline (1x PBS)</td><td>Beyotime</td><td>Cat# ST447</td><td></td></tr><tr><td>Rat anti-LYVE-1 (1:200 dilution)</td><td>Santa Cruz</td><td>Cat# sc-65647</td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Jonec</td><td>Cat# JSZ6</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic frame</td><td>RWD Life Science</td><td>Cat# 68030</td><td></td></tr><tr><td>Straight scissors</td><td>RWD Life Science</td><td>Cat# S12007-10</td><td></td></tr><tr><td>Syringe-1-mL&nbsp;</td><td>Zhejiang Kindly Medical Devices&nbsp;</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Adhesive I</td><td>3M Vetbond</td><td>Cat# 1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Tribromoethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat# T48402</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>Cat# T8787</td><td></td></tr><tr><td>VS120 High-throughput fluorescence imaging system</td><td>Olympus</td><td>N/A</td><td></td></tr></tbody></table>

meningeal lenfatiklerin değerlendirilmesi İçin entegre protokol: cisterna magna enjeksiyonu, lenf düğümleri görüntüleme, meningeal diseksiyon ve bütün-montaj boyama

Integrated Protocol for Assessing Meningeal Lymphatics: Cisterna Magna Injection, Lymph Node Imaging, Meningeal Dissection, and Whole-Mount Staining

Meningeal Lenfatiklerin Değerlendirilmesi İçin Entegre Protokol: Cisterna Magna enjeksiyonu, Lenf Düğümleri Görüntüleme, Meningeal Diseksiyon ve Bütün-Montaj Boyama

Meningeal lymphatic vessels (MLVs) have emerged as critical regulators of central nervous system (CNS) homeostasis, and MLVs dysfunction has been ...

integrated-protocol-for-assessing-meningeal-lymphatics-cisterna-magna

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Burada Sisterna magna cannulation (CMc), minimal invaziv bir şekilde izleyiciler, yüzeyler ve sinyal molekülleri beyin-omurilik sıvısı (BOS) sunmak için gerçekleştirmek için bir protokol açıklayın. Farklı görüntüleme yöntemleri ile birlikte, CMc glymphatic sistemi ve CSF dynamics değerlendirme yanı sıra çeşitli bileşiklerin beyin çapında teslim sağlar.

Kanül implantasyon Sisterna Magna kemirgenler içine

Biz kafatası stabilize edilebilir ucunda bir iğne bükülmüş bir intrasisternal enjeksiyon tarif, böylece altta yatan parankim hasar riskini ortadan kaldırarak. Bu yaklaşım, leptomeningeal hücrelerin genetik kader haritalanması ve manipülasyonları ve beyin-omurilik sıvısı hareketini izlemek için kullanılabilir.

İntrasisternal Enjeksiyon Ile Leptomeningeal Hücre Modifikasyonu İndüksiyonu

Bir protokol hafif levha floresan mikroskobu ile doku temizleme birleştirerek sunulmaktadır (LSFM) lenfatik damarlar ve lenf düğümleri üç boyutlu ve hücresel çözünürlük görüntüleri elde etmek için (LNs) beyin omurilik sıvısı toplama (BOS) ve spinal epidural sıvı.

IDISCO+ ve Hafif Sac Floresan Mikroskobu ile Vertebral Lenfatik Vaskülatür ve Drenajın Üç Boyutlu Görüntülemesi

Bu makale, beyin, omurilik ve meninksler dahil olmak üzere merkezi sinir sistemi içindeki yerleşik ve periferik olarak türetilmiş bağışıklık hücrelerini incelemek için optimize edilmiş iki protokol sunmaktadır. Bu protokollerin her biri, kararlı durum ve enflamatuar koşullar altında bu bölmeleri işgal eden hücrelerin işlevini ve bileşimini belirlemeye yardımcı olur.

