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四向嗅觉仪测定:评估德罗索菲拉气味提示反应的方法

 
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四向嗅觉仪测定:评估德罗索菲拉气味提示反应的方法

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- 四向嗅觉仪一个封闭的腔室每个角落都有单向端口通过可以发出多达种气味,产生具有明显气味特征的象限开始实验清醒苍蝇转移到腔室中。 避免麻醉因为这可能会影响他们在实验的行为

苍蝇暴露清洁空气中,观察它们的运动以确保没有气味污染物会破坏嗅觉计影响飞行行为。 然后,单独的小瓶准备测试气味并通过单向端口将它们连接到腔室。 将苍蝇暴露气味中段时间试验结束后去除刺激

苍蝇走向安顿带有诱人气味的象限往往避免使用驱虫气味象限探索嗅觉仪,通过跟踪它们的位置测量苍蝇的气味提示行为反应

下列协议我们将使用带有空气输送系统的四象限嗅觉仪分析飞行行为,以响应乙基丙酸酯、驱虫苹果这很有吸引力。

- 至少提前五分钟打开温度控制器,将其设置 25 摄氏度。 然后,通过塑料气味连接到竞技场使用电子流量计检查竞技场每个象限中的气流率。确保控制气味每分钟100 毫升的速度运行

- 苍蝇气流非常敏感,在每个实验之前验证每个象限的气流至关重要

- 现在,使用70%乙醇清洁竞技场玻璃。 将所有部件向下拭两,使其在继续完全空气干燥接下来,玻璃夹到竞技场 然后,苍蝇转移到竞技场,无需麻醉 使用重力,让他们通过一个玻璃进入然后圆形网格盖住

现在,满载飞翔的竞技场放入光线密闭的室内,然后将四条控制空气连接到每个竞技场的角落,关闭房间苍蝇适应环境1015分钟。

适应期结束后,进行510分钟的控制实验让苍蝇暴露四条控制现在必须立即分析数据如果苍蝇在竞技场上分布不匀,必须重置竞技场

- 测试控制苍蝇的行为只是为了清洁空气至关重要这将迅速验证所有背景条件是否正常。光线泄漏温度不平衡、竞技场倾斜或气味污染都会导致问题。

- 有必要, 丢弃苍蝇再次清洁竞技场如果怀疑有异味污染 更换所有管子。 继续新的队列重复控制测试直到动物不偏四个象限的任何然后,使用三向测试气味连接到设置重新连接管子运行测试实验 5 10 分钟。 对于更长实验记录,请每 20分钟快速停止重新启动跟踪程序否则数据文件太大

在测试之间丢弃苍蝇,70%的乙醇清洁竞技场玻璃更换连接管。保持干燥的气流不断冲洗系统。为了效率,最好有个竞技场,这样在跑步过程中就可以进行清洁

- 如果在同进行几个实验请格小心以确保系统不再一次运行气味通常不是浓度的气味二氧化碳的问题对于高度集中的刺激,可能需要实验运行之间长达 24 小时的间隔

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