Name: DNA-FISH Metafazı, İnsan Kanser Hücre Hatlarında Homojen Boyalı Bölgelerden Ekstrakromozomal DNAyı Ayırt Etmek İçin Yayılır (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-08-04T13:35:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Öğrenin, DNA-FISH metafaz yayma yöntemiyle insan kanser hücre hatlarında ekstrakromozomal DNA ve homojen boyalı bölgeleri tek hücre çözünürlüğünde ayırt edin. Bu protokol onkogen amplifikasyon yapısını güvenilir şekilde görselleştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol>
	<li>Albertson DG. Gene amplification in cancer. Trends Genet. 2006;22:447-455.</li>
	<li>Bagci O, Kurtg&#246;z S. Amplification of cellular oncogenes in solid tumors. N Am J Med Sci. 2015;7:341-346.</li>
	<li>Schimke RT, et al. Gene amplification and drug resistance in cultured animal cells. Cancer Treat Rev. 1984;11:9-17.</li>
	<li>Baker TM, Waise S, Tarabichi M, Van Loo P. Aneuploidy and complex genomic rearrangements in cancer evolution. Nat Cancer. 2024;5:228-239.</li>
	<li>Ohshima K, et al. Integrated analysis of gene expression and copy number identified potential cancer driver genes with amplification-dependent overexpression in 1,454 solid tumors. Sci Rep. 2017;7:641.</li>
	<li>Pecorino LT, Verhaak RGW, Henssen A, Mischel PS. Extrachromosomal DNA (ecDNA): An origin of tumor heterogeneity, genomic remodeling, and drug resistance. Biochem Soc Trans. 2022;50:1911-1920.</li>
	<li>Cox D, Yuncken C, Spriggs AI. Minute chromatin bodies in malignant tumours of childhood. Lancet. 1965;286:55-58.</li>
	<li>Kohl NE, et al. Transposition and amplification of oncogene-related sequences in human neuroblastomas. Cell. 1983;35:359-367.</li>
	<li>Giollant M, et al. Characterization of double minute chromosomes&#39; DNA content in a human high-grade astrocytoma cell line using comparative genomic hybridization and fluorescence in situ hybridization. Hum Genet. 1996;98:265-270.</li>
	<li>Stephens PJ, et al. Massive genomic rearrangement acquired in a single catastrophic event during cancer development. Cell. 2011;144:27-40.</li>
	<li>Zhang CZ, et al. Chromothripsis from DNA damage in micronuclei. Nature. 2015;522:179-184.</li>
	<li>Lange JT, et al. The evolutionary dynamics of extrachromosomal DNA in human cancers. Nat Genet. 2022;54:1527-1533.</li>
	<li>Turner KM, et al. Extrachromosomal oncogene amplification drives tumour evolution and genetic heterogeneity. Nature. 2017;543:122-125.</li>
	<li>Wu S, et al. Circular ecDNA promotes accessible chromatin and high oncogene expression. Nature. 2019;575:699-703.</li>
	<li>Deshpande V, et al. Exploring the landscape of focal amplifications in cancer using AmpliconArchitect. Nat Commun. 2019;10:392.</li>
	<li>Levan A, Levan G. Have double minutes functioning centromeres? Hereditas. 1978;88:81-92.</li>
	<li>St&#246;ber MC, et al. Intercellular extrachromosomal DNA copy-number heterogeneity drives neuroblastoma cell state diversity. Cell Rep. 2024;43:114711.</li>
	<li>Kaufman RJ, Brown PC, Schimke RT. Amplified dihydrofolate reductase genes in unstably methotrexate-resistant cells are associated with double minute chromosomes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979;76:5669-5673.</li>
	<li>Kim H, et al. Extrachromosomal DNA is associated with oncogene amplification and poor outcome across multiple cancers. Nat Genet. 2020;52:891-897.</li>
	<li>Schlesinger HR, et al. Establishment and characterization of human neuroblastoma cell lines. Cancer Res. 1976;36:3094-3100.</li>
	<li>Balaban-Malenbaum G, Gilbert F. Double minute chromosomes and the homogeneously staining regions in chromosomes of a human neuroblastoma cell line. Science. 1977;198:739-741.</li>
	<li>Gilbert F, et al. Homogeneously staining region in a retinoblastoma cell line: Relevance to tumor initiation and progression. J Natl Cancer Inst. 1981;67:301-306.</li>
	<li>Quinn LA, Moore GE, Morgan RT, Woods LK. Cell lines from human colon carcinoma with unusual cell products, double minutes, and homogeneously staining regions. Cancer Res. 1979;39:4914-4924.</li>
