فحص التاكسي الكهربائي: طريقة لمراقبة الحركة في C. ايليجانس

- بدون محفزات حسية ، C. ايليجانس تكون الحركة بشكل عام إلى الأمام وتنقطع عن طريق الانعكاسات والانعطافات - مناورات إعادة توجيه عشوائية تؤدي إلى تغيير الاتجاه. C. ايليجانس هي مستقبلة للكهرباء. أي أنهم يستشعرون بالمجالات الكهربائية. عند تعرضها لتيار مباشر خفيف أو تيار مستمر ، تتحرك الديدان في مسار مستقيم دون انقطاع في اتجاه القطب السالب أو الكاثود ، وهو سلوك يسمى التاكسي الكهربائي.

لمراقبة حركة الدودة بشكل أكثر دقة ، ضع في جهاز ميكروفلويديك وقم بتطبيق مجال كهربائي للتيار المستمر. اعكس اتجاه الحقل ، وستتحول الدودة في الاتجاه المعاكس - باتجاه الكاثود. قم بتطبيق تيار متناوب ، تيار متردد ، وستتوقف الدودة. يطغى التغيير المتناوب في اتجاه الحقل على الأنظمة الحركية العصبية للدودة ، مما يؤدي إلى تثبيت الدودة. أعد تطبيق مجال التيار المستمر ، وستستأنف الدودة الحركة الأمامية نحو الكاثود.

في مثال بروتوكول المثال التالي ، سنرى إعدادا يوضح اختبار التاكسي الكهربائي في جهاز ميكروفلويديك.

- ابدأ هذه الخطوة بوضع القناة الدقيقة المجمعة للتو على مرحلة xy متحركة من المجهر مع كاميرا مثبتة متصلة بشاشة. قم بتوصيل مصدر الطاقة بأقطاب القناة الصغيرة.

بعد التأكد من أن مقاومة القناة الدقيقة تبلغ حوالي 0.6 ميجا أوم ، قم بتوصيل أنبوب الإخراج للقناة الصغيرة بحقنة يمكن التخلص منها. ثم اغمر فم أنبوب المدخل في محلول من الديدان الخيطية المعلقة في المخزن المؤقت الفسيولوجي M9. ضع ضغطا سلبيا داخل المحقنة لشفط السائل في القناة.

عندما تمتلئ أنابيب المدخل والمخرج على حد سواء ، افصل المحقنة وقم بمعالجة التدفق بشكل مائي ساكن عن طريق ضبط الارتفاع النسبي للأنبوب لوضع دودة في وسط القناة. ثم ضع كلا الأنبوبين بشكل مسطح على نفس الارتفاع. للحفاظ على التدفق الصفري داخل القناة الدقيقة عند تبديل عينات الدودة أثناء تجربة التاكسي الكهربائي ، بعد تسوية كلا أنبوبي المدخل إلى نفس الارتفاع ، إذا كان لا يزال هناك تدفق ، فقم بإجراء تعديلات صغيرة على ارتفاع الأنبوب بالنسبة لبعضهما البعض.

- إذا لم نكن متأكدين مما إذا كان التدفق صفرا حقا ، فيمكننا إحداث انعكاس في حركة الدودة عن طريق تغيير قطبية المجال الكهربائي ثم تقييم السرعة الخطية للدودة أثناء دورانها.

- الآن ، اضبط مصدر الطاقة على الجهد المناسب. قم بتنشيط الإشارة الكهربائية ، واترك دقيقة واحدة من التعرض المسبق للدودة للتأقلم مع الحقل ، وخلال هذه الفترة يجب أن تبدأ الدودة في التحرك نحو الكاثود. عندما تمر الدقيقة، ابدأ التسجيل.

عند الانتهاء من التجربة ، قم بإزالة كل السوائل والديدان من القناة. اشطف الحجرة بالماء منزوع الأيونات واترك الجهاز على لوح ساخن على حرارة 125 درجة مئوية حتى يجف.