Name: Kemogenetik ve spektral yaklaşımlarla gündüz sirkadiyen faz kaymalarını indüklemek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Keşfedin kemogenetik ve spektral yöntemlerle memelilerde gündüz sirkadiyen faz kaymalarını nasıl güvenilir şekilde indükleyebilirsiniz. Bu protokoller sirkadiyen plastisite ve fotik entrenman mekanizmalarını incelemek için zamanlaması hassas araçlar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol>
	<li>Hattar S, Liao HW, Takao M, Berson DM, Yau KW. Melanopsin-containing retinal ganglion cells: architecture, projections, and intrinsic photosensitivity. Science. 2002;295(5557):1065&#8211;70.</li>
	<li>Jones JR, Simon T, Lones L, Herzog ED. SCN VIP neurons are essential for normal light-mediated resetting of the circadian system. J Neurosci. 2018;38(37):7986&#8211;95.</li>
	<li>Coursey PJ. Daily light sensitivity rhythm in a rodent. Science. 1960;131:33&#8211;35.</li>
	<li>Kornhauser JM, Ginty DD, Greenberg ME, Mayo KE, Takahashi JS. Light entrainment and activation of signal transduction pathways in the SCN. Prog Brain Res. 1996;111:133&#8211;46.</li>
	<li>Ding JM, Weber ET, Faiman LE, Rea MA, Gillette MU. Resetting the biological clock: mediation of nocturnal circadian shifts by glutamate and NO. Science. 1994;266(5191):1713.</li>
	<li>Mintz EM, Gillespie CF, Price KM, Albers HE. Activation of NMDA receptors in the suprachiasmatic nucleus produces light-like phase shifts of the circadian clock in vivo. J Neurosci. 1999;19(12):5124&#8211;30.</li>
	<li>Shirakawa T, Moore RY. Glutamate shifts the phase of the circadian neuronal firing rhythm in the rat suprachiasmatic nucleus in vitro. Neurosci Lett. 1994;178(1):47&#8211;50.</li>
	<li>Shibata S, Watanabe A, Hamada T, Ono M, Watanabe S. N-methyl-D-aspartate induces phase shifts in circadian rhythm of neuronal activity of rat SCN in vitro. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1994;267(2):R360&#8211;R364.</li>
	<li>Asai M, Yamaguchi S, Isejima H, Jonouchi M, Moriya T, et al. Visualization of mPer1 transcription in vitro: NMDA induces a rapid phase shift of mPer1 gene in cultured SCN. Curr Biol. 2001;11(19):1524&#8211;27.</li>
	<li>Sladek M, Sumova A. Modulation of NMDA-mediated clock resetting in the suprachiasmatic nuclei of mPer2 (Luc) mouse by endocannabinoids. Front Physiol. 2019;10:361.</li>
	<li>Shibata S, Moore RY. Neuropeptide Y and optic chiasm stimulation affect suprachiasmatic nucleus circadian function in vitro. Brain Res. 1993;615(1):95&#8211;100.</li>
	<li>Jones JR, Tackenberg MC, McMahon DG. Manipulating circadian clock neuron firing rate resets molecular circadian rhythms and behavior. Nat Neurosci. 2015;18(3):373&#8211;75.</li>
	<li>Kim S, McMahon DG. Light sets the brain&#8217;s daily clock by regional quickening and slowing of the molecular clockworks at dawn and dusk. Elife. 2021;10:e70137.</li>
	<li>de Vries MJ, Treep JA, de Pauw ES, Meijer JH. The effects of electrical stimulation of the optic nerves and anterior optic chiasm on the circadian activity rhythm of the Syrian hamster: involvement of excitatory amino acids. Brain Res. 1994;642(1-2):206&#8211;12.</li>
	<li>Rusak B, Groos G. Suprachiasmatic stimulation phase shifts rodent circadian rhythms. Science. 1982;215(4538):1407&#8211;09.</li>
	<li>Duy PQ, Komal R, Richardson ME, Hahm KS, Fernandez DC, et al. Light has diverse spatiotemporal molecular changes in the mouse suprachiasmatic nucleus. J Biol Rhythms. 2020;35(6):576&#8211;87.</li>
	<li>Liu A, Milner ES, Peng YR, Blume HA, Brown MC, et al. Encoding of environmental illumination by primate melanopsin neurons. Science. 2023;379(6630):376&#8211;81.</li>
	<li>Milner ES, Do MTH. A population representation of absolute light intensity in the mammalian retina. Cell. 2017;171(4):865&#8211;876.e16.</li>
	<li>Komal R, Beier C, Nath A, et al. ipRGC properties prevent light from shifting the SCN clock during daytime. Nature. 2026;650(8103):942&#8211;50. .</li>
	<li>Jewett ME, Rimmer DW, Duffy JF, Klerman EB, Kronauer RE, et al. Human circadian pacemaker is sensitive to light throughout subjective day without evidence of transients. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1997;273(5):R1800&#8211;R1809.</li>
	<li>Revell VL, Molina TA, Eastman CI. Human phase response curve to intermittent blue light using a commercially available device. J Physiol. 2012;590(19):4859&#8211;68.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AAV2-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry</td><td>Addgene</td><td>44361</td><td>Cre-dependent viral vector encoding excitatory DREADD (hM3Dq) fused to mCherry for selective ipRGC activation</td></tr><tr><td>Anti-c-Fos antibody (rabbit monoclonal)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>2250S</td><td>Primary antibody used to detect c-Fos as a marker of neuronal activation</td></tr><tr><td>Anti-tdTomato antibody (goat)</td><td>LSBio</td><td>LS-C340696</td><td>Primary antibody used to detect mCherry/tdTomato reporter expression</td></tr><tr><td>Blue LED driver</td><td>Thorlabs</td><td>LEDD1B</td><td>Power supply for controlling intensity and output of blue LED</td></tr><tr><td>Blue LED light source</td><td>Thorlabs</td><td>M470L5</td><td>LED source emitting blue light (λmax ≈ 470 nm) for photic stimulation</td></tr><tr><td>ClockLab software</td><td>Actimetrics</td><td>Version 6.0.53</td><td>Software for acquisition and analysis of circadian locomotor activity data</td></tr><tr><td>Clozapine-N-oxide (CNO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0832-5MG</td><td>Ligand used to activate hM3Dq DREADD receptors in vivo</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>62248</td><td>Fluorescent nuclear stain for labeling cell nuclei</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>Fluorescent secondary antibody for detection of goat primary antibodies</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>Fluorescent secondary antibody for detection of rabbit primary antibodies</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td>Mounting medium used to preserve fluorescence in tissue sections</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji) software</td><td>NIH</td><td>Version 2.16.0/1.54g</td><td>Open-source software for image processing and quantitative analysis</td></tr><tr><td>Opn4cre Mice</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>RRID:IMSR_JAX:035925</td><td>Mice used for chemogenetic activation</td></tr><tr><td>Violet LED driver</td><td>Mightex</td><td>SLA-1000-2</td><td>Power supply for controlling violet LED output</td></tr><tr><td>Violet LED light source</td><td>Mightex</td><td>BLS-LCS-0385-04-22</td><td>LED source emitting violet light (λmax ≈ 385 nm) for wavelength-specific stimulation</td></tr><tr><td>Wild-type mice</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>Jackson strain #101043</td><td>Mice used for violet light experiment</td></tr></tbody></table>

