Name: Hepatoma Hücrelerinde Mitoz Sırasında Lipid Damlası ve Organel Dinamiklerini Görselleştirmek İçin Flüoresans Tabanlı Bir Yöntem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-15T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Keşfedin hepatoma hücrelerinde mitoz sırasında lipid damlası dinamiklerini görselleştirme yöntemini. Floresan boyama ve mikroskopi ile hücre döngüsü senkronizasyonu kombinasyonu, organel biyolojisi ve kanser hücre fizyolojisi araştırmaları için güvenilir bir protokol sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Wang, G., Jiang, Q., Zhang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mitotic+kinases+in+coupling+the+centrosome+cycle+with+the+assembly+of+the+mitotic+spindle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of mitotic kinases in coupling the centrosome cycle with the assembly of the mitotic spindle.</a> J Cell Sci. 127 (Pt 19), 4111-4122 (2014).</li>
<li>Asteriti, I. A., De Mattia, F., Guarguaglini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crosstalk+between+AURKA+and+PLK1+in+mitotic+entry+and+spindle+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Crosstalk between AURKA and PLK1 in mitotic entry and spindle assembly.</a> Front Oncol. 5, 283(2015).</li>
<li>Gavet, O., Pines, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+activation+of+Cyclin+B1-CDK1+coordinates+entry+to+mitosis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Progressive activation of Cyclin B1-CDK1 coordinates entry to mitosis.</a> Dev Cell. 18 (4), 533-543 (2010).</li>
<li>Mardin, B. R., Agircan, F. G., Lange, C., Schiebel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plk1+controls+the+NEK2A-PP1%CE%B3+antagonism+in+centrosome+disjunction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Plk1 controls the NEK2A-PP1γ antagonism in centrosome disjunction.</a> Curr Biol. 21 (13), 1145-1151 (2011).</li>
<li>Taguchi, N., Ishihara, N., Jofuku, A., Oka, T., Mihara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitotic+phosphorylation+of+dynamin-related+GTPase+DRP1+participates+in+mitochondrial+fission%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Mitotic phosphorylation of dynamin-related GTPase DRP1 participates in mitochondrial fission.</a> J Biol Chem. 282 (15), 11521-11529 (2007).</li>
<li>Mitra, K., Wunder, C., Roysam, B., Lin, G., Lippincott-Schwartz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hyperfused+mitochondrial+state+achieved+at+G1-S+regulates+cyclin+E+buildup+and+entry+into+S+phase%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A hyperfused mitochondrial state achieved at G1-S regulates cyclin E buildup and entry into S phase.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (29), 11960-11965 (2009).</li>
<li>Makiyama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trafficking+of+acetyl-C16-ceramide-NBD+with+long-term+stability+and+no+cytotoxicity+into+the+Golgi+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Traffic%22%5BJournal%5D)">Trafficking of acetyl-C16-ceramide-NBD with long-term stability and no cytotoxicity into the Golgi complex.</a> Traffic. 16 (5), 476-492 (2015).</li>
<li>Tang, D., Yuan, H., Vielemeyer, O., Perez, F., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+phosphorylation+of+GRASP65+during+mitotic+Golgi+disassembly%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Sequential phosphorylation of GRASP65 during mitotic Golgi disassembly.</a> Biol Open. 1 (12), 1204-1214 (2012).</li>
<li>Xia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+ste20-type+kinase+TAOK1+confers+protection+against+hepatocellular+lipotoxicity+through+metabolic+rewiring%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatol+Commun%22%5BJournal%5D)">Silencing of ste20-type kinase TAOK1 confers protection against hepatocellular lipotoxicity through metabolic rewiring.</a> Hepatol Commun. 7 (4), e0037(2023).</li>
<li>Makishima, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translation+inhibitors+induce+formation+of+cholesterol+ester-rich+lipid+droplets%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Translation inhibitors induce formation of cholesterol ester-rich lipid droplets.</a> PLoS ONE. 7 (8), e42379(2012).</li>
<li>Krahmer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+correlation+profiles+identify+lipid+droplet+proteins+with+high+confidence%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Protein correlation profiles identify lipid droplet proteins with high confidence.</a> Mol Cell Proteomics. 12 (5), 1115-1126 (2013).</li>
<li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucagon+regulates+intracellular+distribution+of+adipose+differentiation-related+protein+during+triacylglycerol+accumulation+in+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Glucagon regulates intracellular distribution of adipose differentiation-related protein during triacylglycerol accumulation in the liver.</a> J Lipid Res. 51 (9), 2571-2580 (2010).</li>
