Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 将幼虫定向进行圆角解剖,将其放在含有冷盐水的硅胶涂层盘中,并识别其后部和腹侧。 沿着其长度运行的气管标记了后侧,而腹部凹陷带则识别了腹侧。
然后,随着腹腔侧向上,轻轻地伸展幼虫,将每一端固定在盘子的底部。随着解剖的进行,这个位置将保持感官多树突神经元和相关表皮细胞的后部簇完好无损。
使用解剖剪刀沿着幼虫的腹中线切割。将角质层固定在板上,以平整制备,去除内部结构,露出底层肌肉组织。然后,小心地取出适当的肌肉,露出表皮,在保持其树突形态的同时,获得以前模糊的神经元。
在示例协议中,我们将看到幼虫圆角制备和肌肉去除的详细演示,以查看感觉达神经元和表皮细胞。
- 首先,在硅胶弹性体盘中加入足够的冷盐水,以覆盖底部表面。 将受试幼虫添加到菜中,将其置于立体显微镜下,确保光线的正确放置。 将幼虫与腹腔侧向上放置,这可以通过腹部凹陷带识别。
将幼虫伸展到前后方向,并使用昆虫别针,将头部和尾部固定在菜底。用一把细细的解剖剪刀,沿着幼虫的腹中线从一端切到另一端。将幼虫展开,将角质层组织固定在四个角落,使其平躺。
使用钳子,去除内部器官,包括CNS、肠道和气管。调整昆虫别针,使圆角绷紧,但不会最大伸长。
定位幼虫的后部中线,那里没有肌肉组织,然后将钳子插在边界内部。 滑动肌肉和表皮之间的爪子,小心尽量减少与表皮的接触。
-为了尽量减少对表皮的损伤, 用最平坦的爪子解剖。试着用含钙盐水解剖。这可以帮助在肌肉和表皮之间创造空间。
-接下来, 向上拉力, 在一个锚点打破肌肉与身体壁的连接。对于感兴趣的剩余肌肉部分, 重复这个过程。
重新调整昆虫笔,将幼虫圆角最大地伸展到四面八方。