Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 为准备热探头检测的果蝇幼虫,收集发育阶段所需的动物,并将单个幼虫转移到带有薄薄水膜的测试板上。水允许幼虫自由移动而不粘附在板面上。
嗜血性幼虫通过表皮中的多发性感觉神经元(称为诺西克索)检测有毒的热刺激,这些神经元在达到某种感官阈值(如潜在有害的高温)之前不会燃烧。
将热探针设置为温度,以克服此感官阈值,并导致新感官起火。 轻轻将探针的尖端压在幼虫身上以施放热量。 幼虫会以热感知行为对有害温度做出反应,从探针中退出。当幼虫在远离热探头时或在定义时间过去时表现出 360 度的作用时,请停止。 记录响应时间。
在示例协议中,我们将看到第三星果蝇幼虫的局部热探头检测演示。
- 首先,将热探头的温度预设到所需的设定点。使用画笔或钳子将单个幼虫轻轻地转移到平坦的平台上,确保熔岩被薄薄的水膜覆盖。
- 为了最大限度地减少压力的变化,以及确保热探头的正确位置和角度,实践使完美。
- 轻轻按压A4段幼虫的探针尖端,在探头和幼虫表面之间约45度角处用尖端施加光压。压力应导致幼虫表面轻微凹痕,通常足以防止运动。 继续刺激幼虫,直到表现出退出反应或达到20秒的截止点。
响应幼虫通常首先表现出抬起头部和尾部的初步行为,然后是滚动至少360度的退出行为。一旦启动取款行为,释放与探头的接触,并记录延迟或取款时间。如果在20秒内未观察到任何取款行为,则幼虫为非响应者。