Name: In Vitro İzole Nöronlar kurgulama için Lazer Cımbız (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-09-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: Öğrenin, lazer cımbızlar kullanarak in vitro kültürlenmiş nöronları yakalama ve hareket ettirme yöntemini. Bu teknik, sinirbilim araştırmalarında hücre davranışlarını anlamak için güçlü bir araç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Araştırma NIH Grants EY012031 ve EY0182175 ve FM Kirby Vakfı tarafından desteklenmiştir.

Izole kültür hücreleri işlemek için Optik cımbız Optik cımbız Yakalama güçleri ışık ivme (Ashkin ve ark, 1986 Ashkin, 1991) oluşturulur. Bu güçlerin kolayca süspansiyon hücreleri tuzak olsa da, onlar bir yüzeye bağlı hücreleri hareket etmek mümkün değildir. Bu nedenle, hücrelerin tuzağa noktada kültür çanak yapışma azaltmak için, lamel itici hücre ile poli-2-hydroxyethylmethacrylate (poli-HEMA) (Sigma Chemical Co, St Louis, MO), toksik olmayan bileşik kaplı özellikleri daha önce endotel hücreleri (Folkman ve Moscona, 1978) yapışma çalışmaları için çalışmaktadır. Poli-HEMA bir kültür yemeğin yarısını kapsar, diğer yarısı hücre büyümesini destekleyen bir substrat ile kaplanmıştır. Laboratuvarımızda, Sal-1, kültür semender retina hücreleri için substrat olarak kullanılır . Sal-1 imalatı ve poli-HEMA kaplı yemekleri aşağıda açıklanan prosedürü: Kültür yemekleri imalatı <ol><li> Temizlik coverglasses asit (# 1 VWR Bilimsel A.Ş., Medya, PA). Bu coverglass lazer odaklanma için gerekli yüksek sayısal açıklık hedefleri için gerekli olan sadece 0.1mm kalınlığı için seçildi. </li><li> Bir hücre itici alanı oluşturmak için, oda sıcaklığında bir gecede% 95 etanol 1 ml 20 mg poli-HEMA (Sigma Chemical Co, St Louis, MO) çözülür. Tercihen, bu çözüm hazırlık 1 ay içinde kullanılması gerekir. </li><li> Yakın dikey konumda bir başlık gibi tozsuz bir ortamda coverglasses Prop. </li><li> 200μl mikropipet plastik ucundan coverglass en yakın poli-HEMA çözümün bir veya iki damla yerleştirin. Damla (her 50-100μl hakkında) coverglass bir yarısında sınırlı olmalıdır. Eğimli sıvı ince bir poli-HEMA bile kaplama, alt coverglass yüzeyi aşağı akar sağlar. Poli-HEMA kaplı coverglasses kaput oda sıcaklığında 30-60 dakika kurumasını bekleyin. </li><li> Coverglass poli-HEMA yan kenarına yakın bir ince uçlu kalem ile işaretleyin. </li><li> 35 mm kültür çanak alt kısmında 1 cm delik. </li><li> Tutkal, poli-HEMA kaplı yan yemeğin içine dönüktür Sylgard 184 (Dow Corning Co, Midland) ile kültür çanak alt poli-HEMA kaplı coverglass. Poli-HEMA kaplama kenar olun deliğin merkezi çalışır. Yemekleri, tozsuz bir ortamda oda sıcaklığında 1-3 gün boyunca kurumasını bekleyin. </li><li> Poli-HEMA kaplama kenarında bir elmas uçlu kalem ile coverglass dışında bir çizgi kazıyıp. Ardından dışında yaklaşık 2mm dik açıda iki geçiş çizgileri çizebilir. Iki kesişme noktası, referans mikroskop sahnede kültür çanağı aynı yönde yeniden kullanılmak üzere fiducial noktaları olarak hizmet vermektedir. </li><li> Bulaşıkları gecede ultraviyole ışık altında sterilize edin. </li><li> , Retinal hücre zarlarının (cömertçe Dr. Peter MacLeish Morehouse School of Medicine tarafından sağlanan karşı yükseltilmiş bir fare anti-semender antikor içeren bir hücre kültürü çanak-yapışık yarısı olmayan Sal-1 ile poli-HEMA yarım kat, oluşturmak için Atlanta, GA. MacLeish ve ark (1983) bakınız). İlk olarak, ceket, yaklaşık 100μl 0.1 mg / ml steril keçi anti-fare IgG (Corporation&#39;ın Boehringer Mannheim, Indianapolis IN) Sal-1 tarafı, poli-HEMA yüzüne üzerine sıvı dökmemeye özen. Üç saat bekletin, sonra çıkarın. Bir veya iki kez, daha sonra çanağı poli-HEMA yan içine sıvı dökmemeye özen 100μl Sal-1 süpernatant yerde aynı alanda steril Ringer solüsyonu ile yıkayınız. Sal-1, bilinen bir