Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Y 迷宫由 Y形连接器组成,三个飞瓶通过直管或锥形管连接到它。苍蝇通过迷宫向一边移动,它们喜欢刺激。要开始实验,将含有挥发性化学物质溶液的纸巾放入每个小瓶中。然后,将它们连接到锥形管。 锥形管限制苍蝇返回迷宫中心的能力,并减缓挥发性化学物质的扩散。
接下来,寒冷饥饿的苍蝇放慢速度。 不要使用化学麻醉,因为这可能会影响检测结果。 迅速将小瓶与冰镇苍蝇连接到迷宫的最后一侧。让苍蝇探索迷宫。为了减少明亮的光线引起的任何偏好,在苍蝇看不到的远红光下执行此步骤。 最后,数一数迷宫两侧的苍蝇。它们在迷宫中的位置表明他们更喜欢挥发性化学气味。
在示例协议中,我们将看到带有野生型德罗索菲拉的 Y 迷宫检测设置。
-在第二天早上进行检测之前,在一天结束的时候,将10到20条实验线转移到玻璃瓶中,用湿毛巾提供水分。苍蝇必须在16至18小时内进行测试,否则它们可能会因干燥或饥饿而死亡。第二天,组装Y迷宫。首先,使用泡沫连接器将 Y 形连接器连接到两个玻璃瓶,并带有修剪的移液器尖端,使管道成为导管。 它们逐渐变小的形状使这些单向通道。
"Y"的第三个分支连接到装载管上, 由移液器尖端的很大一部分制成,并允许从装载小瓶进入迷宫的选择点。每个锥形隧道的外是一个玻璃瓶,其中一个必须装有异味剂。 将这些作为40 微升的螺栓浸泡到28 毫米方形的纸巾中。 两个中哪一个含有异味剂应随机交替。
要进行测试,首先在冰上短暂冷却苍蝇,这样苍蝇就会减速。 这应该是在LED灯泡的远红光下,温度为25摄氏度。轻轻地将一群苍蝇放入装载小瓶中,然后用测试苍蝇装载Y-maze。 不要使用气体麻醉。
- 将苍蝇快速轻轻地转移到装载小瓶上真的至关重要。这实际上是这个实验中最困难的一步,因为苍蝇必须在Y-maze气味扩散之前迅速醒来。
- 应允许苍蝇探索迷宫24小时,因此最多数量的苍蝇移动到一个或另一个玻璃瓶。 不同管中存在的苍蝇数量用于计算嗅觉指数。 应应用标准统计方法从多达10只苍蝇的行为中收集到此值。
如果10只苍蝇的队列不能提供一致的结果,试验可以与20只苍蝇的队列一起运行。要清理迷宫组件,请将其浸泡,拆解,在苏格兰皇家银行 35 MD 过夜。 在此之后,在自来水中冲洗,并在空气干燥前在DI 水中进行最终冲洗。