Öanalys: En metod med hög genomströmning för att utvärdera Drosophila Locomotors beteende

- Ö-analysen består av en upphöjd vit plattform i en bricka med tvålvatten, täckt av en genomskinlig låda med en öppen sida.

För att ladda flugorna på arenan, knacka en flaska mot en plan yta för att få alla flugor till botten.

Ämnen är begränsade till lådan, och de som landar på tvålvattnet sjunker snabbt eftersom tvål minskar vattenytans spänning.

I det här exempelprotokollet kommer vi att se en inställning av ö-analysen som är kompatibel med halvautomatisk bildanalys.

- Förbered först minst tre injektionsflaska per experimentellt tillstånd som biologiska replikat. Varje injektionsflaska ska innehålla cirka 15 flugor av samma kön och liknande ålder.

Skapa mapparna för att lagra experimenten.

Sätt sedan upp testapparaten. Tillsätt kallt vatten med en liten mängd tvål till badbrickan och placera plattformen i mitten av badet, om den inte redan är fastsatt i badet.

För att belysa plattformen, placera en sval lampa, till exempel vanliga 12-volts lysdioder, ovanför den.

På datorn öppnar du bildinspelningsprogramvaran. Från menysystemet väljer du lämplig webbkamera som inspelningsenhet.

Justera sedan tidsfördröjningsfilminställningarna för att spara filmerna som AVI-filer.

För komprimering av bilddata väljer du Intel IYUV-koden. Ställ in inspelningshastigheten på en bildruta var 0,1 sekund och justera motsvarande uppspelningshastighet till 10 bilder per sekund.

Slutligen går du till inställningen Avancerat och väljer Skapa en BNP-avbildning för varje infångad bildruta.

Innan du börjar, se till att ön är tom och ren. Sedan startar du inspelningen i tidsfördröjningsbildgränssnittet för bildinspelningsprogramvaran.

Ta en flaska som innehåller flugor och knacka den två eller tre gånger för att slå ner alla flugor till botten. Sedan, ta snabbt bort kontakten från flaskan och knacka kraftigt flugorna på plattformen.

Ge flugorna upp till 30 sekunder att lämna plattformen.

Innan du fortsätter till nästa experiment måste du omdefiniera katalogen där nästa uppsättning data ska lagras.