Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- מבוך Y מורכב ממחבר בצורת Y עם שלושה בקבוקוני זבוב המחוברים אליו באמצעות צינורות ישרים או מחודדים. זבובים נעים במבוך לכיוון הצד עם הגירוי שהם מעדיפים.
לאחר מכן, זבובים מורעבים צוננים כדי להאט אותם .אל תשתמש בהרדמה כימית. כמו זה עשוי להשפיע על התוצאה של ההסמכה. במהירות לחבר את הבקבוקון עם זבובים מצוננים לצד האחרון של המבוך.
בפרוטוקול הדוגמה, נראה התקנה של מבחני המבוך Y עם סוג פראי Drosophila.
- לפני ביצוע ההסתעפות למחרת בבוקר, בסוף היום, להעביר קבוצות של 10 עד 20 קווים ניסיוניים בקבוקונים זכוכית עם לחות המסופקת מגבת רטובה. הזבובים חייבים להיבדק תוך 16 עד 18 שעות, או שהם עלולים למות עקב התייבשות או רעב.
הסניף השלישי של ה-Y מחובר לצינור טעינה, עשוי מחלקו הגדול של קצה פיפטה, ומאפשר מעבר מבקבוקון הטעינה לנקודת הבחירה של המבוך. מעבר לכל מנהרה מתחדדת יש בקבוקון זכוכית, שאחד מהם חייב להיות טעון בריח.
כדי לבצע את הבדיקה, תחילה לקרר את הזבובים על הקרח בקצרה, כך הזבובים מואטים. זה צריך להיות תחת אור אדום רחוק מנורות LED ב 25 מעלות צלזיוס.
- זה באמת קריטי להעביר את הזבובים אל בקבוקון הטעינה הן במהירות והן בעדינות.
- זבובים צריך להיות מותר לחקור את המבוך במשך 24 שעות, כך מספר מרבי של זבובים לעבור בקבוקון זכוכית זה או אחר. מספר הזבובים הנוכחים בצינורות השונים משמש לחישוב מדד הריח. שיטות סטטיסטיות סטנדרטיות יש להחיל על ערך זה, שנאספו מן ההתנהגות של עד 10 זבובים.
אם קבוצות של 10 זבובים אינן מספקות תוצאות עקביות, ניתן להפעיל את הניסויים עם קבוצות של 20 זבובים.
