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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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酵素消化と手動解離

 
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酵素消化と手動解離:細胞培養のための C.エレガンス 胚を準備する方法

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- グラビッド成虫を漂白して単離したペレットから始める培養細胞汚染けるために、この手順ステップ無菌で行われること確認してください

適切消化期間穏やかに遠心分離し、澄みを細胞培養培地置き換えて消化める。その後、18ゲージの針通して機械的に分離された個々の細胞に次に、または未分離の細胞から破片取り除くために溶液濾過する

このプロトコル例ではインビトロ形態分解析のための細胞準備する

- 細菌汚染けるために状流れフードの下で働いているペレット化された1ミリリットルのキチナーゼあたり2ミリグラム再中断新鮮な15ミリリットルの円錐形チューブします

上澄みを慎重に取り除いた、L15培地3ミリリットルえ、直径6センチメートルプレート、18ゲージの針10ミリリットルの滅菌注射器使用して手動解離を開始します。

セルの束を削除するには未消化の卵と孵化した幼虫、5ミクロンのフィルターを通してサスペンション静かに濾過フィルター通してさらに4〜5ミリリットルL15培地実行して細胞回収します

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空の値 発行
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