Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- إعداد يرقات دروسوفيلا لإجراء فحص مسبار حراري، وجمع الحيوانات في مرحلة النمو المطلوبة، ونقل يرقات واحدة على طبق اختبار مع طبق رقيق من الماء.
تكتشف يرقات دروسوفيلا المحفزات الحرارية الضارة من خلال الخلايا العصبية الحسية متعددة الخلايا في البشرة المعروفة باسم nociceptors.
تعيين مسبار الحرارة إلى درجة حرارة من شأنها أن تتغلب على هذه العتبة الحسية، وتسبب nociceptors لاطلاق النار. اضغط بلطف غيض من التحقيق ضد اليرقة لتطبيق الحرارة.
في بروتوكول المثال ، سنرى عرضا توضيحيا لمسبار حراري موضعي على يرقات Drosophila الثالثة المبكرة.
- أولا، ضبط درجة حرارة المسبار الحراري مسبقا إلى النقطة المحددة المطلوبة. استخدم فرشاة طلاء أو ملقط لنقل يرقة فردية برفق على منصة مسطحة، مما يضمن تغطية الحمم بسمكة رقيقة من الماء.
- من أجل تقليل الاختلاف في الضغط، وكذلك لضمان الموقع الصحيح وزاوية من مسبار الحرارة، والممارسة يجعل الكمال.
- اضغط بلطف على طرف المسبار ضد اليرقة في الجزء A4 ، مع تطبيق ضغط خفيف مع الطرف بزاوية 45 درجة تقريبا بين المسبار وسطح اليرقة.
عادة ما تظهر اليرقات المستجيبة أولا سلوكا أوليا لرفع الرأس والذيل ، يليه سلوك الانسحاب المتداول 360 درجة على الأقل. بمجرد بدء سلوك الانسحاب ، وإطلاق الاتصال بالمسبار ، وتسجيل الكمون ، أو الوقت المستغرق للانسحاب.