Name: Determinazione calore e soglia del dolore meccanico in pelle infiammata dei soggetti umani (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-01-14T00:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 21 s
Description: Scopri i protocolli per valutare le soglie del dolore termico e meccanico nella pelle umana infiammata. Questi metodi analizzano la nocicezione attraverso le fibre nervose periferiche C e A-delta.

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Test di calore dolore utilizzando il Thermostimulator TSA II 1. Introduzione <ol><li> Questa procedura utilizza il TSA II, disponibile in commercio termo-analizzatore sensoriale che offre stimoli di calore alla pelle con un thermode (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Un&#39;unità centrale genera e trasmette il segnale al thermode. Questo segnale è controllato dal software proprietario in genere archiviati su un computer portatile collegato all&#39;unità centrale. Anche associate alle unità centrale è un portatile di controllo che permette ad un oggetto di studio per fermare il riscaldamento del thermode. </li><li> Sette gli stimoli di calore sequenziale e identici sono consegnati, con inter-stimolo intervalli di 30 anni. La temperatura basale thermode è fissato ad un comodo 35 ° C. La velocità con cui il thermode riscalda è fissata al 1 º C / s, mentre il tasso a cui si raffredda è fissato a 10 º C / s. La temperatura massima thermode è impostato a 52 ° C. </li></ol> 2. Preparazione e formazione i soggetti <ol><li> Per preparare i soggetti per la sede di prova di calore dolore li comodamente su una sedia reclinabile che fornisce il supporto adeguato per la testa, braccia e gambe. La sedia dovrebbe inoltre consentire un facile accesso ai siti del corpo esaminato. </li><li> L&#39;impianto di prova deve essere a temperatura ambiente confortevole, e fornire un ambiente tranquillo e neutro, senza distrazioni. </li><li> Prima di iniziare l&#39;esperimento, tutti i partecipanti devono essere ben preparati in tutti gli aspetti del dolore test di calore. La formazione può avvenire in qualsiasi momento prima dell&#39;esperimento. </li><li> Le interazioni tra soggetti dello studio e gli investigatori dovrebbero essere limitate a quelle necessarie per la raccolta dei dati. Scherzi e chiacchiere sono scoraggiati perché possono compromettere la coerenza dei dati. Soggetti in studio sono informati che le interazioni intenzionalmente essere un po &#39;monotona e neutrale durante gli esperimenti. </li><li> Conservare le istruzioni chiare, semplici e coerenti. Sottolineare che il dolore è soggettivo, e non ci sono risposte giuste o sbagliate. E &#39;più importante essere coerenti. Definire la soglia del dolore di calore come il punto tra l&#39;essere &quot;in procinto di essere doloroso&quot; e &quot;appena diventato doloroso.&quot; </li><li> È fondamentale che un soggetto sa esattamente cosa aspettarsi nel corso di una sessione di test. Qualsiasi &quot;sorprese&quot; potrebbero risultare in meno di dati coerenti, in quanto fattori di confondimento come l&#39;ansia può essere generato. Per esempio, se sette stimoli dolorosi di calore sono utilizzati per determinare la soglia del dolore di calore, il soggetto deve sapere questo. </li><li> In qualsiasi momento, il soggetto può fermare il thermode da ottenere alcun caldo premendo il pulsante di un portatile di controllo. Avere il controllo sarà ridurre l&#39;ansia del soggetto e rendere i dati più affidabili. </li><li> La sessione di formazione offre l&#39;opportunità di valutare le prestazioni di un soggetto di studio. Può essere meglio di formare soggetti in 2-4 cicli di prova così la loro soglia del dolore individuale variano da un massimo di 0,8 ° C, e, idealmente, da non più di 0,6 ° C tra le ultime due cicli di prova. I soggetti che non riescono a svolgere sempre sono in genere esclusi dallo studio. </li></ol> 3. Determinazione della soglia del dolore <ol><li> Per iniziare i cicli di test di soglia del dolore segnare la posizione del thermode sulla pelle del soggetto. In questo esperimento la lesione stessa pelle infiammata utilizzato per microdialisi saranno testati per il dolore di conoscere biochimiche rilasciato in risposta al test dolore. </li><li> Poi, iniziare ciascun ciclo ponendo il thermode sulla zona della pelle segnata. Corrispondere alla posizione