konsantrasyonda kaplı ilk antikor sağlar. </li><li> Sal-1 gecede yemekler inkübe edin. </li><li> Sal-1 antikoru çözüm çıkarın ve steril Ringer solüsyonu ile bölgeyi durulayınız. Hücre kaplama hemen önce yemek için 2 ml orta tanıtın. </li></ol> Amfibi Ringer solüsyonu, serum serbest amfibi, orta ve enzim sindirim için Ringer solüsyonu kompozisyon MacLeish ve Townes-Anderson (1988) ve Mandell ve ark. (1993). Hücre kültürlerinin hazırlanması Bu video kullanılan hücreler elde edilmiştir ışık adapte, yetişkin, su fazlı kaplan semenderlerin (Ambystoma tigrinum), uzunluğu 17-22 cm (Charles Sullivan Inc, Nashville, TN), 5 muhafaza ° C 12 saat: 12 saat ışık-karanlık döngüsü. Protokolleri Kurumsal Hayvan Bakım tarafından onaylanan ve Ulusal Sağlık Enstitüsü&#39;nün kurallarına sıkı sıkıya bağlı bir New Jersey Tıp ve Diş Hekimliği Üniversitesi Komitesi (IACUC) kullanın. Retinal hücre kültürlerinin hazırlanması için prosedürler Nachman-Clewner ve Townes-Anderson (1996) tarafından açıklanan ve aşağıdaki gibidir: <ol><li> Hayvanların başını kesmek ve ilik. Gözlerinizi çıkarın ve kornealar ve iris teşrih. Retina Göz yuvası içinde biraz ayırmak gerekir. Kavisli bir forseps retina altına yerleştirerek, retina kepçe. Lens bu aşamada retina bağlıysa önemli değildir. </li><li> 40 dakika için 14 U / ml semender Ringer solüsyonu papain (Worthington, Freehold, NJ) retina Digest. </li><li> Kullanmadan önce, papain Ringer solüsyonu 30 dakika boyunca% 95 O 2 /% 5 CO 2 gaz ile kabarmış olmalı, daha sonra 0.22 mikron filtre (Millipore, Carrigtwohill, İrlanda) geçişi ile sterilize . </li><li> Steril semender Ringer solüsyonu üç kez retina durulayın. </li><li> Ringer çözüm lensleri çıkarın, sonra yavaşça bir hücre süspansiyonu verim pipet delik 3 mm ile retina dokusunun çiğnemek. </li></ol> Lazer cımbız manipülasyon izole nöronların <ol><li> , Tabak sahnede bir referans noktası ile bir işareti hizalayarak çanak yönlendirilmesi, mikroskop sahnede kültür tabağına yerleştirin. Koordinatları bilgisayara fiducial puan kaydedin. </li><li> Plaka Sal-1 hem de üzerine hücreleri ve çanak poli-HEMA yarısı. </li><li> Hücrelerin antikor substrat eklemek için çanak yapışık tarafta hücreler için yeterince uzun olan, yaklaşık 20 dakika boyunca yerleşmek için izin verin. </li><li> Sal-1 yapışık yemeğin tarafında bir hücre seçin. X ve y aşamada hücre yakın bir konumda koordinatları işaretleyin. Bizim durumumuzda, nokta seçili hücre birincil dendrit yaklaşık 10μm. Koordinatları bilgisayara kaydedin. </li><li> Yemeğin poli-HEMA tarafında bizim durumumuzda bir fotoreseptör ikinci bir nöron, seçin ve onu yakalamak için lazer cımbız aracını kullanın. Yakalama, geniş bir aralıkta güç seviyeleri elde edilebilir. Ancak, biz% 10 hücre ile birlikte yakalama enkaz önlemek için yeterince düşük -20%, lazer güç, ancak orta yoluyla hücre taşınması için yeterli. </li><li> Tuzak hücre tutarken, böylece hücre kültür çanak yüzeyinden ve herhangi bir bağlı nöronlar üzerinde evresini. Sal-1 tarafında önceden kaydedilmiş x ve y koordinatları hücre getirmek için bilgisayar kontrolü altında sahne taşıyın. Sahne hareketi 8-20μm / s olarak belirlendi, ancak maksimum hız ampirik olarak tespit edilmelidir. Sal-1 tarafındaki varış noktasına vardıklarında, çanak yüzeyinde sıkışıp hücre getirmek için sahne yükseltmek. Hücre yerleştirme birkaç mikron hassasiyetle yapılabilir. Sal-1 substrat hücre uymak için izin ver. </li><li> Çifti oluşumu öncesi ve sonrasında çiftin iki hücrelerinin sayısallaştırılmış görüntü elde edilmesi yararlı bir kayıt sağlar. </li><li> Bir kuluçka hücre çiftleri koruyun. Semender hücreleri için, 10 nemlendirilmiş bir odasında yemekleri ° C Hücreler video zaman atlamalı tarafından izlenmekte ve gerekli her türlü hücre biyolojik tekniği ile kullanılabilir. </li></ol>

