ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Vogel, J. W. et al. Spread of pathological tau proteins through communicating neurons in human Alzheimer&#8217;s disease. Nat Commun 11, 2612 (2020).</li>
	<li>Weber, A. J. et al. Tau seeds induce neurofibrillary tangle formation across brain regions via individual-specific connectivity. Neuron S0896627326001649 doi:10.1016/j.neuron.2026.03.001&#160;(2026).</li>
	<li>Luo, W. et al. Microglial internalization and degradation of pathological tau is enhanced by an anti-tau monoclonal antibody. Sci Rep 5, 11161 (2015).</li>
	<li>Bol&#243;s, M. et al. Direct Evidence of Internalization of Tau by Microglia In Vitro and In Vivo. JAD 50, 77-87 (2016).</li>
	<li>Bol&#243;s, M. et al. Absence of CX3CR1 impairs the internalization of Tau by microglia. Mol Neurodegeneration 12, 59 (2017).</li>
	<li>Perea, J. R. et al. Extracellular Monomeric Tau Is Internalized by Astrocytes. Front. Neurosci. 13, 442 (2019).</li>
	<li>Fleeman, R. M., &#38; Proctor, E. A.&#160;Astrocytic Propagation of Tau in the Context of Alzheimer&#8217;s Disease. Front. Cell. Neurosci. 15, 645233 (2021).</li>
	<li>Mothes, T. et al. Astrocytic uptake of neuronal corpses promotes cell-to-cell spreading of tau pathology. acta neuropathol commun 11, 97 (2023).</li>
	<li>Eltom, K., Mothes, T., Libard, S., Ingelsson, M., &#38; Erlandsson, A. Astrocytic accumulation of tau fibrils isolated from Alzheimer&#8217;s disease brains induces inflammation, cell-to-cell propagation and neuronal impairment. acta neuropathol commun. 12, 34 (2024).</li>
	<li>Ferrer, I. et al. Involvement of Oligodendrocytes in Tau Seeding and Spreading in Tauopathies. Front. Aging Neurosci. 11, 112 (2019).</li>
	<li>Hopp, S. C. et al. The role of microglia in processing and spreading of bioactive tau seeds in Alzheimer&#8217;s disease. J Neuroinflammation 15, 269 (2018).</li>
	<li>Asai, H. et al. Depletion of microglia and inhibition of exosome synthesis halt tau propagation. Nat Neurosci 18, 1584-1593 (2015).</li>
	<li>Dickson, J. R. et al. Alzheimer disease-associated tau post-translational modification mimics impact tau propagation and uptake. Journal of Neuropathology &#38; Experimental Neurology 84, 459-470 (2025).</li>
	<li>Weisov&#225;, P. et al. Therapeutic antibody targeting microtubule-binding domain prevents neuronal internalization of extracellular tau via masking neuron surface proteoglycans. acta neuropathol commun 7, 129 (2019).</li>
	<li>Shamir, D. B., Rosenqvist, N., Rasool, S., Pedersen, J. T., &#38; Sigurdsson, E. M. Internalization of tau antibody and pathological tau protein detected with a flow cytometry multiplexing approach. Alzheimer&#8217;s &#38; Dementia. 12, 1098-1107 (2016).</li>
	<li>Evans, L. D. et al. Extracellular Monomeric and Aggregated Tau Efficiently Enter Human Neurons through Overlapping but Distinct Pathways. Cell Reports 22, 3612-3624 (2018).</li>
	<li>Holmes, B. B. et al. Heparan sulfate proteoglycans mediate internalization and propagation of specific proteopathic seeds. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 110, (2013).</li>
	<li>Boland, B. et al. Autophagy induction and autophagosome clearance in neurons: relationship to autophagic pathology in Alzheimer&#8217;s disease. J Neurosci 28, 6926-6937 (2008).</li>
	<li>Mandrekar, S. et al. Microglia Mediate the Clearance of Soluble A&#946; through Fluid Phase Macropinocytosis. J. Neurosci. 29, 4252-4262 (2009).</li>
	<li>Oh-hashi, K., Furuta, E., Fujimura, K., &#38; Hirata, Y. Application of a novel HiBiT peptide tag for monitoring ATF4 protein expression in Neuro2a cells. Biochemistry and Biophysics Reports. 12, 40-45 (2017).</li>
	<li>Schwinn, M. K. et al. CRISPR-Mediated Tagging of Endogenous Proteins with a Luminescent Peptide. ACS Chem. Biol. 13, 467-474 (2018).</li>
	<li>Boursier, M. E. et al. The luminescent HiBiT peptide enables selective quantitation of G protein&#8211;coupled receptor ligand engagement and internalization in living cells. Journal of Biological Chemistry 295, 5124-5135 (2020).</li>
	<li>Gibson, D. G. et al. Enzymatic assembly of DNA molecules up to several hundred kilobases. Nat Methods 6, 343-345 (2009).</li>
	<li>Shultz, A. et al. Extracellular tau clearance is governed by its aggregation state and independent of microglial activation by LPS and IFN-&#947;. Neurobiology of Disease 215, 107058 (2025).</li>
	<li>Rauch, J. N. et al. LRP1 is a master regulator of tau uptake and spread. Nature 580, 381-385 (2020).</li>