	<li>Montgomery KT, Biedler JL, Spengler BA, Melera PW. Specific DNA sequence amplification in human neuroblastoma cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 1983;80:5724-5728.</li>
	<li>Singer MJ, et al. Amplification of the human dihydrofolate reductase gene via double minutes is initiated by chromosome breaks. Proc Natl Acad Sci U S A. 2000;97:7921-7926.</li>
	<li>Shimizu N. Gene amplification and the extrachromosomal circular DNA. Genes (Basel). 2021;12:1533.</li>
	<li>Carroll SM, et al. Double minute chromosomes can be produced from precursors derived from a chromosomal deletion. Mol Cell Biol. 1988;8:1525-1533.</li>
	<li>Alitalo K, et al. Homogeneously staining chromosomal regions contain amplified copies of an abundantly expressed cellular oncogene (c-myc) in malignant neuroendocrine cells from a human colon carcinoma. Proc Natl Acad Sci U S A. 1983;80:1707-1711.</li>
	<li>George DL, Powers VE. Amplified DNA sequences in Y1 mouse adrenal tumor cells: Association with double minutes and localization to a homogeneously staining chromosomal region. Proc Natl Acad Sci U S A. 1982;79:1597-1601.</li>
	<li>Storlazzi CT, et al. Gene amplification as double minutes or homogeneously staining regions in solid tumors: Origin and structure. Genome Res. 2010;20:1198-1206.</li>
	<li>Biedler JL, Meyers MB, Spengler BA. Homogeneously staining regions and double minute chromosomes, prevalent cytogenetic abnormalities of human neuroblastoma cells. In: Fedoroff S, Hertz L, editors. Advances in Cellular Neurobiology. Academic Press; New York, NY; 1983. p. 267-307.</li>
	<li>Shoshani O, et al. Chromothripsis drives the evolution of gene amplification in cancer. Nature. 2021;591:137-141.</li>
	<li>Nathanson DA, et al. Targeted therapy resistance mediated by dynamic regulation of extrachromosomal mutant EGFR DNA. Science. 2014;343:72-76.</li>
	<li>Song K, et al. Plasticity of extrachromosomal and intrachromosomal BRAF amplifications in overcoming targeted therapy dosage challenges. Cancer Discov. 2022;12:1046-1069.</li>
	<li>Kang X, et al. Extrachromosomal DNA replication and maintenance couple with the DNA damage pathway in tumors. Cell. 2025;188:3405-3421.e27.</li>
	<li>Pommier Y, Nussenzweig A, Takeda S, Austin C. Human topoisomerases and their roles in genome stability and organization. Nat Rev Mol Cell Biol. 2022;23:407-427.</li>
	<li>Coquelle A, et al. Expression of fragile sites triggers intrachromosomal mammalian gene amplification and sets boundaries to early amplicons. Cell. 1997;89:215-225.</li>
	<li>Coquelle A, et al. A new role for hypoxia in tumor progression: Induction of fragile site triggering genomic rearrangements and formation of complex double minutes and homogeneously staining regions. Mol Cell. 1998;2:259-265.</li>
	<li>Mandahl N, Mertens F, Mitelman F. Gene amplification in neoplasia: A cytogenetic survey of 80,131 cases. Genes Chromosomes Cancer. 2024;63:e23214.</li>
	<li>Roepman P, et al. Clinical validation of whole genome sequencing for cancer diagnostics. J Mol Diagn. 2021;23:816-833.</li>
	<li>Ho SS, Urban AE, Mills RE. Structural variation in the sequencing era. Nat Rev Genet. 2020;21:171-189.</li>
	<li>Rajkumar U, et al. EcSeg: Semantic segmentation of metaphase images containing extrachromosomal DNA. iScience. 2019;21:428-435.</li>
	<li>Purshouse K, Pollard SM, Bickmore WA. Imaging extrachromosomal DNA (ecDNA) in cancer. Histochem Cell Biol. 2024;162:53-64.</li>
	<li>Shapiro DN, et al. Detection of N-myc gene amplification by fluorescence in situ hybridization: Diagnostic utility for neuroblastoma. Am J Pathol. 1993;142:1339-1346.</li>
	<li>Krupina K, et al. Chromothripsis and ecDNA initiated by N4BP2 nuclease fragmentation of cytoplasm-exposed chromosomes. Science. 2025;390:1156-1163.</li>
	<li>Trask BJ, Hamlin JL. Early dihydrofolate reductase gene amplification events in CHO cells usually occur on the same chromosome arm as the original locus. Genes Dev. 1989;3:1913-1925.</li>
	<li>Biedler JL, Spengler BA. A novel chromosome abnormality in human neuroblastoma and antifolate-resistant Chinese hamster cell lines in culture. J Natl Cancer Inst. 1976;57:683-695.</li>
