Островный анализ: метод высокой пропускной способности для оценки поведения дрозофилы Локомотива

- Остров анализ состоит из поднятой белой платформы в лоток мыльной воды, покрытые прозрачной коробке с одной открытой стороны. Камера в верхней части коробки записи накладных изображений платформы, и огни размещены для обеспечения даже освещения области.

Чтобы загрузить мух на арену, коснитесь флакона против плоской поверхности, чтобы довести всех мух до дна. В быстрой последовательности, удалите флакон штепсельную вилку, поверните флакон снова, и нажмите открытый конец флакона на платформу, чтобы выбить все мухи в то же время. Посадка на платформе вызывает ответ побега. Мухи с типичной подвижностью может очистить платформу в течение нескольких секунд, в отличие от тех, с локомотивом дефектов.

Субъекты прикованы к ящику, а те, которые приземляются на мыльную воду, быстро погружаются, потому что мыло уменьшает поверхностное напряжение воды.

В этом примере протокола мы увидим установку анализа острова, совместимую с полуавтоматическим анализом изображений.

- Во-первых, подготовить минимум три флакона на экспериментальное состояние в качестве биологического реплицирует. Каждый флакон должен содержать около 15 мух одного пола и аналогичного возраста.

Создайте папки для хранения экспериментов. Создайте их в структуре каталога, определяемой условиями и репликациями. Если, например, эксперимент имеет два генотипа по пять репликаций каждый, затем создайте основную папку с датой эксперимента, а внутри этой папки создайте по одному подфолдеру для каждого генотипа. Затем, в папках генотипа, создайте подсвеки для каждой репликации.

Далее настройьте испытательный аппарат. Добавьте холодную воду с небольшим количеством мыла в лоток для ванны и распоите платформу в середине ванны, если еще не закрепленную в ванне. Накройте лоток и платформу прозрачной коробкой.

Чтобы осветить платформу, распоите крутую лампу, такую как обычные 12-вольтовые светодиоды, над ней. Кроме того, распоить веб-камеру, подключенную к компьютеру непосредственно над платформой.

На компьютере откройте программное обеспечение для записи изображений. Из системы Меню выберите соответствующую веб-камеру в качестве устройства захвата. Поместите мертвую муху на остров, чтобы настроить настройки видео. Tweak яркость, контрастность и цвет в программном обеспечении, так что мертвая муха появляется черный на белом фоне.

Затем отрегулируйте настройку фильма с промежуток времени, чтобы сохранить фильмы в качестве файлов AVI.Затем просмотрите каталог, где данные должны быть сохранены, и определите название фильма.

Для сжатия данных изображения выберите код Intel IYUV. Установите скорость записи до одного кадра каждые 0,1 секунды и отрегулируйте соответствующую скорость воспроизведения до 10 изображений в секунду.

Наконец, перейдите к расширенной настройке и выберите Создайте изображение BNP для каждого захваченного кадра. Затем просмотрите тот же каталог, который вы выбрали для размещения файлов AVI и нажмите OK.

Перед началом, убедитесь, что остров пуст и чист. Затем, начать запись в промежуток времени интерфейс изображения программного обеспечения для записи изображений.

Возьмите флакон, содержащий мух и нажмите его два или три раза, чтобы сбить всех мух вниз на дно. Затем, быстро удалить вилку из флакона и энергично нажмите мух на платформу.

Дайте мухам до 30 секунд, чтобы покинуть платформу. Затем остановите запись.

Прежде чем переступить к следующему эксперименту, непреметь определим каталог, в котором будет храниться следующий набор данных.