<ol><li>Ashkin, A., Dziedzic, J. M., Bjorkholm, J. E., Chu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+of+a+Single-Beam+Gradient+Force+Optical+Trap+for+Dielectric+Particles%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Observation of a Single-Beam Gradient Force Optical Trap for Dielectric Particles.</a> Opt. Lett. 11, 288-290 (1986).</li>
<li>Clarke, R. J., Hoegnason, K., Brimacombe, M., Townes-Anderson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cone+and+rod+cells+have+different+target+preferences+in+vitro+as+revealed+by+optical+tweezers%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Vision%22%5BJournal%5D)">Cone and rod cells have different target preferences in vitro as revealed by optical tweezers.</a> Mol. Vision. 14, 706-720 (2008).</li>
<li>Folkman, J., Moscona, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+cell+shape+in+growth+control%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Role of cell shape in growth control.</a> Nature. 273, 345-349 (1978).</li>
<li>Liu, Y., Cheng, D. K., Soneck, G. J., Berns, M. W., Chapman, C. F., Tromberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+localized+cell+heating+induced+by+infrared+optical+tweezers%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Evidence of localized cell heating induced by infrared optical tweezers.</a> Biophysical Journal. 68, 2137-2144 (1995).</li>
<li>MacLeish, P. R., Barnstable, C. J., Townes-Anderson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+monoclonal+antibody+as+a+substrate+for+mature+neurons+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Use of a monoclonal antibody as a substrate for mature neurons in vitro.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80, 7014-7018 (1983).</li>
<li>MacLeish, P. R., Townes-Anderson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+synapse+formation+among+major+classes+of+adult+salamander+retinal+neurons+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Growth and synapse formation among major classes of adult salamander retinal neurons in vitro.</a> Neuron. 1, 751-760 (1988).</li>
<li>Mandell, J. W., MacLeish, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Townes-Anderson+E.+Process+outgrowth+and+synaptic+varicosity+formation+by+adult+photoreceptors+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Townes-Anderson E. Process outgrowth and synaptic varicosity formation by adult photoreceptors in vitro.</a> J. Neurosci. 13, 3533-3548 (1993).</li>
<li>Nachman-Clewner, M., Townes-Anderson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injury-induced+remodelling+and+regeneration+of+the+ribbon+presynaptic+terminal+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurocytol%22%5BJournal%5D)">Injury-induced remodelling and regeneration of the ribbon presynaptic terminal in vitro.</a> J. Neurocytol. 25, 597-613 (1996).</li>
<li>Townes-Anderson, E., St Jules, R. S., Sherry, D. M., Lichtenberger, J., Hassanain, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micromanipulation+of+retinal+neurons+by+optical+tweezers%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Vis.%22%5BJournal%5D)">Micromanipulation of retinal neurons by optical tweezers.</a> Mol. Vis.. 4, (1998).</li>
</ol>