	<li>Nunberg JH, Kaufman RJ, Schimke RT, Urlaub G. Amplified dihydrofolate reductase genes are localized to a homogeneously staining region of a single chromosome in a methotrexate-resistant Chinese hamster ovary cell line. Proc Natl Acad Sci U S A. 1978;75:5553-5556.</li>
	<li>Gapski GR, et al. Synthesis of a fluorescent derivative of amethopterin. J Med Chem. 1975;18:526-528.</li>
	<li>Verma RS, Babu A. Tissue culture techniques and chromosome preparation. In: Human Chromosomes: Manual of Basic Techniques. Pergamon Press; 1989. p. 4-45.</li>
	<li>Moorhead PS, et al. Chromosome preparations of leukocytes cultured from human peripheral blood. Exp Cell Res. 1960;20:613-616.</li>
	<li>Ohara H, Terasima T. Colcemid effects on mitotic synchrony and synchronized cells. Cell Struct Funct. 1976;1:187-195.</li>
	<li>Kaufman RJ, Brown PC, Schimke RT. Loss and stabilization of amplified dihydrofolate reductase genes in mouse sarcoma S-180 cell lines. Mol Cell Biol. 1981;1:1084-1093.</li>
	<li>Marsden CG, Dragon JA, Wallace SS, Sweasy JB. Base excision repair variants in cancer. Methods Enzymol. 2017;591:119-157.</li>
	<li>Nichols A, et al. Chromosomal tethering and mitotic transcription promote ecDNA nuclear inheritance. Mol Cell. 2025;85:2839-2853.e8.</li>
	<li>Henegariu O, et al. Improvements in cytogenetic slide preparation: Controlled chromosome spreading, chemical aging, and gradual denaturing. Cytometry. 2001;43:101-109.</li>
	<li>Lichter P, et al. Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization using recombinant DNA libraries. Hum Genet. 1988;80:224-234.</li>
	<li>Pinkel D, et al. Fluorescence in situ hybridization with human chromosome-specific libraries: Detection of trisomy 21 and translocations of chromosome 4. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85:9138-9142.</li>
	<li>Sumner AT, Evans HJ, Buckland RA. New technique for distinguishing between human chromosomes. Nature New Biol. 1971;232:31-32.</li>
	<li>Howe B, Umrigar A, Tsien F. Chromosome preparation from cultured cells. J Vis Exp. 2014;e50203.</li>
	<li>Cavalli G, Misteli T. Functional implications of genome topology. Nat Struct Mol Biol. 2013;20:290-299.</li>
	<li>Kosak ST, Groudine M. Form follows function: The genomic organization of cellular differentiation. Genes Dev. 2004;18:1371-1384.</li>
	<li>Sehgal P, Chaturvedi P. Chromatin and cancer: Implications of disrupted chromatin organization in tumorigenesis and its diversification. Cancers (Basel). 2023;15:466.</li>
	<li>Misteli T. Beyond the sequence: Cellular organization of genome function. Cell. 2007;128:787-800.</li>
	<li>Zhu Y, et al. Oncogenic extrachromosomal DNA functions as mobile enhancers to globally amplify chromosomal transcription. Cancer Cell. 2021;39:694-707.</li>
	<li>Hung KL, et al. ecDNA hubs drive cooperative intermolecular oncogene expression. Nature. 2021;600:731-736.</li>
	<li>Taghbalout A, et al. Extrachromosomal DNA associates with nuclear condensates and reorganizes chromatin structures to enhance oncogenic transcription. Cancer Cell. 2025;43:2191-2205.e6.</li>
	<li>Hsu TC, Pomerat CM. Mammalian chromosomes in vitro: II. A method for spreading the chromosomes of cells in tissue culture. J Hered. 1953;44:23-30.</li>
	<li>Erwin GS, Bhimsaria D, Eguchi A, Ansari AZ. Mapping polyamide-DNA interactions in human cells reveals a new design strategy for effective targeting of genomic sites. Angew Chem. 2014;126:10288-10292.</li>
	<li>Erwin GS, et al. Synthetic genome readers target clustered binding sites across diverse chromatin states. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016;113:E7418-7427.</li>
	<li>Erwin GS, et al. Synthetic transcription elongation factors license transcription across repressive chromatin. Science. 2017;358:1617-1622.</li>
	<li>Erwin GS, et al. Recurrent repeat expansions in human cancer genomes. Nature. 2023;613:96-102.</li>
	<li>Shimizu N, Kanda T, Wahl GM. Selective capture of acentric fragments by micronuclei provides a rapid method for purifying extrachromosomally amplified DNA. Nat Genet. 1996;12:65-71.</li>
