从成年苍蝇中分离米古特：分离消化道的方法

- 首先，从麻醉成人苍蝇身上取下头部。用含有磷酸盐缓冲盐水（PBS）和牛血清白蛋白（BSA）的溶液覆盖被斩首的苍蝇，以避免干燥。 用钳子抓住苍蝇，然后用第二对钳子拉腹部露出肠道。 由于作物，或食物储存袋，将连接到胸腔，轻轻地拉离胸部的肠道。

一旦分离， 将作物从腹部拉开以展开肠道。 拉下苍蝇的后端，开始从腹腔中释放肠道。继续拉扯肠道，将整个组织从腹部拉出来。一旦释放，取出前肢、马尔皮吉安管、后腹和卵巢，只留下解剖的中腹，即苍蝇消化的主要部位。

在示例协议中，我们将剖析来自年轻和老年成年苍蝇的中谷，以便通过荧光激活细胞分类（FACS）进一步分析。

- 在开始解剖之前，在标准飞床上用二氧化碳麻醉40只苍蝇中的一小瓶。然后使用剃须刀刀片斩首所有苍蝇，并将它们转移到涂有蔗糖凝胶的解剖盘中。将足够冷的 PBS加BSA倒入菜中，以覆盖糖。 苍蝇会漂浮。

然后，对于每种昆虫，依次用一对钳子抓住一个苍蝇腹部，用另一对钳子抓住胸腔。 将胸腔与腹部分离。 肠道是可见的，作物很可能仍然与胸腔相连。 抓住肠道，把它从胸腔中拉出来。然后，抓住作物，将肠道稍微前移开腹部展开。

接下来，使用其中一个钳子抓住腹部的后端， 和另一个抓住前开的牛皮层的边缘。拉开后端，打破皮质层，继续非常轻轻地拉后，直到整个肠道被拉出腹腔。 取出前置管、马尔皮吉安管、后肠和卵巢，留下裸露的中腹。

由于中腹是孤立的，使用玻璃巴斯德移液器定期将几个肠道组织一次转移到一个1.5毫升的微中量管含有冷PBS加BSA在冰上。