kemogenetik ve spektral yaklaşımlarla gündüz sirkadiyen faz kaymalarını indüklemek

Inducing Daytime Circadian Phase Shifts Using Chemogenetic and Spectral Approaches

Kemogenetik ve spektral yaklaşımlarla gündüz sirkadiyen faz kaymalarını indüklemek

In mammals, circadian phase shifting during the daytime is limited by reduced photic responsiveness of the suprachiasmatic nucleus (SCN), restricting the ...

inducing-daytime-circadian-phase-shifts-using-chemogenetic-spectral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Sirkadiyen saatler tek tek hücrelerin içinde fonksiyon, yani, bu hücre-özerktir. Burada, non-invaziv, lusiferaz tabanlı gerçek zamanlı biyolüminesans teknolojisini kullanarak cep özerk saat modelleri üretme yöntemleri açıklanmaktadır. Muhabir hücreleri sirkadiyen biyoloji eğitimi için uysal, fonksiyonel model sistemleri sağlıyoruz.

Lusiferaz Biyoparlaklık Gazeteciler kullanma Gen Ekspresyonunun Hücre-özerk Sirkadiyen Saat Ritimleri İzlenmesi

Hücresel sirkadiyen ritim meme epitel hücreleri belirlemek için bir vitro bioluminescence tahlil sunulur. Bu yöntem memeli hücre muhabir plazmid istikrarsızlığın luciferase dönem 2 gen düzenleyici denetimi altında ifade kullanır. Sirkadiyen ritim organ özgü etkileri değerlendirmek için diğer hücre tipleri için uyarlanabilir.