del thermode con le marcature il più fedelmente possibile. Lasciare che la temperatura tra la pelle e il thermode per equilibrare a 35 ° C - una temperatura che in modo sicuro causerà alcun dolore. Questo richiederà circa 5 secondi e sarà indicato da una lettura di 35 ° C sullo schermo del computer. </li><li> Prima di iniziare, dare la mano il controllo al soggetto. </li><li> Utilizzare una pressione costante e delicata per mantenere l&#39;intera superficie del thermode in pieno contatto con la pelle del soggetto durante i test. </li><li> Ora inizia la pre-programmati algoritmo di prova. Il thermode inizierà riscaldamento fino a 1 ° C / s. Non appena il dolore soggetto esperienze, faranno premere il dispositivo portatile. </li><li> Dopo la pressione del pulsante sul dispositivo portatile, il dolore temperatura thermode causando verrà registrato automaticamente e inizierà a diminuire a un ritmo di 10 ° C / s fino alla sua temperatura basale di 35 ° C. </li><li> La sonda di temperatura viene automaticamente mantenuto a 35 ° C per 30 s prima che inizia a salire di nuovo a 1 ° C / s, fino a quando un soggetto spinge di nuovo il tasto del dispositivo portatile. Appena prima che la temperatura thermode è in procinto di aumentare ancora una volta, ricordare al soggetto che sta per accadere. Ciò manterrà il soggetto a fuoco. </li><li> Questa sequenza viene ripetuta fino a sette registrazioni di temperatura sono stati registrati. Calcolare la media di questi temletture ratura, questa è la soglia del dolore di calore. </li></ol> Dolore prove meccaniche con sonde di pressione punteggiati 1. Introduzione <ol><li> Noi usiamo le sonde calibrate su misura pressione punteggiato, perché forniscono risultati più coerenti rispetto alle tradizionalmente utilizzate e disponibili in commercio peli von Frey. Le sonde sono fatti di fili identici cilindrico in acciaio inox (240 micron di diametro), montato su barre di rame di vario peso (1, 2, 4, 8, 16, 32, 49, 64, e 81 grammi) che si muovono liberamente all&#39;interno di un più ampio a mano tenuto tubo di alluminio. </li><li> Le stesse condizioni generali sperimentali descritte per il test di calore dolore si applicano ai test dolore meccanico. I soggetti devono essere ben preparati e formati. E &#39;particolarmente importante per rassicurare i soggetti che le sonde sono smussati e non forare la pelle. Questo aiuterà i soggetti di rilassarsi e di fornire dati coerenti. </li></ol> 2. Determinazione della soglia del dolore meccanico <ol><li> Per determinare la soglia del dolore meccanico, applicare prima la punta del filo di acciaio più leggeri sonda perpendicolarmente alla pelle, al centro della lesione sperimentalmente infiammata. </li><li> Il portatile tubo di alluminio viene poi abbassata verso la pelle senza toccarlo. In questo modo, l&#39;intero peso del rame all&#39;interno del tubo di alluminio poggia sulla punta filo d&#39;acciaio. </li><li> Il soggetto studio indica poi se la sonda provoca dolore dicendo &quot;sì&quot; o &quot;no&quot;. </li><li> Se il soggetto risponde &quot;no&quot;, allora o la sonda stesso o quello successivo sonda più pesanti saranno utilizzati prossimo. Questo algoritmo si chiama una sequenza di stimolazione ascendente. Casualmente determinare se la sonda successivo è più pesante o dello stesso peso. Ciò manterrà un soggetto cieco per l&#39;algoritmo. </li><li> Applicare le sonde in ordine crescente fino a quando un soggetto risponde &quot;sì&quot;. Il peso medio degli ultimi due sonde di questa serie viene registrato come il punto di deflessione per primo. </li><li> Dopo che il soggetto risponde &quot;sì&quot;, iniziare ad usare una sequenza di stimolazione discendente, e utilizzare una sonda più chiara o la sonda stessa di prima. Casualmente determinare se la sonda successivo è più leggero o dello stesso peso. Ciò manterrà un soggetto cieco per l&#39;algoritmo. </li><li> Applicare le sonde in una sequenza discendente fino alla risposta del soggetto &quot;no&quot;. Il peso medio degli ultimi due sonde in questa sequenza costituiscono il secondo punto di deflessione. </li><li> Quando il soggetto risponde &quot;no&quot;, tornare a una sequenza di stimolazione ascendente. Si alternano tra ascesa e discesa sequenze fino a sette punti di rinvio sono registrati. La media di questi sette punti è la soglia del dolore meccanico. </li></ol>