Işık momentumu vardır ve bir hücre geçerken kırılan bir ışık ışını zaman, bir kuvvet momentum yönünü değiştirmek için gerekli. Çünkü momentumun korunumu yasası, ters yönde bir kuvvet, sırayla, bir hücre tepki vermelidir. Ashkin (1991) mikroskop objektif lens ile odaklanmış bir lazer ışını tarafından üretilen kuvvet, bir hücre odak merkezine doğru hareket edeceğini gösterdi. Bir lazer ışını sadece birkaç piconewtons güç üretir rağmen, bu gücün, orta aracılığıyla bir hücre çekmek için yeterli. Kötü su tarafından emilir yakın kızılötesi dalga ...

<table><tbody><tr><td>25mm daire No.1 lamel</td><td>VWR international</td><td>48380 080</td><td></td></tr><tr><td>poly-2-hidroksietilmetakrilat (poly-HEMA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-3932</td><td>%95 etanol içinde çözün</td></tr><tr><td>Keçi anti-fare IgG antikoru</td><td>Chemicon International</td><td>AP181</td><td>1ml'de 1mg, kullanım için 10 kat seyreltin</td></tr><tr><td>Fare anti-semender antikoru içeren Sal-1 süpernatantı</td><td>Dr. Peter MacLeish tarafından cömertçe sağlanmıştır</td><td></td><td>Dr. Peter MacLeish, Morehouse School of Medicine, Atlanta, GA</td></tr><tr><td>3 mm ağız çaplı 5ml pyrex tek kullanımlık pipetler</td><td>Corning</td><td>7078A-5</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü kapları 35mm x 10mm</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 184 silikon elastomer kiti</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Optik cımbız-mikro alet veya lazer cımbız</td><td>Cell Robotics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>980nm dalga boyuna sahip 1 W sürekli dalga diyot lazer</td><td>Cell Robotics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Axiovert 100 ters ışık mikroskobu</td><td>Carl Zeiss, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>40x yağ daldırma plan neofluor objektif lensi</td><td>Carl Zeiss, Inc.</td><td></td><td>Sayısal açıklık (N.A. 1.3)</td></tr><tr><td>Siyah beyaz CCD kamera</td><td>Sony Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yazılımlı bilgisayar ve joystick</td><td>Cell Robotics Inc.</td><td></td><td>motorize bir sahneyi kontrol etmek için</td></tr></tbody></table>

