Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- 岛屿检测由一盘肥皂水中凸起的白色平台组成,由透明盒子覆盖,一侧为开放面。 盒子顶部的摄像头记录平台的头顶图像,并放置灯光以确保该地区的照明。
要将苍蝇装载到竞技场上,请将小瓶对平坦的表面敲击,将所有苍蝇带到底部。 接二连三,取下小瓶插头,将小瓶的开端敲到平台上,同时将所有苍蝇击出。 降落在平台上会触发逃生响应。 具有典型移动性的苍蝇可以在几秒钟内清除平台,这与有运动缺陷的苍蝇不同。
受试者被限制在盒子里,那些降落在肥皂水上的受试者会因为肥皂减少水的表面张力而迅速沉入水中。为了评估不同条件下的运动行为,在设定的时间段后计算平台上剩余的苍蝇。
在此示例协议中,我们将看到与半自动图像分析兼容的岛屿检测设置。
-首先,在生物复制时,每个实验条件下至少准备三小瓶。每只小瓶应包含大约15只性别相同、年龄相仿的苍蝇。重要的是,苍蝇必须有完整的翅膀。
创建文件夹以存储实验。在由条件定义的目录结构中生成这些并复制。 例如,如果实验有两个基因型,每个基因型有五个复制品,则创建一个带有实验日期的主文件夹,并在该文件夹内为每个基因型创建一个子文件夹。然后,在基因型文件夹中,为每个复制创建子文件夹。
接下来,设置测试设备。在浴盘中加入少量肥皂的冷水,如果浴缸中尚未固定,则将平台放置在浴缸中间。用透明盒子盖住托盘和平台。
要照亮平台,请在平台上方放置一个冷却灯,如普通的 12 伏 LED,同时定位连接到平台正上方计算机的摄像头。
在计算机上,打开图像记录软件。 从菜单系统中,选择适当的网络摄像头作为捕获设备。在岛上放置一只死苍蝇来调整视频设置。 调整软件中的亮度、对比度和颜色,使死苍蝇在白色背景下呈黑色。
接下来,调整时差电影设置,以将电影保存为 AVI 文件。 然后,浏览应保存数据的目录并定义电影名称。 保存这些更改。
要压缩图像数据,请选择英特尔 IYUV代码。将录制速度设置为每 0.1秒一帧,并将相应的播放速率调整为每秒 10 张图像。
最后,转到高级设置并选择为每个捕获的帧创建 BNP映像。然后,浏览到您选择托管 AVI文件并按"确定"的同一目录。
在开始之前,确保岛上空无一人,然后,在图像录制软件的时差图像界面中开始录制。
拿一个装有苍蝇的小瓶,轻拍两三次,把所有的苍蝇都敲到底部。然后,迅速从小瓶上取下插头,用力敲击苍蝇到平台上。它们应该几乎同时击中平台。
给苍蝇最多 30 秒离开平台。然后, 停止录制。如有必要, 手动从平台上删除任何剩余的苍蝇。
在进行下一个实验之前,一定重新定义存储下一组数据的目录。