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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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Interrupción de la cutícula

 
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Interrupción de la cutícula: un método para recoger hemolymph de larvas de Drosophila

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- Para empezar, pipetear una gota de tampón en una almohadilla de disección limpia. Luego, coloque una larva viva seca en la gota. Drosophila, al igual que otros artrópodos, tiene un sistema circulatorio abierto en el que el corazón bombea hemolymph alrededor del cuerpo, bañando los órganos internos.

Luego, deseche el cadáver y transfiera la solución de hemolífanos de la placa de disección a la solución de amortiguación refrigerada en un tubo de microcentrífuga.

- Comenzar la recolección de hemolymph añadiendo 10 microlitros de 1x PBS a un tubo de microcentrífuga, y colocando el tubo sobre hielo.

Usando fórceps, abre suavemente e invierte la cutícula para liberar la hemolífafa, y luego desecha el cadáver. Con una pipeta, recoge la hemolífala de la almohadilla diseccionar. Agrega la hemolífafa al tubo de microcentrífuga PBS helada, y mezcla por pipeteo arriba y abajo.

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