<ol><li>Angst, M. S., Clark, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comment+on+Koltzenburg+et+al.%3A+Differential+sensitivity+of+three+experimental+pain+models+in+detecting+the+analgesic+effects+of+transdermal+fentanyl+and+buprenorphine%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Comment on Koltzenburg et al.: Differential sensitivity of three experimental pain models in detecting the analgesic effects of transdermal fentanyl and buprenorphine.</a> Pain. 126, 165-174 (2006).</li>
<li>Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+profile+in+human+skin+in+response+to+experimental+inflammation%2C+noxious+stimulation%2C+and+administration+of+a+COX-inhibitor%3A+A+microdialysis+study%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation, and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study.</a> Pain. , (2008).</li>
<li>Angst, M. S., Koppert, W., Pahl, I., Clark, J. D., Schmelz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+infusion+of+the+mu-opioid+agonist+remifentanil+in+humans+causes+hyperalgesia+during+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Short-term infusion of the mu-opioid agonist remifentanil in humans causes hyperalgesia during withdrawal.</a> Pain. 106, 49-57 (2003).</li>
<li>Lotsch, J., Angst, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mu-opioid+agonist+remifentanil+attenuates+hyperalgesia+evoked+by+blunt+and+punctuated+stimuli+with+different+potency%3A+a+pharmacological+evaluation+of+the+freeze+lesion+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">The mu-opioid agonist remifentanil attenuates hyperalgesia evoked by blunt and punctuated stimuli with different potency: a pharmacological evaluation of the freeze lesion in humans.</a> Pain. 102, 151-161 (2003).</li>
</ol>

Questo video dimostra algoritmi per la valutazione della soglia del dolore termico e meccanico in pelle infiammata di volontari umani. La percezione del dolore è soggettiva. Raccolta dei dati di dolore adeguata richiede un apposito centro di test (ad esempio tranquillo e confortante), la formazione completa dei partecipanti allo studio con incorporato misure di qualità dei dati di controllo (test-retest), il rispetto rigoroso di un protocollo di studio standardizzato, e di evitare fattori di confondimento (ad esempio lo stress, ansia). Dati affidabili soggettiva sensibilità al dolore, in coppia con interventi come la somministrazione di un farmaco analgesico e la raccolta di dati meccanicistici come il rilascio locale di mediatori nocicettivo fornire informazioni preziose sui meccanismi del dolore, e dei mezzi per prevenire o attenuare esso.

<table><tbody><tr><td>Analizzatore Neurosensoriale TSA-II</td><td>Strumento</td><td>Medoc Advanced Medical Systems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Probette per pressione puntuale</td><td>Strumento</td><td>Fatte su misura</td><td></td><td>In alternativa, si possono utilizzare set di filamenti di von Frey disponibili in commercio.</td></tr></tbody></table>

determinazione calore e soglia del dolore meccanico in pelle infiammata dei soggetti umani

Determining heat and mechanical pain threshold in inflamed skin of human subjects