	<li>Jaworski JJ, et al. ecDNA replication is disorganized and vulnerable to replication stress. Nucleic Acids Res. 2025;53:gkaf711.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>15-mL konik santrifüj</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Santrifüjleme.&nbsp;</td></tr><tr><td>15-mL konik tüpler</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Hücre toplanması.</td></tr><tr><td>200 proof etanol</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Yıkama adımları.&nbsp;</td></tr><tr><td>Asetik Asit, buzlu, %99,7</td><td>Millipore Sigma</td><td>695092</td><td>Carnoy'un fiksatif ve slayt yıkama adımları.</td></tr><tr><td>Antifade Montaj Ortamı</td><td>FisherScientific</td><td>NC9265087</td><td>Tamamlanmış slayt hazırlığı sonrası slayt montajı</td></tr><tr><td>Vakuum çıkışlı biyolojik güvenlik kabini</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Kimyasallar için depolama.</td></tr><tr><td>Colcemid (N-metil-N-deasetil-kolşisin)</td><td>Millipore Sigma</td><td>10295892001</td><td>Tübülin'e bağlanır, hücreleri metafazda durdurur.</td></tr><tr><td>Coplin kavanozları</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Yıkama adımları.&nbsp;</td></tr><tr><td>DAPI (4',6-diamidino-2-fenilindole)</td><td>Milipore Sigma</td><td>D8417-1MG</td><td>Floresan DNA boyası.</td></tr><tr><td>EGFR/CON7 FISH probu&nbsp;</td><td>Empire Genomics</td><td>EGFR-CHR07</td><td>Loka spesifik floresan&nbsp;prob.&nbsp;</td></tr><tr><td>Elmer's kauçuk tutkalı</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Gece boyunca prob hibridizasyonu sırasında kapak camının yerinde tutulması.</td></tr><tr><td>Etanole dayanıklı kalıcı kalem</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Slayt etiketleme.</td></tr><tr><td>Floresan mikroskop</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Slayt görüntüleme.&nbsp;</td></tr><tr><td>Cam Kapak Camı, 22 x 22mm</td><td>ThermoFisher</td><td>50-143-780</td><td>Slayt üzerinde prob hibridizasyonu.</td></tr><tr><td>Cam Slayt, ön temizlenmiş</td><td>VWR</td><td>48311-703</td><td>Metafaz yayılmalarını bırakmak ve DNA-FISH gerçekleştirmek için</td></tr><tr><td>Nemli CO2 İnkübatörü</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Canlı hücre inkübasyonu.</td></tr><tr><td>Hibridizasyon Tamponu</td><td>Empire Genomics</td><td>Hyb-Buffer</td><td>Prob ile kullanılan tampon.&nbsp;</td></tr><tr><td>Buz kovası</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Carnoy'un fiksatif'ini soğuk tutmak.&nbsp;</td></tr><tr><td>KCl (2M)</td><td>ThermoFisher</td><td>AM9640G</td><td>Fiksasyon öncesi hücreleri şişirmek.&nbsp;</td></tr><tr><td>Metanol, %99,9, HPLC sınıfı</td><td>Millipore Sigma</td><td>1060351000</td><td>Carnoy'un fiksatif'i için.&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Santrifüjleme.&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj tüpleri</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Fiksasyon sırasındaki hücreler ve prob hazırlama için.&nbsp;</td></tr><tr><td>MYC / SE 8 Prob</td><td>Leica</td><td>KI-10106</td><td>Loka spesifik floresan&nbsp;prob.&nbsp;</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010-023</td><td>Yıkama adımları.&nbsp;</td></tr><tr><td>Faz kontrast mikroskop</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Metafaz yayılmalarının düşürülmesinden hemen sonra görüntüleme</td></tr><tr><td>Pipet uçları</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Pipetleme.</td></tr><tr><td>Sodyum klorür</td><td>Millipore Sigma</td><td>S9888</td><td>SSC tamponu için.</td></tr><tr><td>Sodyum sitrat</td><td>Millipore Sigma</td><td>567446</td><td>SSC tamponu için.</td></tr><tr><td>Steril ultra saf su</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Yıkama adımları.&nbsp;</td></tr><tr><td>ThermoBrite programlanabilir slayt inkübatörü</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Slayt inkübasyonu.</td></tr><tr><td>Maşa</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>Slayt yıkama adımları için.&nbsp;</td></tr><tr><td>Su banyosu</td><td>herhangi bir kaynak</td><td>NA</td><td>KCl inkübasyonu için.&nbsp;</td></tr></tbody></table>

