ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Winden, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuberous+sclerosis+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Tuberous sclerosis complex.</a> Nat Rev Dis Primers. 12, 11(2026).</li>
<li>Ramani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+interface+of+tuberous+sclerosis+complex+and+autism+spectrum+disorder%3A+insights+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">The clinical interface of tuberous sclerosis complex and autism spectrum disorder: insights and future directions.</a> Neurol Sci. 46 (6), 2571-2580 (2025).</li>
<li>Lyall, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+epidemiology+of+autism+spectrum+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Public+Health%22%5BJournal%5D)">The changing epidemiology of autism spectrum disorders.</a> Annu Rev Public Health. 38, 81-102 (2017).</li>
<li>Nazeer, A., Ghaziuddin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autism+spectrum+disorders%3A+clinical+features+and+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Autism spectrum disorders: clinical features and diagnosis.</a> Pediatr Clin North Am. 59, 19-25 (2012).</li>
<li>Kern, J. K., Geier, D. A., Sykes, L. K., Geier, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relevance+of+neuroinflammation+and+encephalitis+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Relevance of neuroinflammation and encephalitis in autism.</a> Front Cell Neurosci. 9, 519(2016).</li>
<li>Careaga, M., Murai, T., Bauman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+immune+activation+and+autism+spectrum+disorder%3A+from+rodents+to+nonhuman+and+human+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Maternal immune activation and autism spectrum disorder: from rodents to nonhuman and human primates.</a> Biol Psychiatry. 81 (5), 391-401 (2017).</li>
<li>Croonenberghs, J., Bosmans, E., Deboutte, D., Kenis, G., Maes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+inflammatory+response+system+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychobiology%22%5BJournal%5D)">Activation of the inflammatory response system in autism.</a> Neuropsychobiology. 45, 1-6 (2002).</li>
<li>Girgis, R. R., Kumar, S. S., Brown, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cytokine+model+of+schizophrenia%3A+emerging+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The cytokine model of schizophrenia: emerging therapeutic strategies.</a> Biol Psychiatry. 75 (4), 292-299 (2014).</li>
<li>Heuer, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+exploratory+examination+of+neonatal+cytokines+and+chemokines+as+predictors+of+autism+risk%3A+the+early+markers+for+autism+study%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">An exploratory examination of neonatal cytokines and chemokines as predictors of autism risk: the early markers for autism study.</a> Biol Psychiatry. 86 (4), 255-264 (2019).</li>
<li>Sasayama, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Negative+correlation+between+serum+cytokine+levels+and+cognitive+abilities+in+children+with+autism+spectrum+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22J+Intell%22%5BJournal%5D)">Negative correlation between serum cytokine levels and cognitive abilities in children with autism spectrum disorder.</a> J Intell. 5 (2), 19(2017).</li>
<li>Banks, W. A., Kastin, A. J., Gutierrez, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penetration+of+interleukin-6+across+the+murine+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Penetration of interleukin-6 across the murine blood-brain barrier.</a> Neurosci Lett. 179 (1-2), 53-56 (1994).</li>
<li>Otkıran, G., Erdoğan, M. A., Uyanıkgil, Y., Erbaş, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+interferon-alpha+exposure+induces+autism-like+neurobehavioral+and+neurochemical+alterations+in+male+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroimmune+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Prenatal interferon-alpha exposure induces autism-like neurobehavioral and neurochemical alterations in male offspring.</a> J Neuroimmune Pharmacol. 21, 4(2026).</li>
<li>Smith, S. E. P., Li, J., Garbett, K., Mirnics, K., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+immune+activation+alters+fetal+brain+development+through+interleukin-6%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Maternal immune activation alters fetal brain development through interleukin-6.</a> J Neurosci. 27 (40), 10695-10702 (2007).</li>