<li>Itabe, H., Yamaguchi, T., Nimura, S., Sasabe, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perilipins%3A+A+diversity+of+intracellular+lipid+droplet+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids+Health+Dis%22%5BJournal%5D)">Perilipins: A diversity of intracellular lipid droplet proteins.</a> Lipids Health Dis. 16 (1), 83(2017).</li>
<li>Herker, E., Vieyres, G., Beller, M., Krahmer, N., Bohnert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+droplet+contact+sites+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Lipid droplet contact sites in health and disease.</a> Trends Cell Biol. 31 (5), 345-358 (2021).</li>
<li>Krahmer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organellar+proteomics+and+phospho-proteomics+reveal+subcellular+reorganization+in+diet-induced+hepatic+steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Organellar proteomics and phospho-proteomics reveal subcellular reorganization in diet-induced hepatic steatosis.</a> Dev Cell. 47 (2), 205-221.e7 (2018).</li>
<li>Ramosaj, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+droplet+availability+affects+neural+stem%2Fprogenitor+cell+metabolism+and+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lipid droplet availability affects neural stem/progenitor cell metabolism and proliferation.</a> Nat Commun. 12 (1), 7362(2021).</li>
<li>Cruz, A. L. S., Barreto, E. A., Fazolini, N. P. B., Viola, J. P. B., Bozza, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+droplets%3A+Platforms+with+multiple+functions+in+cancer+hallmarks%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Lipid droplets: Platforms with multiple functions in cancer hallmarks.</a> Cell Death Dis. 11 (2), 105(2020).</li>
<li>Mashek, D. G., Khan, S. A., Sathyanarayan, A., Ploeger, J. M., Franklin, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+lipid+droplet+biology%3A+Getting+to+the+root+of+fatty+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Hepatic lipid droplet biology: Getting to the root of fatty liver.</a> Hepatology. 62 (3), 964-967 (2015).</li>
<li>Minami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+lipophagy+ameliorates+nonalcoholic+steatohepatitis+through+extracellular+lipid+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Liver lipophagy ameliorates nonalcoholic steatohepatitis through extracellular lipid secretion.</a> Nat Commun. 14 (1), 4084(2023).</li>
<li>Makiyama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+of+intracellular+lipid+droplets+during+cell+division+in+Huh7+hepatoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Behavior of intracellular lipid droplets during cell division in Huh7 hepatoma cells.</a> Exp Cell Res. 433 (2), 113855(2023).</li>
<li>Makiyama, T., Higashi, S., Sakane, H., Nogami, S., Shirataki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B3-taxilin+temporally+regulates+centrosome+disjunction+in+a+NEK2A-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">γ-taxilin temporally regulates centrosome disjunction in a NEK2A-dependent manner.</a> Exp Cell Res. 362 (2), 412-423 (2018).</li>
<li>Aizawa, R., Ibayashi, M., Mitsui, J., Tsukamoto, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+droplet+formation+is+spatiotemporally+regulated+in+oocytes+during+follicular+development+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">Lipid droplet formation is spatiotemporally regulated in oocytes during follicular development in mice.</a> J Reprod Dev. 70 (1), 18-24 (2024).</li>
<li>Ohsaki, Y., Maeda, T., Fujimoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fixation+and+permeabilization+protocol+is+critical+for+the+immunolabeling+of+lipid+droplet+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Fixation and permeabilization protocol is critical for the immunolabeling of lipid droplet proteins.</a> Histochem Cell Biol. 124 (5), 445-452 (2005).</li>
<li>Helps, N., Luo, X., Barker, H., Cohen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nima-related+kinase+2+%28NEK2%29%2C+a+cell-cycle-regulated+protein+kinase+localized+to+centrosomes%2C+is+complexed+to+protein+phosphatase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Nima-related kinase 2 (NEK2), a cell-cycle-regulated protein kinase localized to centrosomes, is complexed to protein phosphatase 1.</a> Biochem J. 349 (Pt 2), 509-518 (2000).</li>
<li>O'Regan, L., Blot, J., Fry, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitotic+regulation+by+nima-related+kinases%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Div%22%5BJournal%5D)">Mitotic regulation by nima-related kinases.</a> Cell Div. 2, 25(2007).</li>
