Name: Proteinlerin Elektrogöçer Ayırma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-12T13:29:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Öğrenin, poliakrilamid jel elektroforezi (PAGE) kullanarak proteinleri elektroforetik olarak ayırma yöntemini. Bu teknik, karmaşık karışımlardan proteinleri yük ve boyutlarına göre ayırarak biyokimya ve proteomik araştırmalarında temel bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu deneysel bir yaklaşım için tam metin protokolü mevcuttur <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471142720/cp/cpmb/article/mb1002a/current/abstract" target="_blank">Moleküler Biyoloji Mevcut Protokoller</a> .

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

proteinlerin elektrogöçer ayırma

Electrophoretic Separation of Proteins

Elektroforez, proteinlerin (örneğin, hücre, hücre içi kesirler, sütun kesirler, veya immunoprecipitates) kompleks karışımlar ayrı altbirim kompozisyonları araştırmak için, protein örneklerinin homojenliği ve doğrulamak için kullanılır. Ayrıca başka uygulamalar için protein arındırmak için hizmet edebilir. Poliakrilamid jel elektroforezi, proteinler poliakrilamid jel matris gözenekler yoluyla bir elektrik alanı yanıt göç; gözenek büyüklüğü artan akrilamid konsantrasyonu azalır. Gözenek boyutu ve protein yükü, boyut ve şekil kombinasyonu protein göç oranı belirler. Bu ünitede, standart Laemmli yöntemi, sodyum dodesil sülfat (SDS) varlığı, denatüre edici koşullar altında yani süreksiz jel elektroforezi için açıklanmıştır.

Bu video, poli-acrylimide jel elektroforezi (PAGE) kullanarak proteinlerin elektroforetik ayrımı için bir yöntem ortaya koymaktadır.

Proteinlerin Elektrogöçer Ayırma

Elektroforez; proteinlerin karmaşık karışımlarını (örneğin hücrelerden, hücre altı fraksiyonlardan, kolon fraksiyonlarından veya immünopresipitatlardan elde edilen) ayırmak için, ...

Bireysel proteinlerin karmaşık protein karışımlarından ayrılması, poliakrilamid jel elektroforezi veya yaygın adıyla PAGE olarak bilinen jel elektroforezi ile gerçekleştirilebilir; proteinler, elektrik alanının etkisiyle jel matrisindeki gözenekler aracılığıyla hareket ederler. Jel gözenek boyutu ile proteinin yükü, boyutu ve şeklinin kombinasyonu, proteinin göç hızını belirler. Bu videoda, proteinlerin elektroforetik ayrımı için bir yöntemi göstereceğiz.Merhaba, ben Keck Graduate Institute of Applied Life Sciences Proteomik Merkezi'nden Dr. Bobul Chakravarti. Bugün sizlere 1D jel elektroforez uygulaması için bir prosedür göstereceğim. Haydi başlayalım.Başlamak için, iki temiz cam plaka ve iki 1,5 millimeter ara parça kullanarak elektroforez cihazının cam plaka sandviçini üretici talimatlarına göre birleştirin. Ardından, cam plaka sandviçini döküm standına sabitleyin. Son olarak, güncel protokollerde açıklanan ayırıcı jel çözeltisini hazırlayın.Belirtilen miktarda %10 amonyum persülfat ve TEMED'i çözeltiye ekleyin ve karıştırmak için nazikçe çalkalayın. Akrilamid konsantrasyonunun yüksek olması nedeniyle gaz giderme işlemine gerek yoktur. 10 mililitrelik tek kullanımlık plastik bir

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video, proteinler için denatüre edici bir poliakrilamid bazlı ayırma tekniğini göstermektedir. Bu teknik, proteinlerin moleküler ağırlıklarına göre ön tanımlanmasına yardımcı olur.

Protein Analizi için Sodyum Dodesil Sülfat Poliakrilamid Jel Elektroforezi: Moleküler Ağırlığa Göre Proteinleri Ayırmak ve Görselleştirmek İçin Bir Teknik

Bu videoda, doğal protein komplekslerini doku homojenatlarından ayırmak için multimerik PAGE açıklanmaktadır. Teknik, mavi yerel PAGE ve SDS-PAGE tekniklerinin bir karışımıdır. Ayrılan kompleksler, hücre işleyişindeki rolleri için karakterize edilebilir ve incelenebilir.