<li>Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+vertebrate+model+to+reveal+neural+substrates+underlying+the+transitions+between+conscious+and+unconscious+states%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states.</a> Sci Rep. 10, 15789(2020).</li>
<li>Belo, M. A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+to+study+inflammation%3A+a+tool+for+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model to study inflammation: a tool for drug discovery.</a> Biomed Pharmacother. 144, 112310(2021).</li>
<li>Ka, J., Pak, B., Han, O., Lee, S., Jin, S. -W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+transcriptomic+changes+between+zebrafish+and+mice+upon+high+fat+diet+reveals+evolutionary+convergence+in+lipid+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Comparison of transcriptomic changes between zebrafish and mice upon high fat diet reveals evolutionary convergence in lipid metabolism.</a> Biochem Biophys Res Commun. 530 (4), 638-643 (2020).</li>
<li>Li, Y., Hu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+multi-site+infection+model+in+zebrafish+larvae+for+studying+Staphylococcus+aureus+infectious+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Genet+Genomics%22%5BJournal%5D)">Establishment of multi-site infection model in zebrafish larvae for studying Staphylococcus aureus infectious disease.</a> J Genet Genomics. 39 (9), 521-534 (2012).</li>
<li>Nicoli, S., Ribatti, D., Cotelli, F., Presta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+tumor+xenografts+induce+neovascularization+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Mammalian tumor xenografts induce neovascularization in zebrafish embryos.</a> Cancer Res. 67 (7), 2927-2931 (2007).</li>
<li>Cao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carboxyl+graphene+oxide+nanoparticles+induce+neurodevelopmental+defects+and+locomotor+disorders+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Carboxyl graphene oxide nanoparticles induce neurodevelopmental defects and locomotor disorders in zebrafish larvae.</a> Chemosphere. 270, 128611(2021).</li>
<li>Martini, D., Pucci, C., Gabellini, C., Pellegrino, M., Andreazzoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+the+natural+alkaloid+berberine+affects+cardiovascular+system+morphogenesis+and+functionality+during+zebrafish+development%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Exposure to the natural alkaloid berberine affects cardiovascular system morphogenesis and functionality during zebrafish development.</a> Sci Rep. 10, 17358(2020).</li>
<li>Sun, M., et al. Robotic cardinal vein microinjection of zebrafish larvae based on 3D positioning. 2021 IEEE International Conference on Robotics and Automation (ICRA), Xi'an, China, , (2021).</li>
<li>Kedra, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TrkB+hyperactivity+contributes+to+brain+dysconnectivity%2C+epileptogenesis%2C+and+anxiety+in+zebrafish+model+of+tuberous+sclerosis+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">TrkB hyperactivity contributes to brain dysconnectivity, epileptogenesis, and anxiety in zebrafish model of tuberous sclerosis complex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (4), 2170-2179 (2020).</li>
<li>Kim, S. -H., Speirs, C. K., Solnica-Krezel, L., Ess, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+model+of+tuberous+sclerosis+complex+reveals+cell-autonomous+and+non-cell-autonomous+functions+of+mutant+tuberin%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Zebrafish model of tuberous sclerosis complex reveals cell-autonomous and non-cell-autonomous functions of mutant tuberin.</a> Dis Model Mech. 4 (2), 255-267 (2011).</li>
<li>Konadu, B., Cox, C. K., Gibert, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+microinjection+of+free+fatty+acids+and+triacylglycerol+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the microinjection of free fatty acids and triacylglycerol in zebrafish embryos.</a> STAR Protoc. 5 (2), 103086(2024).</li>
<li>Evans, S. S., Repasky, E. A., Fisher, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fever+and+the+thermal+regulation+of+immunity%3A+the+immune+system+feels+the+heat%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Fever and the thermal regulation of immunity: the immune system feels the heat.</a> Nat Rev Immunol. 15 (6), 335-349 (2015).</li>