<li>Xie, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MDT-28%2FPLIN-1+mediates+lipid+droplet-microtubule+interaction+via+DLC-1+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">MDT-28/PLIN-1 mediates lipid droplet-microtubule interaction via DLC-1 in Caenorhabditis elegans.</a> Sci Rep. 9 (1), 14902(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.25% Trypsin/EDTA</td><td>Wako</td><td>201-16945</td><td>Hücre disosiyasyonu</td></tr><tr><td>10 cm tabak</td><td>Corning</td><td>430167</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>35 mm doku kültürü tabağı</td><td>IWAKI</td><td>3000-035</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>6 cm doku kültürü tabağı</td><td>IWAKI</td><td>3010-060</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Anti-PLIN2 (ADRP) antikoru</td><td>Proteintech</td><td>15294-1-AP</td><td>Lipid damlacık belirteci</td></tr><tr><td>Anti-PLIN3 (TIP47) antikoru</td><td>Proteintech</td><td>10694-1-AP</td><td>Lipid damlacık belirteci</td></tr><tr><td>Anti-&amp;alpha;-tubulin antikoru</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6199</td><td>Mitoz eğik iplikçik belirteci</td></tr><tr><td>BODIPY 493/503</td><td>Invitrogen</td><td>D3922</td><td>Nötr lipid boyama</td></tr><tr><td>Şişe üstü filtre (0.22 &amp;mu;m)</td><td>NEST</td><td>WNB343001</td><td>OA&ndash;BSA çözeltisinin steril filtrasyonu</td></tr><tr><td>Bovin serum albümini (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8022</td><td>Engelleme reaktifi</td></tr><tr><td>Berrak oje</td><td>Ticari olarak temin edilebilir</td><td>Uygulanamaz</td><td>Kapaklarda sızdırmazlık</td></tr><tr><td>Konfokal mikroskop</td><td>Olympus</td><td>FV1200</td><td>Yüksek çözünürlüklü görüntüleme</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Dojindo</td><td>340-07971</td><td>Nükleer boyama</td></tr><tr><td>D-PBS (&ndash;)</td><td>Wako</td><td>049-29793</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Dulbecco&rsquo;s Modifiye Eagle&rsquo;s Ortamı (DMEM)</td><td>Wako</td><td>041-30081</td><td>Hücre kültürü ortamı</td></tr><tr><td>Etanol (99.5%)</td><td>Wako</td><td>057-00456</td><td>Oleik asit için çözücü</td></tr><tr><td>Yağ asidi&ndash;serbest BSA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7030</td><td>Oleik asit için taşıyıcı protein</td></tr><tr><td>Fetal Bovin Serum</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td>Ortam takviyesi</td></tr><tr><td>Floresan ikincil antikorlar (Alexa Fluor&ndash;konjuge)</td><td>Ticari olarak temin edilebilir</td><td>Uygulanamaz</td><td>Tür spesifik immünofloresan için ikincil antikorlar</td></tr><tr><td>FV10-ASW yazılımı</td><td>Olympus</td><td>Uygulanamaz</td><td>Görüntü alımı ve işleme</td></tr><tr><td>Cam kapakçıklar (&phi;15 mm)</td><td>Matsunami</td><td>2-176-03</td><td>Mikroskopi için hücre ekimi</td></tr><tr><td>Cam mikroskobu slaytları</td><td>Matsunami</td><td>SFF-001</td><td>Kaplamaları monte etmek için cam slaytlar</td></tr><tr><td>Glutaraldehit (%25 çözelti)</td><td>Wako</td><td>073-00536</td><td>PLIN3 için alternatif fiksasyon</td></tr><tr><td>HuH7 hücreleri</td><td>JCRB Hücre Bankası</td><td>JCRB0403</td><td>İnsan hepatoma hücre hattı</td></tr><tr><td>LipidTOX Kırmızı Nötr Lipid Boyası</td><td>Invitrogen</td><td>H34476</td><td>Alternatif lipid damlacık boyası</td></tr><tr><td>Nitrojen gazı (N2)</td><td>Ticari olarak temin edilebilir</td><td>Uygulanamaz</td><td>Etanolün buharlaştırılması</td></tr><tr><td>Oleik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O1383</td><td>Oleik asit&ndash;BSA konjugatlarının hazırlanması için</td></tr><tr><td>Paraformaldehit, PBS içinde %4</td><td>Nacalai Tesque</td><td>09154-85</td><td>Fiksasyon</td></tr><tr><td>Penisilin&ndash;Streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>Antibiyotikler</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin (&times;10)</td><td>Uygulanamaz</td><td>Uygulanamaz</td><td>Herhangi bir tedarikçi ile değiştirilebilir</td></tr><tr><td>RO-3306</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SML0569</td><td>G2/M senkronizasyonu için CDK1 inhibitörü</td></tr><tr><td>SlowFade Diamond Antifade Montaj Maddesi</td><td>Invitrogen</td><td>S36963</td><td>Montaj maddesi</td></tr><tr><td>Sodyum klorür (NaCl)</td><td>Wako</td><td>191-01665</td><td>150 mM NaCl hazırlanması</td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit (NaOH)</td><td>Wako</td><td>080-01061</td><td>Oleik asidin sabunlaştırılmasında kullanılır</td></tr><tr><td>Tali Hücresel Analiz Slaytları</td><td>Thermo</td><td>T10794</td><td>Hücre döngüsü analizi için kullanılır</td></tr><tr><td>Tali Görüntü Tabanlı Sitometre</td><td>Thermo</td><td>Uygulanamaz</td><td>Hücre döngüsü analizi için kullanılır</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td>Hücre geçirgenleşmesi</td></tr><tr><td>Geniş Alanlı Floresan Mikroskobu</td><td>KEYENCE</td><td>BZ-9000</td><td>Mitoz hücrelerin hızlı taraması</td></tr></tbody></table>

