फ्लाई क्लाइम्बिंग परख: ड्रोसोफिला मेलनोगेस्टर में जनरल लोकोमोशन का परीक्षण करने के लिए एक विधि

- सबसे पहले एडल्ट ड्रोसोफिला का एक सेट नंबर प्राप्त करें। चढ़ाई परख के लिए टेस्टिंग चैंबर एक साथ टेप की गई दो शीशियों से बना होता है। इनमें से एक शीशी को एक लाइन से चिह्नित किया जाना चाहिए।

कार्बन डाइऑक्साइड संज्ञाहरण के बिना, जो चढ़ाई के व्यवहार को ख़राब कर सकता है, मक्खियों की एक निर्धारित संख्या को परीक्षण कक्ष में स्थानांतरित कर सकता है। मक्खियों को पूर्व निर्धारित समय के लिए ठीक होने दें। कक्ष के चिह्नित पक्ष के साथ, एक ठोस सतह पर रखे माउस पैड पर कक्ष को दृढ़ता से टैप करें। यह मक्खियों को कक्ष के नीचे तक मजबूर करेगा। चढ़ाई परख ड्रोसोफिला की प्राकृतिक प्रवृत्ति का लाभ लेता है गुरुत्वाकर्षण के खिलाफ ऊपर की ओर चढ़ते हैं, एक व्यवहार जिसे नकारात्मक भूकर कहा जाता है।

परीक्षण के दौरान, मक्खियों को सीधे सूरज की रोशनी के संपर्क में नहीं आना चाहिए क्योंकि मक्खियां प्रकाश उत्तेजना के जवाब में फोटोटैक्सिस व्यवहार या आंदोलन प्रदर्शित कर सकती हैं। लाइन तक पहुंचने या पास करने वाली मक्खियों की संख्या रिकॉर्ड करें। फिर परीक्षण की गई मक्खियों की कुल संख्या से इस संख्या को विभाजित करके प्रतिशत पास दर प्राप्त करें। उदाहरण में, हम रासायनिक म्यूटसिस के बाद Drosophila मोटर फ़ंक्शन का आकलन करने के लिए उपयोग की जा रही फ्लाई क्लाइम्बिंग का अवलोकन करेंगे।

-शुरू करने के लिए, दूसरे गुणसूत्र के लिए मैप ड्रोसोफिला म्यूटेंट के ENU म्यूटेग्नाइज्ड संग्रह से संबंधित लाइनों से होमोज़िगस मक्खियों को इकट्ठा करें। 10 से 12 दिनों की उम्र की मक्खियों को एक बार में संज्ञाहरण एक लाइन के बिना एक परीक्षण कक्ष में फ्लिप करें और उन्हें पांच मिनट तक ठीक होने दें।

पांच सेंटीमीटर की रेखा को नीचे की ओर चिह्नित करने के साथ, एक ठोस सतह पर रखे माउस पैड पर तीन बार कक्ष को जबरन टैप करें ताकि सभी मक्खियां नीचे की परख शुरू कर सकें। 10 सेकंड की अवधि में फ्लाई लोकोमोशन का निरीक्षण करें । इस समय के भीतर पांच सेंटीमीटर लाइन तक पहुंचने या पास करने वाली मक्खियों की संख्या को रिकॉर्ड करें और साथ ही परीक्षण की गई कुल संख्या । एक दूसरा परीक्षण शुरू करने से पहले एक मिनट रुको । प्रति तीन परीक्षणों की प्रतिकृति रेखा की एक न्यूनतम दोहराने की रेखा ।