Vitro Sirkadiyen ritim meme epitel hücreleri ayırdetmek için bioluminescence tahlil

Genetik olarak kodlanmış luciferase gen ekspresyonu popüler bir non-invaziv muhabir var. Gaz ve sıcaklık optimize Kaydedici (timsah) Imaging otomatik bir boyuna luciferase çok çeşitli koşullar altında kollarındaki hücrelerden Boylamsal kayıt sağlar. İşte nasıl timsah sirkadiyen ritim araştırma bağlamında kullanılabilir göstermektedir.

Kollarındaki gazetecilere bir otomatik boyuna Luciferase gaz ve sıcaklık optimize Kaydedici (timsah) Imaging kullanarak esnek ölçüm

Bu yeni geliştirilmiş floresans tabanlı teknoloji uzun vadeli, suprachiasmatic çekirdeği (SCN) sirkadiyen saat genlerde transkripsiyonu gerçek zamanlı olarak ve yüksek zamansal çözünürlükte fareler serbestçe hareket izleme sağlar.

Vivo Sirkadiyen saat gen ekspresyonu floresans gazetecilere kullanarak fare Suprachiasmatic çekirdeği olarak izlenmesi

Uyku kaybı ve sirkadiyen hizalama çok sayıda operasyonel kazalara ve olaylara katkıda bulunur. Tedbirlerin ve çalışma çizelgeleme tasarımlarının etkinliğini azaltmaya yönelik etkinliği, operasyonel ortamlarda değerlendirmek zor olabilir. Bu yazıda karmaşık operasyonel ortamlarda uyku, sirkadiyen, yorgunluk ve performans verilerinin toplanması için bir yaklaşım özetlenmiştir.

Karmaşık operasyonel ortamlarda uyku, Circadian, yorgunluk ve performans verilerini toplama

Burada, katılımcıların Münih ChronoType Anketi, altın standart sirkadiyen faz biyobelirteçleri ve aktigrafik ölçüleri temel alınarak sirkadiyen fenotip gruplarına doğru kategorize etmesini takiben performanstaki diurnal ritimleri araştırmak için bir yöntem saklıyız.

Gerçek Dünyada İnsan Sirkadiyen Fenotilik ve Diurnal Performans Testi

Burada, Drosophila'yı sirkadiyen bir güne nasıl senkronize edebileceğimizi anlatıyoruz. Bu biyolojik ritim ve kronobiyoloji eğitimi için gerekli ilk ve en önemli adımdır.

Drosophila Melanogaster Sirkadiyen Entrainment

Biz günlük lokomotor aktivite ritimleri kayıt için prosedürler...

Sirkadiyen Rhythms Eğitim ve Parametreler Uyku Lokomotor Aktivitesi Assaying Drosophila</em

Ayrık fare beyin bölgelerinin RNA ekspresyon profillemesi, hassas ve tekrarlanabilir bir doku toplama stratejisi gerektirir. Burada, hem koronal beyin kesitlenmesi hem de doku orajörü yardımıyla mikrodissection kullanan bir protokol açıklanmaktadır. Elde edilen örneklerden sağlanan toplam RNA'nın verimi ve kalitesi, özetlenen yöntemin kullanışlılığını doğrulamaktadır.

Toplam RNA İzolasyonu ve Alt Nesil Sıralama ve Kaynak gösterilmeden kullanılamaz Ayrık Fare Beyin Bölgeler Mikrodisseksiyon Sigara Lazer Yakalama Mikroskopi Yaklaşım

Biz intrasellüler serbest kalsiyum konsantrasyonu ve sinaptik etkinliği değişiklikleri eşzamanlı bir ganglion hazırlanmasında nasıl takip edilebileceğini...

Mollusk içinde hücre içi kalsiyum konsantrasyonu ve Synaptic Etkinliği İzlenmesi Değişiklikler<em&gt; Aplysia&#39;nın</em

Keşfedin kemogenetik ve spektral yöntemlerle memelilerde gündüz sirkadiyen faz kaymalarını nasıl güvenilir şekilde indükleyebilirsiniz. Bu protokoller sirkadiyen plastisite ve fotik entrenman mekanizmalarını incelemek için zamanlaması hassas araçlar sunar.

Kemogenetik ve spektral yaklaşımlarla gündüz sirkadiyen faz kaymalarını indüklemek

Daha fazla video keşfet