hepatoma hücrelerinde mitoz sırasında lipid damlası ve organel dinamiklerini görselleştirmek İçin flüoresans tabanlı bir yöntem

A Fluorescence-Based Method To Visualize Lipid Droplet And Organelle Dynamics During Mitosis in Hepatoma Cells

RO-3306 kullanılarak hepatoma hücrelerinin G2/M sınırında senkronizasyonu
Mitoz sırasında hücre içi organellerin dinamiklerini araştırmak için, G2/Msınırı 20,21'deki hücreleri senkronize etmek için seçici bir CDK1 inhibitörü olan RO-3306 kullanıldı. Hücreler CDK1 inhibitörüyle 20 saat ve ardından taze bir ortamda ek 1 saat işlendiğinde, hücrelerin %50'sinden fazlası G2/M sınırında senkronize edildi (<strong class="xfig...

Hepatoma Hücrelerinde Mitoz Sırasında Lipid Damlası ve Organel Dinamiklerini Görselleştirmek İçin Flüoresans Tabanlı Bir Yöntem

Intracellular lipid droplets (LDs) are ubiquitous in several cell types. LDs store neutral lipids such as triacylglycerol and cholesteryl ester and play ...

a-fluorescence-based-method-to-visualize-lipid-droplet-organelle

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Burada mitokondri zar potansiyel (MMP) belirlemek ve CLIC4 nakavt kaynaklı HN4 hücre apoptosis içinde vitroçalışma rodamine 123 uygulanması için detaylı bir iletişim kuralı mevcut. Ortak floresan mikroskop altında ve confocal lazer tarama floresan mikroskop MMP gerçek zamanlı değişiklik kaydedildi.

Mitokondri zar potansiyeli CLIC4 nakavt kaynaklı HN4 hücre Apoptosis Vitro çalışma tespiti

Bu protokol yağ asitleri ile stimülasyon üzerine insan bağırsak organoidlerinde lipid damlacık (LD) oluşumunun karakterizasyonu için bir test açıklar. Bu denemenin LD oluşumunun nicelleştirilmesi için nasıl kullanıldığını ve LD oluşumunu etkileyen ilaçlar için yüksek iş elde taramalarda nasıl kullanılabileceğini tartışıyoruz.

İnsan Bağırsak Organoidlerinde Lipid Damlacık Oluşumunun Karakterizasyonu ve Niceliği için Floresan Esaslı Bir Test

Yüksek hücresel çözünürlüğe sahip bir ATP taşıyıcısı olan nonhidrolize floresan adenozin trifosfatın (ATP) içselleştirilmesini görselleştirmek için tekrarlanabilir bir yöntem geliştirdik. Yöntemimizi bağımsız in vitro ve in vivo tahlil-insan tümör hücre hatları ve insan tümör dokusu ile ksinografted immün yetmezlikli fareler kullanarak doğruladık.