<li>Zabegalov, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+repetitive+behaviors+in+zebrafish+and+their+relevance+to+human+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Abnormal repetitive behaviors in zebrafish and their relevance to human brain disorders.</a> Behav Brain Res. 367, 101-110 (2019).</li>
<li>Scheldeman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mTOR-related+neuropathology+in+mutant+tsc2+zebrafish%3A+phenotypic%2C+transcriptomic+and+pharmacological+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">mTOR-related neuropathology in mutant tsc2 zebrafish: phenotypic, transcriptomic and pharmacological analysis.</a> Neurobiol Dis. 108, 225-237 (2017).</li>
<li>Ilyin, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intracerebroventricular+lipopolysaccharide+administration+on+behavioral%2C+neurochemical%2C+and+neurogenomic+responses+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of intracerebroventricular lipopolysaccharide administration on behavioral, neurochemical, and neurogenomic responses in adult zebrafish.</a> Behav Brain Res. 493, 115676(2025).</li>
<li>Luo, R., Yao, Y., Chen, Z., Sun, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+examination+of+the+LPS-TLR4+immune+response+through+the+analysis+of+molecular+structures+and+protein-protein+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Commun+Signal%22%5BJournal%5D)">An examination of the LPS-TLR4 immune response through the analysis of molecular structures and protein-protein interactions.</a> Cell Commun Signal. 23, 142(2025).</li>
<li>Grebennikova, D. V., Shandilya, U. K., Karrow, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+TLR4+and+its+alternative+lipopolysaccharide+%28LPS%29+sensing+pathways+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Beyond TLR4 and its alternative lipopolysaccharide (LPS) sensing pathways in zebrafish.</a> Genes. 16 (9), 1014(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Borosilikat Cam kılcal damarlar (Dış çap 1.0 mm/ iç çap 0.75 mm)</td><td>Sutter Instrument</td><td>BF150-75-10</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 (kalsiyum klorür)</td><td>Chempur</td><td>118748703</td><td></td></tr><tr><td>Eğimli Slayt (1/100 mm)</td><td>Bresser</td><td>5916710</td><td></td></tr><tr><td>Kılcal tutucu (Grip başlık seti 4 boyut 0)</td><td>Fertilart Sp. z o.o</td><td>5196082001</td><td></td></tr><tr><td>Alev/Brown mikropipet çekici</td><td>Sutter Instrument</td><td>P-1000</td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td>Chempur</td><td>115752837</td><td></td></tr><tr><td>İnsan IL6</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>200-06-20UG</td><td>Stok konsantrasyon: 10 &micro;g/mL, Çalışma konsantrasyonu: 2 pg/nL (0.9% NaCl içinde seyreltilmiş)</td></tr><tr><td>Enjektör pompası FemtoJet 4i</td><td>Eppendorf</td><td>E5252000021</td><td></td></tr><tr><td>KCl (potasyum klorür)</td><td>Chempur</td><td>117397402</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&middot;6H2O (magnezyum klorür hekzahidrat)</td><td>Chempur</td><td>116120500</td><td></td></tr><tr><td>Femtotips Mikroyükleyici Uçlar Femtojet Mikroenjektör için</td><td>Eppendorf</td><td>EPE 5242956003</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop Leica M165 FC 1983 büyütme</td><td>Leica Microsysytems</td><td>https://www.leica-microsystems.com/products/ ışık-mikroskopları/stereo-mikroskoplar/p/leica-m165-fc/</td><td></td></tr><tr><td>Mineral yağ</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5904</td><td></td></tr><tr><td>NaCl (sodyum klorür)</td><td>Chempur</td><td>117941206</td><td></td></tr><tr><td>Pronase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5147-1G</td><td>Stok konsantrasyon: 20 mg/mL (ultra saf suda hazırlanmış), Çalışma konsantrasyonu: 0.5 mg/mL (E3 içinde seyreltilmiş)</td></tr><tr><td>Tricaine</td><td>Sigma-Aldrich/Merck</td><td>A-5040</td><td></td></tr><tr><td>Tris baz</td><td>Carl Roth</td><td>4855.3</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Mavisi</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure Düşük Erime Noktasılı Agarose</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>16520050</td><td></td></tr><tr><td>ZebraBox eklentisi - Foto Motor Yanıtı EZBPMR</td><td>Animalab</td><td>https://animalab.eu/zebrabox-high-throughput-monitoring-system</td><td></td></tr><tr><td>Zebrabox</td><td>ViewPoint</td><td>https://www.viewpoint.fr/product/zebrafish/fish-behavior-monitoring/zebrabox</td><td>Otomatik analiz odası</td></tr></tbody></table>

