Drosophila Courtship Conditioning: En metode til at teste læring og hukommelse i fluer

-Først isolere enkelt naiv, eller umættet, Drosophila melanogastor hanner. Derefter, at betingelsen hannerne, tilføje en kvinde, der allerede har parret, og er derfor ikke-modtagelige for frieri. Den mandlige viser typiske frieri adfærd såsom orientere sig mod hende, efter hende rundt, trykke hende med en forben, og udvide og vibrere sin fløj til at producere frieri sang. Han kan også forsøge at slikke og parring.

For at teste hanens hukommelse, lad ham hvile og derefter udsætte ham for en anden parret kvinde. Den uddannede mand vil ikke forsøge at bejle til denne flue, fordi han bevarer mindet om tidligere afvisning. I eksempelprotokollen vil vi se, hvordan fluer håndteres under trænings- og testfaserne i en domstolskonditioneringsanalyse til kort- og langtidshukommelsesvurdering.

- Begynd med at bedøve alle de voksne fra de fire dage gamle parringsfiler. Adskil kønnene, og overfør enkelte premated hunner i hver af de 12 brønde i en række af en boligblok. Derefter ved hjælp af en aspirator og ingen anæstesi, fjern de naive mænd fra deres hjembrønde og overfør dem til brøndene, der indeholder de forarbejdede kvinder. Gentag denne proces i anden række for at oprette 12 flere par.

For at teste læring eller korttidshukommelse skal du udføre dette setup ved daggry og lade træningsperioden gå i en time. For at teste langtidshukommelsen skal du oprette par fire timer før subjektiv daggry og lade træningen fortsætte i otte timer.

- For at læring og hukommelse kan etableres, er det vigtigt, at mændene undlader at kopulere, så kontroller regelmæssigt parrene i træningsperioden for at sikre, at mændene afvises.

Når træningsperioden er forbi, skal du forsigtigt fjerne hannerne fra brøndene ved hjælp af en aspirator, ikke kuldioxidbedøvelse.

For at forberede testfasen af eksperimentet skal du bedøve premated hunner og overføre dem til en ny normal mad modbydelig. Tillad mindst en time for fluerne at komme sig efter anæstesi. Næste, forbered testopsætningen. Sørg for at have videooptagerne klar til at optage aktivitet i frieriarerne.

For at starte testen skal du bruge blid aspiration til at overføre en testhan fra boligblokken til frieriarenaen med skillevæggene lukket. Derefter skal du ved hjælp af den samme teknik overføre individuelle premated kvinder til hver af de 18 arenaer, men til den modsatte side af skillevæggene. Nu skal du forsigtigt vende frieriarenaen og placere den under videokameraet med brøndåbningerne ned mod den hvide bænkoverflade. Derefter skal du fjerne skillevæggene og starte videooptagelsen. Når eksperimentet er overstået, skal du fjerne fluerne fra arenaerne ved hjælp af et vakuum og ventilere frierikamrene i mindst 10 minutter, før de genbruges.