İnsan Tümör Hücrelerinde ve Tümör-ksinografted Farelerde Makropinositoz Aracılı ATP İçselleştirme için Floresan Mikroskopi

Mitofaji, mitokondriyal kalite kontrolünün birincil mekanizmasıdır. Bununla birlikte, in vivo mitofajinin değerlendirilmesi, güvenilir kantitatif tahlillerin eksikliği nedeniyle engellenmektedir. Burada, hücre pervasıtalı yeşil-floresan mitokondri boyası ve kırmızı-floresan lizozom boyası kullanılarak canlı hücrelerde mitofajinin gözlemlenmesi için bir protokol sunulmaktadır.

Mitokondri ve Lizozom için Floresan Boyalarla Mitopajinin Görselleştirilmesi

Burada, karaciğer dokusunda lipid damlacık karakterizasyonu için optimize edilmiş bir BODIPY 493/503 floresan tabanlı protokol gösterilmektedir. Ortogonal projeksiyonların ve 3D rekonstrüksiyonların kullanılmasıyla, florofor mikro-veziküler ve makroveziküler steatoz arasında başarılı bir ayrım yapılmasına izin verir ve hepatik steatoz değerlendirmesi için klasik histolojik protokollere tamamlayıcı bir yaklaşımı temsil edebilir.

Hepatik Steatoz Değerlendirmesi için Floresan Boyalı Lipit Damlacıklarının 3D Rekonstrüksiyon ile Analizi

Bu protokol, lipit damlacıklarını (LD'ler) boyamak, yağ asidi kaynaklı yağlı hepatosit modelinde LD'lerin boyutunu ve sayısını hesaplamak ve canlı hücre görüntüleme ile küçük LD'lerin büyük LD'lere kaynaşma sürecini gözlemlemek için BODIPY 493/503'ün nasıl kullanılacağını açıklamaktadır.

Sığır Hepatik Hücrelerinde Lipid Damlacık Büyüklüğü ve Füzyonunun Değerlendirilmesi

Bu teknik, floresan tabanlı canlı görüntüleme kullanarak HeLa hücrelerindeki mitokondriyal membran potansiyelini ve süperoksit seviyelerini görselleştirmek ve nicel olarak ölçmek için etkili bir iş akışını tanımlar.

HeLa hücrelerinde canlı görüntüleme kullanılarak mitokondriyal membran potansiyelinin ve süperoksit seviyelerinin floresan bazlı ölçümü

Lipofaji, lipid damlacıklarının bozulmasını içeren seçici bir otofaji şeklidir. Bu süreçteki işlev bozuklukları kanser gelişimi ile ilişkilidir. Bununla birlikte, kesin mekanizmalar henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Bu protokol, otofaji, lipid metabolizması ve kanser ilerlemesi arasındaki etkileşimi daha iyi anlamak için kantitatif görüntüleme yaklaşımlarını açıklar.

Lipofaji Yoluyla Lipid Damlacık Katabolizmasının Düzenlenmesinin Araştırılması

GFP-füzyon proteinleri yaygın konfokal mikroskobi organelleri görselleştirmek için kullanılır. Ancak, genellikle bireysel mutagenez organellerin morfolojisini etkileyen mutasyonlar için tarama gerektirir ve zaman alıcıdır. Burada, neredeyse 5.000 maya gerekli olmayan genlerin aynı anda organel-GFP işaretleri dahil etmek için bir yöntem göstermektedir.

S. cerevisiae &quot;adlı organel morfolojisi küresel çalışma yüksek verimli bir yöntem

Hi-C yöntemi kromatin etkileşimler (1) tarafsız, genom kimlik sağlar. Hi-C çiftler yakınlık ligasyonu ve güçlü paralel sıralama. Ortaya çıkan veriler farklı ölçeklerde genomik mimarlık eğitimi için kullanılabilir: ilk sonuçlar, kromozom toprakları, segregasyon, açık ve kapalı kromatin ve megabase ölçekte kromatin yapısı gibi özellikleri tespit.

Hi-C: genomların Üç boyutlu Mimari Eğitim Bir Yöntem.

Keşfedin hepatoma hücrelerinde mitoz sırasında lipid damlası dinamiklerini görselleştirme yöntemini. Floresan boyama ve mikroskopi ile hücre döngüsü senkronizasyonu kombinasyonu, organel biyolojisi ve kanser hücre fizyolojisi araştırmaları için güvenilir bir protokol sunar.

Hepatoma Hücrelerinde Mitoz Sırasında Lipid Damlası ve Organel Dinamiklerini Görselleştirmek İçin Flüoresans Tabanlı Bir Yöntem

Daha fazla video keşfet