in vitro İzole nöronlar kurgulama için lazer cımbız

Using Laser Tweezers For Manipulating Isolated Neurons In Vitro

Bu kağıt ve video, hedefleme tercihleri, in vitro yetişkin retinal nöronların yenileyici hücre süreçlerini incelemek için laboratuarda kullanılan protokoller açıklanmaktadır. Kaplama ile izole retina hücrelerinin özellikle lazer cımbız ile kullanımı için yapılan yemekler diseksiyonu, sindirim ve retina, öğütme ve bitiş retinal hücre kültürlerinin hazırlanması için prosedürler ile başlar. Bu yemekleri bir hücre yapışkan yarım ve bir hücre itici yarısı ayrılır. Hücre yapıştırıcı yan hücrelerin büyümesine üzerine bir substrat sağlarlar Sal-1 antikorları, bir tabaka ile kaplanmıştır. Diğer yapışkan substratlar diğer hücre türleri için kullanılabilir. Hücre itici tarafı poli-HEMA ince bir tabaka ile kaplıdır. Yemeğin poli-HEMA tarafında kaplama hücreleri, lazer cımbız ile tuzağa taşınan ve ardından bir çift oluşturmak için bir hücre Sal-1 tarafta komşu olarak yerleştirilmelidir. Bu teknik ile herhangi bir boyut hücre gruplarının oluşumu mümkün olmalıdır. &quot;Lazer cımbız kontrollü mikromanipülasyon&quot; araştırmacı hücreleri taşımak için hangi seçim anlamına gelir, ve hücreler arasındaki istenen mesafe standart olabilir. Çünkü lazer ışını kültür çanağı şeffaf yüzeylerden geçer, hücre seçme ve yerleştirme, kapalı, steril bir ortamda yapılır. Hücreler video time-lapse tarafından izlenmekte ve gerekli her türlü hücre biyolojik tekniği ile kullanılabilir. Bu teknik, hücre-hücre etkileşimleri soruşturma yardımcı olabilir.

Bu video in vitro lazer cımbız kullanarak manipülasyon kültürlü nöronların açıklamaktadır.

In Vitro İzole Nöronlar kurgulama için Lazer Cımbız

Bu makalede ve videoda, yetişkin ...'nin rejenerasyon geçiren hücre uzantılarının hedefleme tercihlerini incelemek için laboratuvarımızda kullandığımız protokolleri tanımlıyoruz.

Ashkin, lazer cımbızlarının veya optik tuzakların mikroskobik boyutlardaki canlı nesneleri manipüle etmek için güçlü bir araç olduğunu gösteren ilk kişidir. Bu videoda, nöronları yakalamak ve hareket ettirmek için bu teknolojiyi nasıl uyguladığımızı göstereceğiz. Bu, optik cımbız iş istasyonudur.Yeşil oklar, lazer ışınının mikroskop optikleri boyunca izlediği yolu göstermektedir. Mikroskop objektif lensi tarafından odaklanan bir lazer ışını bir hücre tarafından kırıldığında, ışık ışınının yönünü değiştiren kuvvet hücreye etki ederek hücreyi odak merkezine doğru hareket ettirir.Bu, bir hücreyi ortam boyunca çekmek için yeterli olan Piko Newton düzeyinde kuvvet üretir. Bu videoda kapların hazırlanması, retinal hücrelerin hazırlanması, hücrelerin kültür kaplarına ekilmesi, lazer cımbız manipülasyonu ve hücre büyümesinin gözlemlenmesi hakkında konuşacağız. Hücreler cama yapıştığı için, hücrelerin cımbızla kolayca yakalanabileceği hücre itici bir alan oluşturmamız gerekti.Kabın yarısı, hücre itici bir polimer olan poly hema ile kaplanmıştır. Diğer yarısı ise hücrelerimizin büyümesini destekleyen bir substrat olan cell one ile kaplanmıştır. İlk olarak, kabın hücre yapışkan tarafında bir

using-laser-tweezers-for-manipulating-isolated-neurons-in-vitro

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video makalede izole etmek için bir yöntem mevcut tek veya birden...

Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon Drosophila Periferik Nöronlar

C in vivo Lazer Axotomy elegans

Bu videoda, floresan olarak işaretlenmiş nöronları bir fare beyninden izole etmek için bir yöntem gösterilmektedir.

Murin Beyninden Floresan Etiketli Nöronların İzole Edilmesi

Source: Morsch, M.,  vd. al., Konvansiyonel UV Lazer Konfokal Mikroskopi Kullanarak Hücre Stresini ve Ölümünü Tetikleme. J. Vis. Exp. (2017) Bu videoda, transgenik zebra balıklarında tek tek nöronları hassas bir şekilde hedeflemek ve incelemek için yüksek yoğunluklu UV lazer ablasyon tekniğini keşfediyoruz. Yaralanma ve iyileşmenin hücresel dinamiklerini vurgulayarak nöronal tepkilerin nasıl hazırlanacağını, hareketsiz hale getirileceğini ve görselleştirileceğini gösteriyoruz.