	<li>Rauch, J. N. et al. Tau Internalization is Regulated by 6-O Sulfation on Heparan Sulfate Proteoglycans (HSPGs). Sci Rep 8, 6382 (2018).</li>
	<li>Shultz, A., Mena, D., Roy, J. L., Nulman, J., &#38; Rauch, J. N. Protocol for the removal of bound endotoxin from tau protein produced in Escherichia coli. STAR Protocols. 6, 104177 (2025).</li>
	<li>Smith, P. K. et al. Measurement of protein using bicinchoninic acid. Analytical Biochemistry 150, 76-85 (1985).</li>
	<li>Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 72, 248&#8211;254 (1976).</li>
	<li>Dr&#228;ger, N. M. et al. A CRISPRi/a platform in human iPSC-derived microglia uncovers regulators of disease states. Nat Neurosci 25, 1149-1162 (2022).</li>
	<li>Elias, R. D. et al. Cathepsin C&#8211;Catalyzed Ligation Generates Intralysosomal Amyloid Fibrils from Dipeptide Esters. Preprint at https://doi.org/10.64898/2025.12.23.696283 (2025).</li>
</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>Accutase</td><td>Thermo Scientific</td><td>A1110501</td><td></td></tr><tr><td>Conical Sterile Polypropylene Centrifuge Tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-268</td><td></td></tr><tr><td>Corning Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free, LDEV-free</td><td>Corning</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, HEPES</td><td>Thermo Scientific</td><td>11330057</td><td></td></tr><tr><td>Doxycycline</td><td>Clontech</td><td>631311</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-190-250</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermo Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Graphing Software</td><td>GraphPad Prism (or similar)</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Human GM-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-03</td><td></td></tr><tr><td>KnockOut DMEM</td><td>Thermo Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>Luminescent Plate Reader</td><td>SpectraMax i3x (or similar) - Molecular Devices</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifuge Tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-002</td><td></td></tr><tr><td>Microplate, 96 Well, PS, Half-area, White</td><td>Greiner</td><td>675075</td><td></td></tr><tr><td>mTeSR Plus</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0276</td><td></td></tr><tr><td>Nano-Glo HiBiT Lytic Detection System</td><td>Promega</td><td>N3030</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine hydrobromide&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN15017750</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human IL-34</td><td>Thermo Scientific</td><td>200-34</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human M-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-25</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human TGF-&beta;1</td><td>Thermo Scientific</td><td>100-21C</td><td></td></tr><tr><td>Surface Treated Sterile Tissue Culture Plates</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB012927</td><td></td></tr><tr><td>Tau-HiBiT protein</td><td>In house</td><td>n/a</td><td>Tau protein with a VSGWRLFKKIS peptide tag</td></tr><tr><td>Trypsin Inhibitor</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9128</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Thermo Scientific</td><td>5-200-072</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 dihydrochloride</td><td>Bio-techne</td><td>1254</td><td></td></tr></tbody></table>
```

mikroglia'da tau clearance'ın zamanla Çözülmüş Ölçümü için bölünmüş-luciferase tamamlama testi

A Split-Luciferase Complementation Assay for Temporally Resolved Measurement of Tau Clearance in Microglia

Mikroglia'da Tau Clearance'ın Zamanla Çözülmüş Ölçümü için Bölünmüş-Luciferase Tamamlama Testi

As the resident immune cells of the central nervous system, microglia are central regulators of brain homeostasis and key mediators of neurodegenerative ...

a-split-luciferase-complementation-assay-for-temporally-resolved

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Video, biyolojik örneklerden izole edilen protein agregatlarının tohumlama aktivitesini tespit etmek için bir floresan rezonans enerji transferi (FRET) akış sitometrisi testini göstermektedir. Tau raportör proteinlerini eksprese eden memeli hücreleri, tau tohumları içeren lipozom transdüksiyon kompleksleri ile inkübe edilir. Bu tohumlar, raportör proteinlerin toplanmasına aracılık ederek akış sitometresinde bir FRET pozitif sinyalinin üretilmesine yol açar.