In un precedente articolo sul Journal of Experiments Visualizzato abbiamo dimostrato tecniche di microdialisi pelle per la raccolta di sostanze biochimiche infiammatorie nocicettivo e tessuto-specifica negli esseri umani. In questo articolo mostreremo dolore test paradigmi che vengono spesso utilizzati in tandem con le procedure di microdialisi. La combinazione di test di dolore con microdialisi fornisce il collegamento fondamentale tra i dati comportamentali e biochimici che permette di identificare sostanze biochimiche chiave responsabile della generazione e propagazione del dolore. Due modelli di dolore che evoca in pelle infiammata dei partecipanti allo studio umano sono mostrati. Il primo modello evoca il dolore con l&#39;aiuto di stimoli di calore. Il dolore di calore evocato come descritto qui è mediato principalmente da piccole fibre periferiche non mieliniche nervose nocicettive (fibre-C). Il secondo modello evoca il dolore attraverso gli stimoli della pressione punteggiato. Dolore pressione punteggiato evocata è mediato principalmente da piccole fibre mieliniche dei nervi periferici nocicettive (fibre A-delta). I due modelli sono meccanicamente distinte e indipendenti esaminare l&#39;elaborazione nocicettivo dalle due popolazioni di fibre del nervo periferico principali coinvolti nella segnalazione dolore. Il calore è il dolore evocato con l&#39;aiuto del TSA II, disponibile in commercio termo-analizzatore sensoriale (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Configurazione dello stimolo e la consegna è gestita con l&#39;aiuto di software specifici. Thermodes variano in dimensioni e forma, ma in linea di principio costituiti da una piastra metallica che può essere riscaldata o raffreddata a tassi diversi e per periodi di tempo diversi. Algoritmi di valutazione calore evocato il dolore sono molteplici. Negli esperimenti qui, partecipanti allo studio sono pregati di indicare a che punto iniziano a sperimentare il dolore, mentre il thermode in contatto con la pelle viene riscaldata ad un tasso prestabilito a partire da una temperatura che non evoca il dolore. Thermode la temperatura alla quale un soggetto inizia a sperimentare il dolore costituisce la soglia del dolore di calore. Dolore meccanico è evocata con sonde punteggiato. Queste sonde sono disponibili in commercio da diversi produttori (peli von Frey). Tuttavia, l&#39;accuratezza di von Frey capelli è stato criticato e molti ricercatori utilizzano sonde di misura della pressione punteggiato. Negli esperimenti qui otto sonde punteggiato misura di peso diverso vengono applicate in ordine consecutivo, una procedura chiamata up-down algoritmo, per identificare i punti di rinvio percettive, cioè un cambiamento da non sentire dolore per provare dolore o viceversa. Il peso medio causando una flessione percettive costituisce la soglia del dolore meccanico.

Algoritmi di valutare la soglia del dolore termico e meccanico in pelle sperimentalmente infiammata di soggetti umani studio sono mostrati. I due paradigmi di prova dolore nocicettivo indipendentemente esaminare l&#39;elaborazione da parte dei due principali popolazioni nervo periferico in fibra di trasmissione del dolore, cioè, non mieliniche delle fibre C e piccole mieliniche A-delta fibre.

Determinazione calore e soglia del dolore meccanico in pelle infiammata dei soggetti umani

In un precedente articolo del Journal of Visualized Experiments abbiamo dimostrato le tecniche di microdialisi cutanea per la raccolta di specifici componenti tissutali...