Konfokal Mikroskop Kullanılarak Zebra Balığı Larvasında Seçici Tek Nöron Lazer Ablasyonu

Genetik ve optik birleştirmek nörobilim araçlarının son gelişmeler, mekansal ve zamansal çözünürlük görülmemiş bir düzeye ile nöral devre faaliyet üzerinde kontrol sağlayan, "optogenetics" olarak adlandırılır. Burada prefrontal korteks ve subicular piramidal nöronların genetik tanımlanmış alt kümelerinin optogenetic manipülasyon ile vivo kayıtta entegre etmek için bir protokol sağlar.

Bireysel piramidal nöronlar High Fidelity optogenetic Kontrolü için Bir Yöntem<em&gt; In vivo</em

Biz kısmen akson zarı yapışık bir optik-tuzak prob yapılan eş zamanlı kuvvet spektroskopisi ölçümü ile bir lazer disektör ile lezyonlanmıştır olan bir akson gerginlik serbest ölçtük. Geliştirilen Deneysel protokol, kültür alt tabakaya yapışma akson değerlendirir.

Lazer Bağlı Akson Lezyon sırasında Gerilim Film ölçümü Piconewton ve Milisaniye Çözünürlük de Yüzey için aksonal yapışma değerlendir

İnsan neuroprogenitor hücreleri (NPC) çoğalan koşullar altında genişletilmiştir. NPC nörotrofinlerin bir kombinasyonunun mevcudiyetinde nöron zengin kültürler içine ayırt edildi. Nöronal belirteçler immunofloresan boyama ile tespit edilmiştir. Nöron saf bir popülasyonu izole etmek için, NPC PEN membran slaytlar üzerinde farklılaştırılmış ve lazer yakalama mikrodiseksiyon uygulandı.

Kültür farklılaştırılmış insan Neuroprogenitor Hücreler Nöronlar Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon

Nöronal popülasyonları in vitro olarak fotostimül etmek için optogenetik bir yaklaşım kullanarak ön beyin devrelerinin fonksiyonel topografyasını ve sinaptik özelliklerini karakterize etmek için bir yöntem açıklıyoruz.

Optogenetically Hedeflenen Önbeyin Devreler Lazer tarama photostimulation

Lazer nanodissection bağlanmış iki foton görüntüleme, hücre içi çözünürlük ile merkezi sinir sisteminin dejeneratif ve rejeneratif işlemlerini incelemek için yararlı araçlardır. Bu protokol, etiket görüntü ve in vivo serebellar korteks bir tırmanma lifleri incelemek için gösterilmiştir.

Serebellar Aksonlar Lazer Nanosurgery<em&gt; In Vivo</em

Bireysel dopamin nöronlarının izolasyon ya da doğrudan veya dolaylı olarak immunohistokimyasal ile ventral tegmental alan lazer yakalama mikrodiseksiyon kullanılarak gösterilmiştir. Kızılötesi lazer kullanarak cam slayt doku izolasyonu ve bir kızılötesi ve morötesi lazer kombinasyonu kullanılarak membran slaytlar arasındaki parametreler tartışılmıştır.

Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon - Bireysel Dopamin Nöronlar İzolasyonu ve Tüm ventral tegmental Area bir Gösteri

Biz bir in vitro hazırlık kullanarak beyin çekirdekleri içine anterograd veya retrograd tracer enjeksiyonları yoluyla nöronlar ve süreçlerini etiketlemek için bir teknik açıklar. Biz i n markalama doğruluğunu artırmak amacıyla bir avantaj floresan işaretli fare mutantları ve temel optik donanım alarak izleyici elektroporasyon vitro varolan yöntemi değiştirilebilir.

Lazer güdümlü Nöronal İzleme Beyin Eksplantlarındaki

Öğrenin, lazer cımbızlar kullanarak in vitro kültürlenmiş nöronları yakalama ve hareket ettirme yöntemini. Bu teknik, sinirbilim araştırmalarında hücre davranışlarını anlamak için güçlü bir araç sunar.

In Vitro İzole Nöronlar kurgulama için Lazer Cımbız

Daha fazla video keşfet