Tau-Tohum İndüklenen Raportör Protein Agregasyonunu Tespit Etmek için Bir FRET Akış Sitometrisi Tekniği

Bu videoda, kantitatif bir değerlendirme için floresanla aktive edilen hücre sıralaması yoluyla analiz edilen, pH'a duyarlı floresan etiketli Tau agregatları kullanılarak murin mikroglia tarafından Tau alımını ölçen hücre bazlı bir test gösterilmektedir.

Mikroglia tarafından Tau proteini alımını değerlendirmek için hücre bazlı bir test

Protein agregatlarının veya proteopatik tohumların hücreden hücreye transferi, nörodejeneratif hastalıklarda patolojinin ilerlemesinin altında yatıyor olabilir. Burada, rekombinant veya biyolojik numunelerden tohumlama aktivitesinin spesifik ve hassas bir şekilde tespit edilmesini sağlayan yeni bir FRET akış sitometrisi testi açıklanmaktadır.

FRET Akım Sitometrisi ile Proteopathic Tohumculuk Faaliyet duyarlı Algılama

Burada, tonik ve enzim-bağlı mikroelektrot dizileri (MEA) kullanılarak in vivo olarak fazik hücre dışı glutamat değişiklikleri ölçmek için bir uzamsal ve zamansal hassas bir yöntem için kurulum, yazılım navigasyon ve veri analizi tarif eder.

Enzim bazlı biyosensörlerin kullanılması Alzheimer Fare Modellerinde Tonik ve Fazik glutamat Ölçmek için

İki substrat özgü γ-secretase deneyleri başarılı bir şekilde üretilip. Burada sunulan her iki hücre tabanlı deneyleri γ-secretase enzimatik faaliyetleri yolu ile ateş böceği luciferase gazetecilere verim ölçmek için tasarlanmıştır.

Amiloid habercisi γ-Secretase-aracılı Protein ve çentik bölünme hücre tabanlı Luciferase muhabir tahlil platformlarda nicel ölçüm

Burada nicelik eylem Anti-tau antikorların mekanizmaları daha iyi tanımlamak için bir araştırma aracı oluşturma amacıyla microglia tarafından tau alımını değerlendirmek için bir hücre tabanlı tahlil açıklayın.

Antikor aracılıklı Tau izni Microglia tarafından eğitim için tahlil hücre tabanlı

Bu protokol, insan nöronal kültürlerin mutant insan Tau için lentiviral yapıları ile dönüştürücü olduğu bir prosedür ayrıntıları. Traned kültürler Tau toplamları ve ilişkili patolojileri görüntüler.

Tau Aggregation Lentiviral kullanarak eğitim için bir In vitro modeli-ınsan nöronların aracılı dönüştürücü

Tau, hem mikrotübülleri bağladığı sitoplazmada hem de Alzheimer hastalığına bağlı genlerin modülasyonu da dahil olmak üzere alışılmadık işlevler uyguladığı çekirdekte bulunan nöronal bir proteindir. Burada, sitoplazmik Tau gelen herhangi bir girişim hariç nükleer Tau işlevini araştırmak için bir yöntem açıklar.

Tau Subsellojen Lokalizasyonunun Hastalıkla İlgili Genlerin İfadesini Araştırmaaracı Olarak Modülasyonu

Burada, aksonal taşıma üzerindeki patolojik protein kaynaklı etkileri analiz etmek ve bu etkilere aracılık eden mekanik yolları belirlemek için primer hipokampal kemirgen nöronlarının transfeksiyonunun canlı hücre konfokal görüntüleme ile nasıl birleştirileceğini gösteriyoruz.

Primer hipokampal nöronlarda patolojik proteinlerin aksonal taşıma üzerindeki etkilerini ölçmek için canlı hücre görüntülemenin kullanılması

Bu makale, retinadaki postsinaptik nokta ve mikroglia hareketliliğini görselleştirme ve nicelleştirme yöntemini spinning disk konfokal mikroskopisi kullanarak göstermektedir.

Hasta Sare Retinasında Mikroglia Dinamikleri ve Sinapslarla Etkileşimlerin Canlı Görüntülemesi ve Karakterizasyonu

University of Massachusetts Amherst.  İnsan indüklenmiş pluripotent kök hücre (iPSC) türevli mikroglialarda mikroplaka tabanlı lüminesans sistemi kullanarak hücre dışı tau'nun klirensini ölçmek için hassas, zaman çözümlülüğüne sahip bir nicel platform tanımlıyoruz. Bu yaklaşım, mikro kuyu formatında tau bozulma kinetiklerinin hassas tespitini sağlar ve çeşitli deneysel koşullarda tau yönetiminin yüksek verimli sorgulanmasını sağlar.

Mikroglia'da Tau Clearance'ın Zamanla Çözülmüş Ölçümü için Bölünmüş-Luciferase Tamamlama Testi

Daha fazla video keşfet