tsc zebrafish larvalarının kanına interleukin-6'nın mikroenjeksiyonu ve nöropsikiyatrik bozukluk benzeri davranışların incelenmesi

Microinjection of Interleukin-6 into the Bloodstream of TSC Zebrafish Larvae to Study Neuropsychiatric Disorder-Like Behaviors

TSC zebrafish larvalarının kanına interleukin-6'nın mikroenjeksiyonu ve nöropsikiyatrik bozukluk benzeri davranışların incelenmesi

Patients with tuberous sclerosis complex (TSC1/TSC2 mutations) exhibit variable expressivity of autism spectrum disorder (ASD), and maternal immune ...

Araştırmam, IL-6 ile indüklenen inflamasyonun, beyin gelişimini ve fonksiyonunu etkilemek için otizmle ilişkili genetik risk mutasyonlarıyla nasıl etkileşime girdiğini incelemektedir. Geniş kapsamlı LPS kaynaklı inflamasyonun aksine, bu protokol seçici olarak IL-6 seviyelerini yükselterek sitokin spesifik nörogelişimsel etkilerin hassas bir şekilde araştırılmasına olanak tanır. Başlamak için mikroenjeksiyon iğnelerini, gerekli reaktifleri ve döllenme sonrası ikinci günündeki zebrafish embriyolarını hazırlayın.E3 ortamında ağırlıkça hacimce %1'lik bir agaroz çözeltisi hazırlayın ve agaroz tamamen çözünüp çözelti berraklaşana kadar ısıtın. Agaroz çözeltisinin kısa bir süre soğumasını bekleyin. Yüzey boyunca düzgün bir tabaka oluşmasını sağlamak için 100 milimetrelik bir Petri kabına yaklaşık 30 mililitre dökün.Agaroz hâlâ sıvı haldeyken ancak katılaşmaya başladığında, tekdüze oluklar oluşturmak için yüzeye nazikçe bir silikon kalıp yerleştirin. Döllenmeden sonraki ikinci günde olan yaklaşık 100 korionlu embriyoyu 50 milimetrelik küçük, agaroz kaplı bir Petri kabına aktarın. Embriyoların tamamen daldığından emin olarak kaba dört mililitre taze hazırlanmış pronaz çözeltisi ekleyin.Oda sıcaklığında üç ila beş dakika inkübe edin. Stereo mikroskop altında, embriyoların korionlardan ayrılışını izleyin. Korionların enzimatik olarak uzaklaştırılmasını kolaylaştırmak için kabı ara ara nazikçe döndürün veya çalkalayın.Embriyoların çoğunluğu korionlarından kurtulana kadar işleme devam edin. Embriyoları beş ila altı kez taze E3 embriyo medyumu ile değiştirerek iyice yıkayın. Larvaların zarar görmesini önlemek ve optimal kültür koşullarını korumak için tüm korionların ve pronaz kalıntılarının temizlendiğinden emin olun.Cam bir pastör pipeti kullanarak, yaklaşık 50 adet koryonsuz larvayı 40 mL E3 medyumu içeren 100 mm'lik bir Petri kabına aktarın. Larvaları mikroenjeksiyona kadar E3 medyumu içinde tutun. Bir stereo mikroskop altında, önceden hazırlanmış cam kapiler tüpün ucunu, çapı yaklaşık 3 µm olan bir açıklığa sahip bir mikropipet oluşturmak için ince bir pensle dikkatlice kırın.Kontrol enjeksiyonları için %0,9 ağırlık/hacim oranında sodyum klorür çözeltisi hazırlayın. IL-6 enjeksiyonları için ise %0,9 sodyum klorür içerisinde nanolitre başına iki pikogram Interleukin 6 veya IL-6 çözeltisi hazırlayın. Enjeksiyon sırasında görselleştirmeyi kolaylaştırmak için, her 10 µL enjeksiyon çözeltisine 1 µL %0,05 Trypan blue ekleyin.Bir pipet yardımıyla, solüsyonu bir mikro yükleyici uca doldurun. Ardından, hazırlanan mikropipet enjeksiyon iğnesini, hava kabarcığı oluşmadığından emin olarak yaklaşık üç mikrolitre enjeksiyon solüsyonu ile mikro yükleyici uç kullanarak arkadan doldurun. Doldurulmuş enjeksiyon iğnesini, mikroenjeksiyon sistemine bağlanacak olan kılcal tüp tutucuya sabitleyin.Ardından, bir kalibrasyon lamı üzerine küçük bir damla mineral yağ yerleştirin. Damlacıkları mineral yağın içine püskürterek