Questo video illustra due protocolli per il test del dolore. Il primo modello prevede l'applicazione di calore sulla pelle per indurre dolore. In questo test, i soggetti sono esposti a temperature progressivamente crescenti mediante un termode e viene loro chiesto a quale punto percepiscono il dolore.La temperatura del termode, nel momento in cui diventa dolorosa, corrisponde alla soglia del dolore termico. Il secondo modello induce dolore mediante pressione meccanica. In questo caso, sonde di peso diverso vengono applicate al soggetto, che indica quando il peso della sonda diventa sufficiente a provocare dolore.Questi due paradigmi di test del dolore possono esaminare indipendentemente l'elaborazione del nocicettivo da parte delle due principali popolazioni di fibre nervose periferiche che trasmettono il dolore. Le fibre C non mielinizzate, che rilevano il dolore da bruciore termico, e le fibre mielinizzate delta A, che rilevano il dolore meccanico acuto. Ciao, sono Martin Angst del Dipartimento di Anestesiologia dell'Università di Stanford.In un articolo precedente pubblicato sul Journal of Visualized Experiments, abbiamo documentato l'uso di tecniche di microdialisi per il prelievo specifico di sostanze chimiche nocicettive e infiammatorie in tessuti di volontari umani. Oggi vi mostreremo paradigmi di test del dolore che utilizziamo spesso in combinazione con le tecniche di microdialisi. L'uso congiunto di paradigmi di test del dolore e di tecniche di microanalisi fornisce il collegamento essenziale tra dati comportamentali e dati biochimici, permettendoci di identificare le sostanze chimiche responsabili della generazione e della propagazione dei segnali del dolore.Iniziamo. Questa procedura utilizza il TSA due, un analizzatore termosensoriale disponibile in commercio che eroga stimoli termici alla cute. Con un termo, un'unità centrale genera e trasmette il segnale al termo.Questo segnale è controllato da un software proprietario, solitamente memorizzato su un laptop collegato all'unità centrale. All'unità centrale è inoltre collegato un dispositivo di controllo portatile che consente al soggetto dello studio di interrompere il riscaldamento del termo. Vengono somministrati sette stimoli termici sequenziali con intervalli inter-stimolo di 30 secondi.La temperatura termica di base è impostata a un confortevole valore di 35 gradi Celsius. La velocità con cui il termo si riscalda è impostata a un grado Celsius al secondo. Mentre la velocità con cui si raffredda è impostata a 10 gradi Celsius al secondo, la temperatura termica massima è impostata a 52 gradi.Per preparare i soggetti al test del dolore termico, farli sedere comodamente su una poltrona reclinabile che offra un adeguato supporto per testa, braccia e gambe. Si sente a suo agio? Vorrebbe una coperta? Certo, grazie. Coperta. Va bene. La poltrona deve inoltre consentire un facile accesso alle sedi corporee da esaminare.La struttura per i test deve essere impostata a una temperatura ambiente confortevole e deve fornire un ambiente tranquillo e neutro, senza distrazioni, prima di iniziare l'esperimento. Tutti i partecipanti devono essere adeguatamente addestrati in tutti gli aspetti relativi al calore. L'addestramento ai test del dolore può svolgersi in qualunque momento prima dell'esperimento.Le interazioni tra i soggetti dello studio e i ricercatori devono essere limitate a quelle necessarie per la raccolta dei dati. Scherzare e fare conversazioni informali è sconsigliato perché potrebbe compromettere la coerenza dei dati. Ai soggetti dello studio viene comunicato che le interazioni saranno intenzionalmente, in una certa misura, monotone e neutrali.Durante gli esperimenti, mantenere le istruzioni chiare, semplici e coerenti. Sottolineare che il dolore è soggettivo e che non esistono risposte giuste o sbagliate.È fondamentale essere costanti. Oggi eseguiremo il test del dolore termico e, tra le cose che desideriamo, c'è ottenere risultati molto costanti da parte sua. Vogliamo che sia in grado di identificare chiaramente la soglia, il punto in cui avverte dolore per la prima volta, al fine di garantire una reale costanza.È importante che manteniamo l'ambiente molto calmo, tranquillo e privo di stimoli. Va bene? Quindi durante tutta la procedura, tu e io non parleremo. Non potremo scherzare, né parlare della politica del momento. Va bene.Cammineremo solo a piedi, concentrandoci interamente sul test del dolore stesso. Va bene? Va bene. E ancora una volta, è molto importante per noi ottenere risultati costanti. L'unico modo in cui potete fornirci risultati costanti è mantenendo l'ambiente molto, molto calmo, molto poco stimolante e decisamente noioso. Va bene?