곤충 번데기 제거: 번데기 조사 방법

-발달 중인 번데기에 접근하려면 번데기 상피가 표피에서 분리된 후 또는 번데기 P5 단계 후에 번데기를 제거하십시오. 시작하려면 온전한 번데기를 복부 쪽이 당신을 향하도록 놓습니다. 집게를 사용하여 케이스의 앞쪽 끝과 번데기의 머리 사이의 빈 공간에 번데기를 잡습니다. 그런 다음 번데기의 앞쪽 부분을 부드럽게 부수고 제거하여 머리를 노출시킵니다.

복부 방향을 유지하면서 집게를 사용하여 번데기의 전후 축을 따라 작은 틈을 만들고 그 과정에서 연속적인 간격이 형성되도록 합니다. 바로 아래에 있는 번데기 조직이 손상되지 않도록 주의하십시오. 그런 다음 틈새에서 번데기를 한 번에 한 부분씩 바깥쪽으로 계속 부수고 그 과정에서 찢어진 케이스를 펼칩니다. 미세한 젖은 붓을 사용하여 추가 조사를 위해 노출된 번데기를 집어 올립니다. 예제 프로토콜에서는 Drosophila guttifera의 번데기를 제거하고 이미징을 위해 번데기를 준비하는 방법을 볼 것입니다.

-번데기 제거를 시작하려면 종이 타월 조각에 양면 테이프 조각을 부착하십시오. 번데기를 양면 테이프 위에 놓고 복부 쪽이 위로 향하게 합니다. 번데기의 앞쪽과 내부 번데기 사이의 공간을 찾습니다. 이 틈 주위의 번데기를 겸자로 잡고 제거하고 번데기 머리의 앞쪽을 노출시킵니다.

집게의 끝을 전후 축과 평행하게 움직여 삽입합니다. 집게 끝을 들어 올려 번데기를 국부적으로 부수십시오. 파손이 번데기의 뒤쪽 부분에 도달 할 때까지이 작업을 반복하십시오. 번데기와 번데기 다리 사이에 틈이 생기는지 확인하고 번데기의 복부 쪽을 부러뜨리면서 내부 번데기의 손상을 최소화합니다. 번데기를 최대한 부순 후 고운 붓을 사용하여 번데기를 꺼냅니다. ddH2O를 적신 티슈 조각에 번데기를 놓고 플라스틱 페트리 접시에 담습니다. 노출된 번데기는 취약하고 쉽게 건조되므로 즉시 사진을 찍습니다.