enjeksiyon hacmini kalibre edin. Damlacık çapını, 0,01 milimetre ölçekli kalibrasyon lamını kullanarak ölçün.Yaklaşık bir nanolitre damlacık hacmi elde etmek için enjeksiyon basıncını ayarlayın. Stresi minimize etmek ve tutarlı sedasyon sağlamak amacıyla, E3 medium'una final 1X konsantrasyonda trikayn ekleyerek larvaları küçük gruplar halinde anestezileyin. Fertilizasyondan sonraki ikinci günündeki larvaları tek tek katılaştırılmış agaroz enjeksiyon plakasına aktarın.Kabı stereo mikroskobun altına yerleştirin. Bir cam pipet kullanarak, her bir larvayı Cuvier kanalı açıkça görünecek ve erişilebilir olacak şekilde nazikçe yönlendirin. Stereo mikroskop altında kalbe doğru hareket eden kan hücrelerini takip ederek, mikropipet ucunu Cuvier kanalının giriş noktasına konumlandırın.Hazırlanan solüsyonun ilk damlasını Cuvier kanalına enjekte edin. Yaklaşık 20 saniye sonra, Cuvier kanalına ikinci bir damla enjekte edin. Enjeksiyonun ardından, larvaları 40 mililitre E3 ortamı içeren temiz bir 100 milimetrelik Petri kabına nazikçe aktarın.Larvaları toparlanmaları için 28.5 °C'deki bir inkübatöre geri yerleştirin. Ertesi gün, daha önce gösterildiği şekilde mikroenjeksiyon prosedürünü tekrarlayın. Döllenmeden beş gün sonra larvaları, davranışsal analizler, beyin görüntüleme veya immünofloresan analizi dahil olmak üzere alt uygulamalar için kullanın.IL-6 mikroenjeksiyonu, sodyum klorür enjeksiyonlarına kıyasla larval canlılığı etkilememiştir. Döllenmeden beş gün sonraki sağkalım oranları, IL-6 enjekte edilen ve NACL enjekte edilen gruplar arasında ayırt edilemez düzeydeydi; bu durum, dozaj rejiminin iyi tolere edildiğini ve spesifik olmayan bir toksisiteye yol açmadığını göstermektedir. Mikroenjeksiyonlar, enjekte edilmemiş kardeşlere kıyasla canlılığı hafifçe azaltmıştır.Homozigot Tuberous Sclerosis Complex 2 veya TSC2 mutantları, vahşi tip kardeşlerine göre anlamlı derecede daha yüksek bazal prostaglandin E2 veya PGE2 seviyeleri sergilemiştir. Heterozigot TSC2 mutantları, vahşi tip kardeşlerle karşılaştırıldığında bazal PGE2 seviyelerinde mütevazı ve anlamlı olmayan bir artış göstermiştir. IL-6 mikroenjeksiyonu sonrası heterozigot TSC2 mutantlarında PGE2 seviyeleri keskin bir şekilde yükselmiştir.Açık alan testi, enjekte edilmemiş kontrollerdeki TSC2 mutantlarının, yabani tip kardeşlerine kıyasla artmış anksiyete benzeri davranışlar sergilediğini ve IL-6 mikroenjeksiyonlarının bu davranışı etkilemediğini göstermiştir. Heterozigot TSC2 ve homozigot TSC2 mutantları, enjekte edilmemiş kontrollerdeki yabani tip kardeşlerin yanı sıra IL-6 enjekte edilmiş TSC2 larvalarına göre arenanın dış bölgesinde anlamlı derecede daha fazla zaman geçirmiş ve merkez keşiflerinde azalma göstermiştir. IL-6 enjeksiyonları, özellikle heterozigot TSC2 mutantlarında tekrarlayıcı, stereotipik yüzme paternlerini artırmıştır.Repetitif döngü sergileyen IL-6 enjekte edilmiş heterozigot TSC2 mutantlarının oranı, sodyum klorür enjekte edilen kontrollere kıyasla anlamlı derecede artmıştır. Bu protokol, zebra balıklarında nörogelişim ve davranış üzerindeki gen çevresi etkilerini değerlendirmek için kontrollü IL-6 inflamasyon çalışmalarına olanak tanır. Bu protokolü uygularken dikkat edilmesi gereken temel hususlar arasında tutarlı iğne boyutu, hassas iki nanolitre enjeksiyon hacmi ve larvaların E3 dışındaki süresinin minimize edilmesi yer almaktadır. Gelecekteki çalışmalar, IL-6 inflamasyonu ve genetik riskin beyin gelişimi ve davranışı birlikte nasıl etkilediğini araştırabilir.