È fondamentale che un soggetto sappia esattamente cosa aspettarsi durante una sessione di test. Eventuali sorprese potrebbero produrre dati meno coerenti, poiché potrebbero insorgere fattori di confondimento, come l'ansia, che influenzano la definizione della soglia del dolore termico come il punto intermedio tra "quasi doloroso" e "appena divenuto doloroso". Ad esempio, se vengono utilizzati sette stimoli termici dolorosi per determinare la soglia del dolore termico, il soggetto dovrebbe esserne a conoscenza.Allora, come funziona il test? Misureremo la soglia del dolore termico. Va bene. E questo è il punto in cui provi dolore per la prima volta. D'accordo.Sarà effettuato un ciclo di sette esposizioni. Va bene. Tra ciascuna delle esposizioni sarà prevista una pausa di 32 secondi. Va bene. La sonda verrà posizionata sulla gamba.Partirà da una temperatura confortevole che aumenterà gradualmente fino a raggiungere valori che percepirete come caldo, molto caldo, caldissimo, bollente, estremamente bollente. Va bene? E ad un certo punto passerà da estremamente bollente a un dolore bruciante. Non appena provate questo dolore bruciante, premete un pulsante e la temperatura scenderà immediatamente al livello normale. Va bene?Sarà una pausa di 32° e si ripeterà. Va bene? Va bene. Ed è importante che tu sappia anche che la macchina è impostata in modo da non raggiungere una temperatura così elevata da danneggiare effettivamente la tua pelle. Quindi, anche se potresti avvertire un dolore bruciante e sembrerà che la pelle stia bruciando, in realtà non danneggerà il tessuto.Quindi non c'è bisogno di esitare. Non c'è bisogno di preoccuparsi di premere il pulsante un po' troppo presto, un po' prima di provare effettivamente la prima sensazione di dolore, perché non subirete alcun danno. Oh, va bene. Va bene.È utile saperlo. In qualsiasi momento, il soggetto può impedire al termo di aumentare ulteriormente la temperatura premendo il pulsante del controllo portatile. Avere il controllo ridurrà l'ansia del soggetto e renderà i dati più affidabili.E se ho domande riguardo al test stesso, dovremmo parlarne ora o devo chiudere e rimandare a dopo? Durante l'addestramento, puoi porre domande tra uno stimolo e l'altro. Va bene. Quando condurremo effettivamente lo studio, tu e io non potremo avere alcuna conversazione. Va bene.Quindi è importante che la formazione venga eseguita correttamente e che tu acquisisca dimestichezza con le tue mansioni. Va bene. E poi durante la fase di raccolta dati dello studio, tu e io non avremo assolutamente alcuna conversazione. Va bene? Va bene. Credo di poterlo fare.Bene, ottimo. Esercitiamoci comunque. Esercitiamoci. La sessione di allenamento offre l'opportunità di valutare le prestazioni di un soggetto dello studio.Potrebbe essere preferibile addestrare i soggetti durante due a quattro cicli di prova, in modo che le loro soglie individuali del dolore non variino di più di 0,8 gradi Celsius, e idealmente di non più di 0,6 gradi Celsius tra gli ultimi due cicli di prova. I soggetti che non riescono a mantenere prestazioni costanti vengono in genere esclusi dallo studio.Grazie mille per essere venuto oggi. Temo che non sarà possibile per lei partecipare. È difficile essere coerenti nel modo in cui si valuta il dolore, e alcune persone riescono a farlo mentre, per qualche motivo, altre hanno davvero molta difficoltà. Va bene.E non eravamo semplicemente abbastanza costanti da essere un candidato appropriato per lo studio. Va bene, grazie. Per iniziare i cicli di test della soglia del dolore, segnare la posizione del termo sulla pelle del soggetto.In questo esperimento, la stessa lesione cutanea infiammata utilizzata per la microdialisi verrà testata per il dolore. Per conoscere i biochimici rilasciati in risposta al test del dolore prima di iniziare, consegnare al soggetto il controllo manuale. Avviare ogni ciclo posizionando il termo sull'area cutanea precedentemente segnata, cercando di far coincidere il più possibile la posizione del termo con i segni di riferimento.Applicare una pressione costante e delicata per mantenere l'intera superficie del termo a contatto completo con la pelle del soggetto. Durante il test, attendere che la temperatura tra la pelle e il termo si equilibri a 35 gradi Celsius, una temperatura che non provocherà dolore. Questo richiederà circa cinque secondi e sarà indicato da una lettura di 35 gradi Celsius sullo schermo del computer.Ora avviare l'algoritmo di test pre-programmato. Dopo 30 secondi, il termociclare inizierà a riscaldarsi di un grado Celsius al secondo. Non appena il