El ensayo CApillary FEeder (CAFE): Un método para rastrear el consumo y la preferencia de los alimentos en Drosophila

- Prepararse para el alimentador capilar, o ensayo CAFE, insertar capilares de vidrio calificados o marcados llenos de color, alimentos líquidos, parte inferior primero, a través de las puntas de pipeta en la parte superior de un vial experimental preensamblado.

Marca el nivel inicial del menisco en cada capilar. Luego alberga los viales en un ambiente de temperatura, humedad y control de luz durante la duración del experimento mientras reemplazas los capilares según sea necesario. Durante el ensayo CAFE, las moscas móviles no están entrenadas y tienen acceso libre al extremo abierto inferior del micropipette.

Para realizar un seguimiento del consumo de alimentos y la preferencia por un período de tiempo establecido, registre el descenso del menisco desde la marca inicial hasta el nivel al final de ese período desde capilares calificados.

- Retire cuidadosamente la punta de la pipeta que está cerrando una de las aberturas externas, e inserte primero un capilar de vidrio relleno, en el extremo inferior.

A continuación, coloque los extremos capilares dentro de todos los viales al mismo nivel, a 3 a 4 centímetros de la tapa. Deje cierta distancia entre el papel filtrante para evitar que el capilar se filtre.

Coloque los ensayos preparados de CAFE en una caja de plástico con una incrustación en cuadrícula. Utilice un bung de esponja para aplicar 100 microlitros de agua dulce cada 24 horas para mantener la humedad constante dentro del ensayo.

Cubra la caja de plástico para crear un ambiente controlado por la humedad durante el experimento.

Al final del ensayo y antes de reemplazar el capilar, mantenga el ensayo CAFE en posición vertical. No retire la tapa y marque el menisco inferior del capilar.

Mide el declive del menisco. Luego desecha los capilares viejos. Luego retira cuidadosamente los capilares del ensayo, y guárdalos para la recolección de datos.

Después del experimento, desmontar la configuración y lavar los viales, tapas y bobitas de esponja en un baño de jabón.