microinjection-interleukin-6-into-bloodstream-tsc-zebrafish-larvae-to

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Mikroenjeksiyon döllenmiş zebrafish embriyolar içine yabancı maddeler tanıtmak için bir köklü ve etkili bir yöntemdir. Burada, mRNA aşırı ekspresyonu gerçekleştirmek için sağlam bir mikroenjeksiyon tekniği ve morfolino oligonükleotid gen devirme çalışmaları zebrafish göstermektedir.

Zebra balığı Embriyolar mRNA ve morfolino Antisens Oligonükleotidler Mikroenjeksiyon.

Bu video morfolino veya mRNA sonraki gelişimi sırasında spesifik gen ürünlerinin seviyesini azaltmak veya artırmak için tek hücreli aşamada zebrafish embriyoların nasıl enjekte edilebilir gösterir.

Gen Fonksiyon Analiz Zebra balığı Embriyolar Mikroenjeksiyon

Zebra balığı hızla gelişmesi, küçük boyutu ve şeffaflık enfeksiyon doğal immün kontrolü çalışması için çok büyük avantajları...

Zebra balığı Larva yılında Dissemine Kandidiyazis non-invaziv Görüntüleme

Video, nöroinflamasyonu indüklemek için zebra balığı larvalarının beyinlerine lipopolisakkaritlerin (LPS) mikroenjeksiyonunu göstermektedir. Larvalar agaroz kaplı bir tabağa yerleştirilir, iğne beyin ventriküllerine yerleştirilir ve LPS enjekte edilir. Enjekte edilen LPS, nöroinflamasyona yol açan bir bağışıklık tepkisini tetikler.

