Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- כדי להתחיל, להסיר את הראש מהלך מבוגר מורדם. לכסות את הזבוב ערוף עם פתרון המכיל מלוחים פוספט-Buffered, או PBS, ו Bovine סרום אלבומין, או BSA, כדי למנוע התייבשות.
לאחר ניתוק, למשוך את היבול מן הבטן כדי לפתוח את המעיים.
בפרוטוקול הדוגמה, ננתח מידגוטים מזבובים צעירים ומבוגרים כדי שניתחו אותם עוד יותר באמצעות מיון תאים המופעל על-ידי פלואורסצנטיות, או FACS.
- לפני תחילת הניתוח, להרדים בקבוקון אחד של 40 זבובים עם פחמן דו חמצני על מיטת זבוב סטנדרטית.
לאחר מכן, עבור כל חרק, בתורו, לתפוס בטן זבוב עם זוג אחד של מלקחיים, ואת בית החזה עם אחר.
לאחר מכן, השתמש באחד המלקחיים כדי לתפוס את הקצה האחורי של הבטן, והשני כדי לתפוס את קצה הקוטיקולה הפתוחה בזדון. משוך את הקצה האחורי כדי לשבור את הקוטיקולה, והמשך למשוך את החלק האחורי בעדינות רבה, עד שהמעיים כולו נשלפו מחלל הבטן.
כמו midguts מבודדים, להשתמש פיפטה פסטר זכוכית להעביר מעת לעת כמה רקמות מעיים בכל פעם צינור microcentrifuge 1.5 מיליליטר המכיל PBS קר בתוספת BSA על קרח.