İmmün hücrelerin Aşağı Akış Analizi için Merkezi Sinir Sistemi Dokularının ve İlişkili Meninkslerin İzole Edilmesi

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE), multipl sklerozun bir hayvan modeli olarak hizmet eder. Bu makalede EAE'de spinal kord inflamasyonu, demiyelinizasyon ve aksonal yaralanmayı skorlamaya yönelik bir yaklaşım anlatılmaktadır. Ek olarak, canlı farelerde aksonal hasarın değerlendirilmesini kolaylaştıran, fare serumundaki çözünür nörofilament ışık seviyelerini ölçmek için bir yöntem sunulmaktadır.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelitte Merkezi Sinir Sistemi İnflamasyonu, Demiyelinizasyon ve Akson Hasarının Skorlanması

Serebral kan akışının düzenlenmesini in vivo olarak incelemek için, geleneksel farmakolojik yöntemler invazivdir ve genellikle kafatasına, duraya ve leptomeninglere zarar verir. Bu çalışmada, nanoenjektör kılavuzluğunda intrasisternal magna (ICM) enjeksiyonunu lazer benek kontrast görüntüleme ile birleştiren, kafatasının ve leptomeninglerin bütünlüğünü koruyan minimal invaziv bir teknik geliştirdik.

Serebral Kan Akışı Düzenlemesini İn Vivo Çalışmak için Eşleştirilmiş Sarnıç Magna Nanoenjeksiyon ve Lazer Benek Kontrast Görüntüleme Testi

Protokol, farelerde leptomeningeal metastazı sağlam bir şekilde indükleyen, travmayı ve ekstrakraniyal tümör yükünü azaltan, tümör hücrelerinin perkütan ponksiyon yolu yoluyla cisterna magna'ya enjekte edilmesi için bir yöntemi tanımlar.

Farelerde Leptomeningeal Metastaz Çalışmaları için Minimal İnvaziv Sarnıç Magna Enjeksiyon Modeli

Burada, diğer değişkenlerin etkisini en aza indirmek ve cerrahiye dayalı araştırmaların yürütülmesini standartlaştırmak için derin servikal lenf nodunun veya afferent lenfatik damarının sıçanda posterior fasiyal ven ile anastomoz adımlarını açıkça tanımlamak için bir protokol sunuyoruz.

Sıçan Modelinde Derin Servikal Lenfovenöz Anastomoz için Cerrahi Protokoller: Lenf Nodu ve Lenfatik Damar Anastomozları

Bu deneysel protokol, baş bölgeden lenfatik drenajın doğrudan ve nicel olarak değerlendirilmesini sağlayan derin servikal lenf kanalı kanülasyonlu bir fare modelini sunmaktadır. Model, merkezi sinir sistemi (CNS) kaynaklı çözgütlerin, bağışıklık hücre popülasyonlarının ve CNS hedefli tedavilerin dağılımı ve temizlenmesinin ayrıntılı analizini kolaylaştırır.

Baş ve Beyinden Lenfatik Taşınmayı Değerlendirmek İçin Boyun Lenf Kanalı Kanülasyonlu Fare Modeli

Bu protokol, indocyanine green (ICG) yakın kızılötesi görüntüleme ile ultrason birleştirerek fırlanan sonrası lenfatik drenajı, farelerde plantar ICG clearansı ve popliteal lenf düğümü büyümesini nicelikle ölçer.

ICG yakın kızılötesi görüntüleme ve kırma sonrası ultrason kullanılarak lenfatik drenajın değerlendirilmesi

Öğrenin, farelerde meningeal lenfatik damarların işlev ve morfolojisini değerlendirmek için cisterna magna enjeksiyonu, lenf düğümleri görüntüleme ve bütün-montaj boyama yöntemlerini. Bu entegre protokol, santral sinir sistemi homeostazı ve nörolojik hastalık araştırmaları için kapsamlı analiz sağlar.

Meningeal Lenfatiklerin Değerlendirilmesi İçin Entegre Protokol: Cisterna Magna enjeksiyonu, Lenf Düğümleri Görüntüleme, Meningeal Diseksiyon ve Bütün-Montaj Boyama (Video) | JoVE Journal

Meningeal Lenfatiklerin Değerlendirilmesi İçin Entegre Protokol: Cisterna Magna enjeksiyonu, Lenf Düğümleri Görüntüleme, Meningeal Diseksiyon ve Bütün-Montaj Boyama

Daha fazla video keşfet