dna-fish metafazı, İnsan kanser hücre hatlarında homojen boyalı bölgelerden ekstrakromozomal dna'yı ayırt etmek İçin yayılır

DNA-FISH Metaphase Spreads to Distinguish Extrachromosomal DNA from Homogeneously Staining Regions in Human Cancer Cell Lines

DNA-FISH Metafazı, İnsan Kanser Hücre Hatlarında Homojen Boyalı Bölgelerden Ekstrakromozomal DNA'yı Ayırt Etmek İçin Yayılır

Whole-genome sequencing identifies focal DNA amplifications with base-pair resolution but cannot determine whether amplified sequences reside on ...

Araştırmamız, amplifiye olmuş onkogenlerin ekstrakromozomal DNA üzerinde mi yoksa belirgin, kromozomal olarak entegre homojen boyanan bölgeler içerisinde mi yer aldığını belirlemeye odaklanmaktadır. Sekanslama, ecDNA'yı HSR amplifikasyonundan ayırt edemez; bu nedenle protokolümüz bu durumu tek hücre çözünürlüğünde çözümlemektedir.Başlangıç olarak, Colcemid stok çözeltisini steril ultrapure su ile 1:1 oranında seyreltin. Metafaz durdurma işlemi için, logaritmik büyüme aşamasında ve %70 ila %90 konfluens düzeyinde 10 mililitre besiyerinde tutulan COLO320DM hücrelerine 100 mikrolitre seyreltilmiş Colcemid çözeltisi ekleyin ve hücreleri bir hücre kültürü inkübatöründe 45 dakika ile bir gece arasında bekletin. Metanol ve asetik asidi 3:1 oranında kullanarak taze bir Carnoy fiksatifi hazırlayın. Fiksasyon prosedürü boyunca Carnoy fiksatifini buz üzerinde tutun. Taze bir 0,075 molar potasyum klorür çözeltisi hazırlayın ve çözeltiyi 37 °C'lik bir su banyosunda ısıtın. Santrifüj ve hücre sayımından sonra hücreleri PBS ile yıkayın. Hücreleri 10 mililitre sıcak 0,075 molar potasyum klorür çözeltisi içinde nazikçe yeniden süspande edin ve süspansiyonu yavaşça tersyüz ederek karıştırın. Hücrele

dna-fish-metaphase-spreads-to-distinguish-extrachromosomal-dna-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu makale, tek hücreli FISH, blastomer çekirdeklerinin yayılmasını teknikleri, in situ hibridizasyon ve klinik bir ortamda pre-implantasyon genetik tanı (PGD) uygulanan sinyal puanlama için uygun probların seçim açıklamaktadır.

Pre-implantasyon Genetik Tanı için FISH

Chromosomics: Sayısal ve Yapısal Değişmeler Algılama Tüm 24 İnsan Kromozomlar Aynı zamanda Roman OctoChrome BALIK Test kullanma

Kanser hastalarının kanından dolaşımdaki tümör hücrelerinin (CTC) izolasyonu ve karakterizasyonu, invaziv olmayan bir sıvı biyopsi türüdür ve nüks ve hastalığın ilerlemesi ile ilişkilidir. Bu video, ilgilenilen belirli bir geni incelemek için tıbbi bir tel üzerinde yakalanan CTC'ler üzerinde DNA floresan yerinde hibridizasyon (DNA FISH) tekniğini açıklamaktadır.