Doğal protein komplekslerini ayırmak için Multimer-PAGE: bozulmamış multimerik proteinleri doku lizatından ayırmak için Blue Native-PAGE ve SDS-PAGE'den oluşan hibrit bir ayırma tekniği

Bu videoda, insan fonksiyonel olmayan hipofiz adenomunun (NFPA) tümör dokularından elde edilen karmaşık bir protein karışımından tek tek proteinleri ayıran iki boyutlu bir jel elektroforezi yöntemi gösteriyoruz. Proteinler, birinci boyutta elektrik yüklerine göre ayrılır ve ikinci boyutta moleküler ağırlıklara göre daha da ayrılır.

İki Boyutlu Poliakrilamid Jel Elektroforezi: Yük ve Moleküler Ağırlığa Dayalı Kompleks Protein Karışımındaki Proteinlerin Analizi İçin Bir Ayırma Tekniği

Bu protokol, çeşitli alt akış protein analiz teknikleriyle uyumlu, heterojen numunelerden kovalent olmayan biyomoleküler düzenekler ve proteinler için doğal bir ayırma tekniği olan berrak doğal jel salınımlı sıvı fraksiyon tuzak elektroforezinin (CN-GELFrEE) nasıl hazırlanacağını ve gerçekleştirileceğini açıklar.

CN-GELFrEE - net yerli jel-elüt sıvı kısmı Tuzak Elektroforez

, Jel proteinlerin elektroforetik yöntemlerle ayrılması ardından çeşitli boyama yöntemleri ile tespit edilebilir. Coomassie Mavi, Gümüş Boyama, SYPRO Turuncu, SYPRO Ruby ile proteinlerin Boyama Bu video gösterilmektedir.

Jeller içinde Proteinler Boyama

Microcontact baskı malzemesi yüzeylerde desen proteinleri ve diğer molekülleri yaygın bir biçimde kullanılmaktadır. Biz fibronektin cam üzerine desen damgalama, bu sürecin temel adımları göstermektedir.

Proteinlerin Hücre Biyolojisi Microcontact Baskı

Çiftleşme ve tetrad ayrılması genetik analiz için gerekli...

Çiftleşme ve tetrad Ayırma Chlamydomonas reinhardtii Genetik Analiz

Rat MKH, femur ve tibiaları izole edilmiş ve daha sonra manyetik hücre sıralama ile zenginleştirilmiş. Sıralama hücreler flow sitometri ile yüzey belirteçlerinin ifade teyit edildi. Bu hücreler de klonal yoğunluğu tek koloniler oluşturmak için kültüre edildi ve daha sonra bu kolonilerin klonlama silindir ile ayrıldı.

İzolasyon ve Rat Mezenkimal Kök Hücreler zenginleştirilmesi (MKH) ve MKH Türetilmiş Tek koloni Ayırma

Protokolleri LCP kristalizasyon denemeler ve hasat kristalleri kurma, LCP-sıkı bağlamak kristalleşme öncesi testlerin başlangıç ​​koşulları bulma lipidik kübik bir fazlı (LCP) protein, sulandırıldıktan itibaren bir membran proteini kırınım kaliteli kristaller elde etmek için gerekli adımları açıklar .

Lipidik Mesophases Membran Proteinleri Kristallendirilmesi

Kalmodulin (CAM) açılan test CaM çeşitli proteinler ile etkileşimi araştırmak için etkili bir yoldur. Bu yöntem, etkili ve spesifik CaM-bağlayıcı proteinlerin analizi için CaM-sepharose boncuk kullanır. Bu hücresel fonksiyonları CaM sinyal keşfetmek için önemli bir araç sağlar.

Kalmodulin bağlayıcı Proteinler, Pull-down

Öğrenin, poliakrilamid jel elektroforezi (PAGE) kullanarak proteinleri elektroforetik olarak ayırma yöntemini. Bu teknik, karmaşık karışımlardan proteinleri yük ve boyutlarına göre ayırarak biyokimya ve proteomik araştırmalarında temel bir araçtır.

Proteinlerin Elektrogöçer Ayırma

Daha fazla video keşfet