로컬 열 프로브 분석: 드로소필라 애벌레에서 고온의 고치름을 평가하는 방법

- 열 프로브 분석에 대한 Drosophila 애벌레를 준비하고, 원하는 발달 단계의 동물을 수집하고, 물 막으로 테스트 플레이트에 단일 애벌레를 전송합니다.

Drosophila 애벌레는 nociceptors로 알려진 그들의 표피에서 다중 장어 감각 신경을 통해 유해한 열 자극을 검출합니다.

이 감각 임계값을 극복할 온도로 열 프로브를 설정하고, 공각자가 발사되는 온도로 설정합니다.

예제 프로토콜에서, 우리는 초기 세 번째 인스타 Drosophila 애벌레에 국소열 프로브 분석의 데모를 볼 수 있습니다.

- 먼저, 열 프로브의 온도를 원하는 설정점으로 미리 설정합니다.

- 압력의 변화를 최소화하고 히트 프로브의 정확한 위치와 각도를 보장하기 위해 연습이 완벽합니다.

- A4 세그먼트에서 애벌레에 대한 프로브 팁을 부드럽게 누르고, 프로브와 유충의 표면 사이의 약 45도 각도로 팁으로 가벼운 압력을 가합니다. 압력은 애벌레 표면에 약간의 들여쓰기를 야기해야 하며, 일반적으로 운동 을 방지하기에 충분합니다.

반응애는 전형적으로 먼저 머리와 꼬리를 들어 올리는 예비 적 행동을 보여주고, 그 다음에 최소 360도 굴리는 철수 동작이 시작되면, 프로브와의 접촉을 해제하고, 대기 시간을 기록하고, 철수로 이동한 시간을 기록합니다.