3D DNA FISH: Bir Kromozom Üzerinde Belirli Bir Geni Bulmak İçin Bir Teknik

Burada 3D mikroskopi ve analizler (3D immuno-DNA FISH) izledi DNA FISH immünofloresan ve DNA dizileri tarafından histon modifikasyonları eşzamanlı tespiti için bir protokol açıklar.

3D Nükleer teşkilatında değişiklikler Eğitim için 3D-korunmuş Tane Çekirdekle ilgili Kombine İmmünofloresan ve DNA FISH

Biz doğrudan etiketli floresan problar kullanarak 3D DNA FISH ile nükleer mimarisi analiz için sağlam ve çok yönlü protokol açıklar.

Doğrudan Etiketli Problar kullanarak Sağlam 3D DNA BALIK

DNA onarım yolları genomik bütünlüğünü korumak ve mutasyon ve kanser önlenmesi için gereklidir. Bu protokolün amacı, metafaz telomerik DNA tekrarlar in situ hibridizasyon (FISH) floresan kullanılarak fare B hücreleri yayılır içinde kromozom anormallikleri doğrudan gözlem ile genomik istikrarsızlık ölçümüdür.

PNA-FISH ile Fare B Lenfositlerindeki kromozom anormallikleri hızlı Analizi

Tümör hücreleri ayırdetmek için yeni bir yaklaşım sunuyoruz. Biz DNA Floresan -in-situile ayirt kombine-functionalized tıbbi tel CTCs doğrudan hasta kandan zenginleştirici vivo içinde kabil tarafından yakalanan hücre değerlendirmek için hibridizasyon.

Tümör hücrelerinin tümör hücreleri dolaşan yakalamak için tıbbi bir tel kullanarak karakterizasyonu: 3D bir yaklaşım tabanlı ayirt ve DNA balık

Nükleer yüzey spreadleri, kekozis sırasında kromozom olaylarını incelemek için vazgeçilmez bir araçtır. Burada zebrabalığı spermatositlerinden profaz I sırasında meyotik kromozomları hazırlamak ve görselleştirmek için bir yöntem göstermek.

Zebrabalığı Spermatositlerinden Meiotik Kromozom Spreadlerinin Hazırlanması

3D çok renkli DNA FISH, 3B korunmuş çekirdekler içinde birden fazla genomik loci görselleştirmek için bir araç temsil eder, kesin olarak tek bir hücre düzeyinde nükleer alan içinde karşılıklı etkileşimleri ve lokalizasyon tanımlayan. Burada, adım protokol bir adım insan birincil hücrelerin geniş bir yelpazede için açıklanmıştır.

3D Çok Renkli DNA FISH Aracı İnsan Birincil Hücrelerde Nükleer Mimari Çalışma

DNA halo preparatlarının floresan in situ hibridizasyon ile birleştirilmesi, nükleoiskelet ile genomik etkileşimlerin yüksek çözünürlüklü analizini sağlar. Bağlı genom, artık ekstrakte edilen çekirdeklerin içinde bulunan hibridize floresan sinyallere yol açarken, bağlı olmayan genom, artık çekirdekleri çevreleyen DNA halesindedir.

Tüm Kromozomları, Telomerleri ve Gen Locilerini Ortaya Çıkarmak için DNA Halo Preparatlarında Floresan In Situ Hibridizasyon

Bu protokol, formalinle sabitlenmiş parafine gömülü (FFPE) doku örneklerinde gen amplifikasyonunu görselleştirmek için tekrarlanabilir bir yöntem sağlar.

Floresan In Situ Hibridizasyon ile Formalinle Sabitlenmiş Parafine Gömülü Numunelerde Gen Amplifikasyonunun Sağlam Tespiti

Öğrenin, DNA-FISH metafaz yayma yöntemiyle insan kanser hücre hatlarında ekstrakromozomal DNA ve homojen boyalı bölgeleri tek hücre çözünürlüğünde ayırt edin. Bu protokol onkogen amplifikasyon yapısını güvenilir şekilde görselleştirir.

DNA-FISH Metafazı, İnsan Kanser Hücre Hatlarında Homojen Boyalı Bölgelerden Ekstrakromozomal DNA'yı Ayırt Etmek İçin Yayılır

Daha fazla video keşfet