soggetto proverà dolore, premerà il dispositivo portatile.Dopo la pressione del pulsante, la temperatura del termo verrà acquisita automaticamente e inizierà a diminuire a un ritmo di 10 gradi Celsius al secondo fino a raggiungere la temperatura di base di 35 gradi Celsius. La sonda della temperatura verrà mantenuta automaticamente a 35 gradi Celsius per 30 secondi. Successivamente, inizierà nuovamente a salire di un grado Celsius al secondo finché il soggetto non premerà di nuovo il pulsante del dispositivo portatile.Ricordare al soggetto che la temperatura del termo stimolatore sta per aumentare. Ancora una volta, questo manterrà il soggetto concentrato. Ripetere la sequenza fino a quando non sono stati registrati sette rilevamenti di temperatura.Calcolare la media di queste letture di temperatura. Questo valore rappresenta la soglia del dolore termico per indurre il dolore meccanico. I sensori di pressione puntuale, comunemente chiamati peli von Frey, vengono generalmente utilizzati.Vengono applicati sulla pelle fino a quando la sonda si flette. Sebbene i peli di Von Frey siano disponibili in commercio, si raccomandano sonde personalizzate e calibrate per la pressione puntuale, poiché forniscono risultati più costanti. Queste sonde sono costituite da fili cilindrici identici in acciaio inossidabile di 240 micrometri di diametro.Questi sono montati su aste di rame di diversi pesi che si muovono liberamente all'interno di un tubo di alluminio più ampio tenuto in mano. Le stesse condizioni sperimentali generali utilizzate per il test del dolore termico saranno impiegate per il test del dolore meccanico. Analogamente, i soggetti devono essere preparati e addestrati nello stesso modo.È particolarmente importante rassicurare i soggetti sul fatto che le sonde sono arrotondate e non perforeranno la pelle. Questo aiuterà i soggetti a rilassarsi e a fornire dati costanti. Per determinare la soglia del dolore meccanico.Applicare innanzitutto la punta in filo d'acciaio della sonda più leggera perpendicolarmente alla pelle, al centro della lesione infiammata in modo sperimentale. Successivamente, abbassare il tubo in alluminio manuale verso la pelle senza toccarla.In questo modo, l'intero peso della bacchetta di rame all'interno poggia sulla punta del filo d'acciaio. Il soggetto in esame indica quindi se la sonda provoca dolore rispondendo sì o no. Se il soggetto risponde di no, verrà utilizzata la sonda successiva, più pesante.Questo algoritmo è chiamato sequenza di stimolazione ascendente. Applicare i filamenti in ordine crescente finché il soggetto non risponde affermativamente. Il peso medio degli ultimi due filamenti utilizzati in questa serie viene registrato come primo punto di deflessione dopo la risposta positiva del soggetto.Iniziare utilizzando una sequenza di stimolazione discendente e usare la sonda successiva più leggera. Applicare le sonde in sequenza discendente finché il soggetto non risponde di no. Il peso medio delle ultime due sonde in questa sequenza rappresenta il secondo punto di deviazione; quando il soggetto risponde di no, passare nuovamente a una sequenza di stimolazione ascendente. Alternare tra sequenze ascendenti e discendenti fino a quando non vengono registrati sette punti di deviazione.La media di questi sette punti corrisponde alla soglia del dolore meccanico. Questo algoritmo può essere reso più complesso ripetendo in modo casuale qualsiasi sonda appena utilizzata nelle sequenze ascendenti o discendenti. Ciò può aiutare a mantenere il soggetto cieco rispetto alla scelta della prossima sonda.Vi abbiamo appena mostrato due paradigmi di test con la pittura, uno che utilizza il calore e uno che utilizza una forza meccanica. Quando si eseguono queste procedure, è importante che i soggetti sappiano di avere sempre il controllo sulla quantità di dolore inflitta e che spetta realmente a loro decidere cosa è doloroso e cosa non lo è. Questo è tutto.Grazie per aver guardato e buona fortuna con i vostri esperimenti.

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Qui, presentiamo un modello di dolore infiammatorio modificato con l'iniezione di carragenina su entrambe le zampe posteriori per valutare l'effetto analgesico.

Un modello modificato di dolore infiammatorio per studiare l'effetto analgesico nei topi

Scopri i protocolli per valutare le soglie del dolore termico e meccanico nella pelle umana infiammata. Questi metodi analizzano la nocicezione attraverso le fibre nervose periferiche C e A-delta.

Determinazione calore e soglia del dolore meccanico in pelle infiammata dei soggetti umani

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