C. 埃莱甘斯 化疗分析：在蠕虫中测试化学感官的方法

- 为了理解遇到的情况并相应地作出反应，蠕虫C.elegans有一个高度发达的化疗系统，能够检测各种不同的化学物质。

头部的感官神经元、两栖神经元和内阴唇神经元，以及尾部的神经元，即相位神经元，通过角质层直接或间接暴露在外部条件下。 这些化疗神经元编码蠕虫用来产生适当行为反应的相关信息：一种称为化疗的行为。

为了测试对挥发性气味或阵风水溶性线索的化学反应，隔离所需发育阶段的蠕虫，并在先前准备的实验场上将蠕虫暴露在测试化学品中。当暴露在细菌食物来源等有利化学物质中时，C.elegans会向源头显示积极的化疗。

相反，当接触到较不有利或有毒的化学物质（如重金属）时，蠕虫会表现出负化疗，从而避免这种化学物质。因此，嗅觉或阵风突变体无法避免易感化学物质，与避免逆境的野生类动物相比，它仍处于不利状态。

在示例协议中，我们将看到化疗检测的演示，测试蠕虫对铜的厌恶。

- 经过一夜孵化，从孵化器中取出板材，并以板下方标记为导，在铝边上用新制备的0.5摩尔铜两硫酸盐溶液的100微升移液形成外侧铜屏障。 Pipette 25微升的铜两个硫酸盐溶液形成中线屏障。

确保铜两种硫酸盐溶液不接触细菌斑块，并让铜溶液干燥到板上。 用实验室组织转移后每五分钟检查一次干燥情况，轻轻擦拭板边附近的溶液以辨别。

在检测之前，将实验生物转移到无细菌的阿加板上，让线虫自由移动一分钟，以去除多余的细菌。

接下来，将1毫升M9的移液器与24小时前转移的年轻成年人一起放入盘子中，以便将蠕虫洗成微中性管。

蠕虫应在管子底部形成颗粒。 吸气M9溶液，同时不破坏蠕虫颗粒。向蠕虫颗粒添加1 毫升 M9 溶液。 倒管将蠕虫与溶液混合。

如果多余的细菌最初与蠕虫一起转移，一共重复五次。 最后洗涤后，吸气超自然，直到100微升的M9溶液和蠕虫颗粒仍然存在。洗涤步骤完成后，立即从溶液中转移蠕虫。

Pipette 20 微升的蠕虫颗粒从管子底部进入检测板的无菌半部分。确保 10 个蠕虫被转移到检测板上，并且不存在任何污染物食物。任何细菌都不应转移到铜食品比赛板上。

用实验室组织从线虫中取出多余的M9溶液，确保M9溶液不接触铜两种硫酸盐溶液，并确保蠕虫和阿加表面完好无损。 丢弃与实验室组织意外去除的蠕虫。

一旦M9溶液被移除，所有蠕虫都开始出现非液体运动模式，即当它们停止鞭打时，启动检测秒表。如果意外地包括额外的蠕虫，则用卤素油采摘来去除它们，以确保板中不会添加细菌。

每30分钟检查一次检测板。对于带有细菌斑块的检测板，如果生物在4小时内到达食物区，则对生物体进行正评分。对于负控制板，如果生物越过屏障，则对生物体进行正评分。