Lipopolisakkarit Enjeksiyonu ile Zebra Balığı Larvalarında Nöroinflamasyonun İndüklenmesi

Bu yazıda, morfolino antisens oligonükleotidler kullanılarak yetişkin zebrabalıkları telencephalon ventriküler hücrelerde gen ifadesinin manipülasyonu için bir yöntem ortaya koymaktadır. Biz, yetişkin omurgalı beynin fonksiyonel çalışmalar için kullanılan bir hızlı ve verimli protokolü olarak bu yöntem sunuyoruz.

Morfolino Oligonükleotidler bir Cerebroventricular Mikroenjeksiyon kullanarak Yetişkin Zebra balığı Beyin Gen İfade Mikromanipülasyon

Zebra balığı embriyo ve larva mikroenjeksiyon birçok Zebra balığı modellerinde kullanılan çok önemli ama zorlu bir tekniktir. Burada, Zebra balığı mikroenjeksiyon ve görüntüleme için yönünü ve istikrar içinde yardım etmek için microscale araçlar bir dizi mevcut.

Microstructured cihazlar için en iyi duruma getirilmiş mikroenjeksiyon ve Zebra balığı larva görüntüleme

Burada, DEPDC5 geninin geçici inhibisyonundan kaynaklanan bir zebra balığı epilepsi modelinin geliştirilmesi ve karakterizasyonu için bir protokol sunuyoruz.

Zebra balığı epilepsi modelinde davranışsal ve fizyolojik analiz

Bu protokol, ortaya çıkan nöroinflamatuar yanıtı ve nörotoksisiteyi incelemek için bir zebra balığı larva modelinde beyin ventriküler bölgesine lipopolisakkaritin mikroenjeksiyonunu göstermektedir.

Nöroinflamasyon ve Nörotoksisiteyi Değerlendirmek için Larva Zebra Balıklarına Lipopolisakkaritin Beyin Ventriküler Mikroenjeksiyonları

Gelişmekte olan zebra balığı optik tektumunda mikroglia hücrelerinin canlı görüntülemesini gerçekleştirmek için hızlı taramalı konfokal mikroskopiden yararlanan ve bu hücrelerin dinamiklerinin in vivo analizine olanak tanıyan bir yöntem gösteriyoruz.

Zebra Balığı Embriyosunda Mikroglia Dinamiğinin Canlı Görüntülenmesi ve Karakterizasyonu

RASopatiler, RAS-MAPK yolağı hiperaktivasyonunun neden olduğu multisistemik genetik sendromlardır. Doğrulanmayı bekleyen potansiyel olarak patojenik varyantlar sürekli olarak ortaya çıkarken, zayıf klinik öncesi kanıtlar tedaviyi sınırlar. Burada, genç muhabir zebra balığında canlı FRET görüntüleme ile RASopati ile ilişkili ERK aktivasyon seviyelerini ve embriyogenez sırasındaki farmakolojik modülasyonunu test etmek ve çapraz doğrulamak için in vivo protokolümüzü açıklıyoruz.

Canlı FRET mikroskobu ve immünofloresan ile erken zebra balığı Noonan sendromu modellerinde ERK aktivite modülasyonunu değerlendirmek için etkili bir protokol

International Institute of Molecular Mechanisms and Machines, IMol, Polish Academy of Sciences.  Genetik olarak hassas organizmalarda inflamatuar sinyallerin nörogelişimi nasıl etkilediğini modellemek için, zebrafish larvalarının Cuvier (ortak kardinal damar) kanalına IL-6 mikroenjeksiyonu için bir protokol sunuyoruz; bu protokol iltihabın kontrollü indüklenmesini ve tüberoz skleroz kompleksi (TSC) bağlamında gelişimsel etkisinin değerlendirilmesini mümkün kılmaktadır.

TSC zebrafish larvalarının kanına interleukin-6'nın mikroenjeksiyonu ve nöropsikiyatrik bozukluk benzeri davranışların incelenmesi

Daha fazla video keşfet